IL－27在非小细胞肺癌患者外周血中的表达

鄢 文 靳 文 王 昂 宋维舒

肺癌是我国乃至世界范围内上首要癌症死亡原因，其中80%～85%为非小细胞肺癌(Non-small-cell lung cancer，NSCLC)。尽管早期诊断和治疗能够有效改善肺癌患者预后，但总体上来看肺癌预后未获得明显改善，其5年生存率也仅为15%左右，原因在于多数肺癌获得有效诊治已处于晚期［1－2］。近来研究发现 IL-27具有抗血管生成和抗肿瘤作用［3］。本研究通过检测非小细胞肺癌患者外周血IL-27水平，探讨IL-27与非小细胞肺癌的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2012年12月～2014年3月在我院就诊的非小细胞肺癌患者50例，入选患者需满足以下条件:首次在我院确诊，未行放疗、化疗等治疗，排除自身免疫性疾病、冠心病、心肌病以及血液系统疾病。另选取8名健康志愿者作为对照组。

1.2 研究内容

1.2.1 入选研究对象一般情况和分组 详细记录入选研究对象临床资料，利用PET-CT或CT检查明确肿瘤大小和转移情况明确患者分期，并以此为依据分为非小细胞肺癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期以及对照组。

1.2.2 IL-27等炎症因子检测 所有入选患者采集空腹静脉血6 ml，以3000转/min离心10 min取上清贮存于－80℃冰箱备存待检，采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测非小细胞肺癌患者外周血细胞因子IL-27、IL-12、IL-10的表达水平(具体操作程序参考试剂盒说明书)。

1.3 统计学方法

采用SPSS 16.0统计软件进行数据分析，所有数据以均数±标准差表示。采用单因素方差分析(One-way ANOVA)分析各组间外周血细胞因子IL-27、IL-12、IL-10的表达差异;组间的多重比较采用LSD检验;若方差不齐则采用Welch法，组间多重比较则采用Dunnett's T3。对外周血细胞因子IL-27、IL-12、IL-10表达水平与非小细胞肺癌分级采用Spearman相关分析。p＜0.05时为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般情况

在所入选的50例非小细胞肺癌患者中，鳞癌16例，腺癌34例;根据TNM分期，非小细胞肺癌Ⅰ期7例，Ⅱ期10例，Ⅲ期15，Ⅳ期18例。对照组为8名健康志愿者。

2.2 IL-27等炎症因子在非小细胞肺癌患者外周血中的表达

NSCLC各期患者以及对照组外周血IL-27、IL-12、IL-10等炎症因子浓度进行比较，均存在统计学差异(p＜0.05);其中NSCLCⅢ期和NSCLCⅣ期的IL-27和IL-12浓度分别较其他3组明显降低(p＜0.05)，NSCLCⅢ期和NSCLCⅣ期的IL-10浓度分别较其他3组明显升高(p＜0.05)。见表1。

表1 IL-27、IL-12和IL-10在非小细胞肺癌患者外周血中的表达 (pg/ml)

2.3 IL-27等炎症因子与NSCLC分期的相关性分析

对各组研究对象外周血IL-27、IL-12以及IL-10浓度与NSCLC分期进行Spearman相关性分析显示:外周血IL-27浓度与NSCLC分期呈负相关(r=－0.638，p＜0.001)，外周血IL-12浓度与NSCLC分期呈负相关(r=－0.681，p＜0.001)，外周血IL-10浓度与NSCLC分期呈正相关(r=0.685，p＜0.001)。

3 讨论

免疫炎症反应在肿瘤发生发展中起着重要作用，被认为是肿瘤治疗的新靶点［4－5］。越来越多证据表明免疫炎症与肺癌发病密切相关，主要表现在:长期吸烟发生肺癌的患者常合并存在以肺部慢性炎症为特征的慢性阻塞性肺疾病［6］;肺癌组织中多种免疫炎症细胞浸润［7－8］;炎症通路NF-kB信号在肺腺癌中发挥重要作用等［9］。干预炎症可能是肺癌治疗的新方向。但是目前存在的主要问题是如何识别介导肺癌发生发展的炎症介质以及其潜在作用机制。

炎症因子在肺癌炎症网络中扮演重要作用。已有研究认为IL-6、IL-10、IL-13等细胞因子可能具有促进肺癌进展作用［10］。本研究证实晚期NSCLC患者外周血 IL-27、IL-12表达降低，IL-10表达升高，提示IL-27降低与NSCLC进展相关。IL-27是IL-6/IL-12家族重要成员，主要由单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞等抗原呈递细胞分泌。IL-27主要通过与靶细胞表面(IL-27R)(由WSX-1和gp130组成)特异性结合来实现对靶细胞的调控作用。IL-27与IL-27受体(IL-27R)特异性结合后激活JAK1/2介导的STAT1/3通路对靶细胞进行调控［11］，发挥促炎或抑炎等双向调控作用，表现为通过①促进抗肿瘤作用炎症因子干扰素γ(interferon γ，INF-γ)、TNF-α、IL-12表达;②抑制促肿瘤炎症因子IL-10和IL-17的分泌［12］。这些研究结果提示IL-27可能是炎症反应的核心因子，在不同条件下对炎症调控作用不同。

