老年患者医院获得性肺炎血清可溶性髓系细胞触发受体—1、核转录因子—κB和白细胞介素—8水平变化的研究

王彦蕊等

[摘要] 目的 观察老年患者医院获得性肺炎（HAP）血清可溶性髓系细胞触发受体-1（sTREM-1）及相关炎症因子水平变化，探讨老年HAP患者的全身炎症反应状态。 方法 20例老年HAP患者和20例健康体检者，于入组第1、5、10天检测血清sTREM-1、核转录因子-κB（NF-κB）、白细胞介素8（IL-8）的浓度，结合临床肺部感染评分（CPIS）分析上述指标与肺炎严重程度、预后的相关性。 结果 肺炎组血清sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度较对照组显著增高，上述指标与CPIS评分呈正相关。结论 sTREM-1、NF-κB、IL-8是HAP诊断的良好指标，sTREM-1、NF-κB、IL-8水平与HAP的严重程度呈正相关。

[关键词] 医院获得性肺炎；可溶性髓系细胞触发受体-1；核转录因子-κB；白细胞介素-8

[中图分类号] R563.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）29-0004-03

Changes of serum sTREM-1， NF-κB and IL-8 levels in senile patients with hospital-acquired pneumonia

WANG Yanrui ZHANG Zhimin CHEN Yu TENG Zhongqiang FU Lingling LIN Juan

Pneumology Department， the Affiliated Hospital of Fujian Health College， Fujian Province Governmental Hospital， Fuzhou 350003， China

[Abstract] Objective To observe the changes of soluble triggering receptor expressed on myeloid cell-1（sTREM-1）and inflammatory mediators in serum of senile patients with hospital-acquired pneumonia and explored the state of local inflammatory response in HAP. Methods Twenty senile patients with HAP and twenty healthy controls were included. Serum sTREM-1， nuclear factor-κB （NF-κB） and interleukin-8 （IL-8） were detected on day 1， 5， 10. Combined with CPIS score to analyze the correlation of these indicators and the severity and prognosis of pneumonia. Results The concentrations of sTREM-1， NF-κB and IL-8 in serum were significantly higher than those in controls. There was a significant positive correlation between the sTREM-1， NF-κB and IL-8 and CPIS score. Conclusion sTREM-1， NF-κB and IL-8 is a good marker in diagnosing pneumonia. The levels of sTREM-1， NF-κB and IL-8 have a positive correlation with severity of HAP.

[Key words] Hospital-acquired pneumonia； Soluble triggering receptor expressed on myeloid cell-1； Nuclear factor-κB； Interleukin-8

医院获得性肺炎（HAP）是指患者入院时不存在、也不处于感染潜伏期，而于入院≥48 h在医院内发生的肺炎，包括在医院内获得感染而于出院后48 h内发生的肺炎。HAP的发病率和死亡率较高，我国HAP发病率约1.3%～3.4%，居第一位的是医院内感染（占29.5%）[1]，病死率约30%～70%[2]。尤其老年HAP患者，起病症状多表现为呼吸困难或神志改变等，而缺乏发热、咳嗽、咳痰等呼吸道症状，因此多造成延迟诊断和治疗。如何快速、准确地进行诊断，判断病情轻重程度，从而采取不同的治疗方案是HAP诊治的关键。近年来，研究表明炎性标志物sTREM-1的浓度在肺炎早期显著升高，并与感染的严重程度密切相关，本研究通过ELISA法测量老年HAP患者和对照组血清sTREM-1、NF-κB、IL-8水平，结合患者肺炎严重程度与预后，探讨sTREM-1在老年HAP早期诊断的价值，以及上述三者与肺炎严重程度和预后的相关性。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择2011年6月～2012年5月间于我院住院的20例HAP患者为研究对象，均符合2012年《中国卫生部制定的肺炎诊断标准》[3]且年龄≥70岁，排除肺囊肿、支气管扩张、囊性肺纤维化、急性肺结核、社区获得性肺炎、慢性阻塞性肺疾病等其他呼吸系统疾病及其他脏器感染者。诊断为HAP当天即纳入研究，为入组第1天。收集同期在我院体检中心和门诊年龄匹配的健康体检者为对照组。对入选患者及家属均告知本研究目的、方法及可能出现的风险，并签署知情同意书。因病情较重，患者本人无法签署者由其法定授权委托人代签。