IL-27与多种肿瘤关系密切。在黑色素瘤研究方面，早期研究认为IL-27通过上调IFN-γ诱导蛋白(IP-10)和IFN-γ诱导的单核因子(monokine induced by gamma-interferon，CXCL9/Mig)的表达而产生了抗肿瘤和抗血管生成作用［3］;进一步研究认为IL-27一方面通过WSX-1/STAT1信号通路直接抑制黑色素瘤增殖［13］，另一方面呈剂量依赖方式促进肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand，TRAIL)的表达抑制人黑色素瘤增殖［14］。在肺癌方面，转染IL-27的小鼠肺腺癌细胞株LLC-1后可减少环氧酶2(cyclooxygenase-2，COX-2)和PGE(2)的表达，抑制 PGE(2)诱导的LLC-1 vimentin表达、迁移和侵袭能力;小鼠体内移植转染IL-27的小鼠肺腺癌细胞株LLC-1后小鼠体内IL-12、INF-γ以及细胞毒性T细胞活性增加，移植瘤生长迟缓［15］;进一步有研究认为IL-27通过直接抑制NSCLC细胞发生内皮间充质细胞转化，抑制NSCLC转移［16］。此外，IL-27与前列腺癌及其骨转移、食管癌淋巴转移等肿瘤密切相关［17－18］。基于当前已有的研究结果，我们认为IL-27不仅能够直接抑制肿瘤增殖迁移，还可能通过调控机体免疫应答抑制肿瘤生长。本研究中，晚期NSCLC患者外周血IL-27表达减少，TH1细胞因子IL-12表达降低，TH2细胞因子IL-10表达增加，提示晚期NSCLC患者外周IL-27减少导致IL-27的促进TH1细胞因子抗肿瘤作用和抑制TH2细胞因子诱导肿瘤免疫耐受作用降低。

综上，本研究提示IL-27不仅具有直接抗NSCLC作用，还可能通过诱导免疫炎症反应发挥抗NSCLC作用。IL-27具有成为NSCLC治疗药物的潜在可能。

［1］Auperin A，Le Pechoux C，Rolland E，et al.Meta-analysis of concomitant versus sequential radiochemotherapy in locally advanced non-small-cell lung cancer［J］.J Clin Oncol，2010，28:2181－2190.

［2］Crinò L，Weder W，van Meerbeeck J，Felip E.Early stage and locally advanced(non-metastatic)non-small-cell lung cancer:ESMO Clinical Practice Guidelines for diagnosis，treatment and follow-up［J］.Ann Oncol，2010，21(suppl 5):v103 －115.

［3］Shimizu M，Shimamura M，Owaki T，et al.Antiangiogenic and antitumor activities of IL-27［J］.J Immunol，2006，176(12):7317－7324.

［4］Elinav E，Nowarski R，Thaiss CA，et al.Inflammation-induced cancer:crosstalk between tumours，immune cells and microorganisms［J］.Nat Rev Cancer，2013，13(11):759 － 771.

［5］Grivennikov SI，Greten FR，Karin M.Immunity，inflammation，and cancer［J］.Cell，2010，140(6):883 －899.

［6］Celli BR.Chronic obstructive pulmonary disease and lung cancer:common pathogenesis，shared clinical challenges［J］.Proc Am Thorac Soc，2012，9(2):74－79.

［7］Gabrilovich DI，Ostrand-Rosenberg S，Bronte V.Coordinated regulation of myeloid cells by tumours［J］.Nat Rev Immunol，2012，12(4):253－268.

［8］Fridman WH，Pagès F，Sautès-Fridman C，Galon J.The immune contexture in human tumours:impact on clinical outcome［J］.Nat Rev Cancer，2012，12(4):298 －306.

［9］Meylan E，Dooley AL，Feldser DM，et al.Requirement for NF-kappaB signalling in a mouse model of lung adenocarcinoma［J］.Nature，2009，462(7269):104－107.

［10］沈 诚，车国卫.炎症因子与肺癌研究进展［J］.中华肿瘤防治杂志，2014，21(2):157－160.

［11］Murugaiyan G，Mittal A，Lopez-Diego R，et al.IL-27 is a key regulator of IL-10 and IL-17 production by humen CD4+T cells［J］.J Immunol，2009，183(4):2435 －2443.

［12］Guzzo C，Che Mat NF，Gee K.Interleukin-27 induces a STAT1/3－and NF-kappa B-dependent proinflammation cytokine profile in human monocytes［J］.J Biol Chem，2010，285(32):24404 －24411.

［13］Yoshimoto T，Morishima N，Mizoguchi I，et al.Antiproliferative activity of IL-27 on melanoma［J］.J Immunol，2008，180:6527－6535.

［14］Chiba Y，Mizoguchi I，Mitobe K，et al.IL-27 enhances the expression of TRAIL and TLR3 in human melanomas and inhibits their tumor growth in cooperation with a TLR3 agonist poly(I:C)partly in a TRAIL-dependent manner［J］.PLoS One，2013，8(10):e76159.

［15］Ho MY，Leu SJ，Sun GH，et al.IL-27 directly restrains lung tumorigenicity by suppressing cyclooxygenase-2-mediated activities［J］.J Immunol，2009，183(10):6217 －6226.

［16］Kachroo P，Lee MH，Zhang L，et al.IL-27 inhibits epithelialmesenchymal transition and angiogenic factor production in a STAT1-dominant pathway in human non-small cell lung cancer［J］.J Exp Clin Cancer Res，2013，32(1):97.

［17］Zolochevska O，Diaz-Qui?ones AO，Ellis J，et al.Interleukin－27 expression modifies prostate cancer cell crosstalk with bone and immune cells in vitro［J］.J Cell Physiol，2013，228(5):1127 －1136.

［18］Diakowska D，Lewandowski A，Markocka－M?czka K，et al.Concentration of serum interleukin－27 increase in patients with lymph node metastatic gastroesophageal cancer［J］.Adv Clin Exp Med，2013，22(5):683－691.