1.2 方法

1.2.1 一般资料收集 记录患者的一般资料，包括年龄、性别、体温、血压、红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）检测、临床肺部感染评分所包含的数据。

1.2.2 血清检测 留取HAP患者入组后第l、5、10天及正常对照组静脉血5 mL，标本获取60 min内离心（4000 r/min）5 min，其后分离血清，置-70℃冰箱保存。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清sTREM-l、NF-κB、IL-8浓度（ELISA试剂盒购于上海西唐生物科技有限公司）。ESR、CRP的检测由我院检验科完成。

1.2.3 临床肺部感染评分 收集HAP患者医学资料，按照CPIS标准评分，其中轻度肺炎<6分，重度肺炎≥6分。由两位不知道血清学检测结果的高年资呼吸科医师独立打分，数据录入时取平均值。

1.3 统计学分析

所有数据均采用SPSS 19.0统计学软件进行分析。计量资料满足正态分布，以均数±标准差（x±s）表示，两组资料比较用t检验，多组资料比较用ANOVA单因素方差分析。计数资料比较采用χ2检验。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，计算敏感性、特异性及曲线下面积。采用Spearman相关分析计算变量之间的相关性。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清sTREM-1、NF-κB、IL-8对于老年患者HAP早期的诊断价值

在发病当天，sTREM-1、NF-κB、IL-8诊断老年患者HAP的敏感度分别为75%、75%、65%，特异度分别为100%、85%、90%。ROC曲线下面积分别为0.965、0.927、0.870。CRP、ESR敏感度分为90%、80%，特异度为45%、55%，见图1、表1。

2.2 sTREM-1、NF-κB、IL-8与老年患者HAP严重程度的关系

根据CPIS评分评估20例老年HAP患者肺炎严重程度，分为轻度、重度，不同严重程度老年HAP患者血清sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度见表2。血清sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度随CPIS评分增高而增高，重度组浓度明显高于轻度组（P=0.009、0.001、0.000）。

表2 sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度与肺炎严重程度（CPIS评分）的关系（x±s）

2.3 sTREM-1、NF-κB、IL-8与老年HAP预后的相关性分析

老年HAP患者CPIS评分在抗感染治疗后，于住院第1、5、10天逐渐下降（P<0.01），血清sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度在治疗后亦均下降（P均=0.000），见表3。sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度变化与CPIS评分变化均呈正相关（rs=0.308，P=0.017；rs=0.716，P=0.000；rs=0.423，P=0.001）。

3 讨论

髓系细胞触发受体-l（TREM-1）是一种表达于白细胞的细胞膜表面受体，选择性地表达于中性粒细胞和部分单核细胞，当TREM-l与其配体结合后，与跨膜受体分子DAP12耦联，通过DAP12的免疫受体酪氨酸激活基序传递活化信号，使活化T细胞核因子、NF-κB及核苷酸结合寡聚化结构域（NOD）1、NOD2等转录因子活化[4]，最终导致细胞分泌IL-8、TNF-α和IL-1等促炎因子并表达于细胞表面分子，在炎症反应中高表达的TREM-1可从细胞表面脱落，成为游离状态（sTREM-1）。可见，TREM-1可引起炎症反应增强、放大，导致“过度”的炎症反应。鉴于sTREM-1的检测方法如ELISA、快速免疫印迹技术等快速、便宜，因此sTREM-1可作为一种好的候选指标用于炎症性疾病的诊断。Bouchon等[5]研究发现，如果存在细菌感染如铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌，真菌感染如曲霉菌时，病原体培养液、腹腔灌洗液、感染部位的组织样本中均能检测到sTREM-1浓度的上调。在接受机械通气治疗患者的支气管肺泡灌洗液中，可以通过检测sTREM-1的浓度来有效、正确地诊断出细菌性和真菌性肺炎[6，7]。NF-κB在炎症反应中调节大量前炎症基因表达，在机体产生对病原体的快速防御和诱导早反应基因表达中发挥重要作用。Paterson等[8]发现全身炎症反应综合征患者外周血中性粒细胞、单核细胞中NF-κB活性明显增强；通过APACHE-Ⅱ评分量化，NF-κB活性水平与疾病严重程度相关，死亡组患者NF-κB活性明显高于生存组。单核细胞和血管内皮细胞产生的IL-8可作为趋化因子，吸引和激活中性粒细胞，使之发生形态变化，定向游走到感染部位，并释放溶酶体和过氧化物酶，导致机体局部炎症反应，达到消灭病原微生物和细胞损伤的目的。Tumgor等[9]报道社区获得性肺炎患者急性期血清IL-8浓度明显高于正常对照组，说明该因子在肺部炎症反应中有重要作用；左慧敏等[10]研究显示支原体肺炎患者血清中IL-8浓度在急性期、恢复期较正常对照组明显升高，提示IL-8参与了支原体肺炎的发病过程。本研究通过观察老年HAP患者血清sTREM-1及相关炎症因子水平变化，探讨老年HAP患者的全身炎症反应状态。结果显示，老年HAP患者在发病早期血清sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度明显升高，虽其诊断肺炎的敏感度不及临床已广泛应用的ERS、CRP，但其特异性明显高于上述指标。在老年患者可疑医院获得性肺炎时，进行血清sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度的检测，能更准确地诊断HAP。ROC曲线也直观地反映了检测sTREM-1、NF-κB、IL-8可以有效地诊断医院获得性肺炎。

在评价病情严重程度方面，本研究通过CPIS评分将老年HAP患者划分为轻度、重度两组，结果提示患者病情越重，血清sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度越高，上述指标血清浓度与肺炎严重程度存在相关性。CPIS评分与肺炎的预后关系密切，分值较低的患者预后较好。在本研究中，抗感染治疗有效的老年HAP患者，病情好转，血清sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度及CPIS评分下降，CPIS变化与sTREM-1、NF-κB、IL-8的变化呈正相关。如果患者血清sTREM-1、NF-κB、IL-8浓度持续升高，应考虑到患者预后欠佳，对sTREM-1、NF-κB、IL-8的动态观察能更好地掌握患者病情变化和判断预后。

通过本研究，确定了上述三种细胞因子与老年HAP的发生发展密切相关，发病早期sTREM-1、NF-κB、IL-8水平显著增高，随病情好转逐渐降低，动态观察三者变化能反映治疗效果与判断预后，故可作为病情及评估预后的监测指标，具有一定的临床价值。

[参考文献]

[1] 中华医学会呼吸病学分会. 医院获得性肺炎诊断和治疗指南（草案）[J]. 中华结核和呼吸杂志，1999，22（4）：201-203.

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[3] 中华人民共和国卫生部. 肺炎诊断，WS 382-2012[S]. 2012.

[4] Cohen J. TREM-1 in sepsis[J]. Lancet，2001，358（9284）：776-778.

[5] Bouchon A，Facehetti F，Weigand M A，et al. TREM-1 amplifies inflammation and is a crucial mediator of septic shock[J]. Nature，2001，410（6832）：1103-1107.

[6] Allaouchiche B，Boselli E. Soluble TREM-l and the diagnosis of pneumonia[J]. N Engl J Med，2004，350（18）：1904-1905.

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[8] Paterson RL，Galley HF，Dhillon JK，et al. Increased nuclear factor kappaB activation in criticaIly ill patients who die[J]. Crit Care Med，2000，28：1047-1051.

[9] Tumgor G，Yildizdas D，Alhan E，et al. Aetiologcal agents，interleukin-6，interleukin-8 and CRP concentrations in children with community and hospital-acquired pneumonia[J].Ann Trop Paediatr，2006，26（4）：285-291.

[10] 左慧敏，刘秀云，江载芳. 白介素8、白介素10及γ-干扰素在肺炎支原体肺炎中的作用[J]. 中国实用儿科杂志，2008，23（4）：269-271.

（收稿日期：2014-07-28）

通过本研究，确定了上述三种细胞因子与老年HAP的发生发展密切相关，发病早期sTREM-1、NF-κB、IL-8水平显著增高，随病情好转逐渐降低，动态观察三者变化能反映治疗效果与判断预后，故可作为病情及评估预后的监测指标，具有一定的临床价值。

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（收稿日期：2014-07-28）

通过本研究，确定了上述三种细胞因子与老年HAP的发生发展密切相关，发病早期sTREM-1、NF-κB、IL-8水平显著增高，随病情好转逐渐降低，动态观察三者变化能反映治疗效果与判断预后，故可作为病情及评估预后的监测指标，具有一定的临床价值。

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（收稿日期：2014-07-28）