金线莲不同外植体组织培养成苗技术探讨

祁永琼+王丽莉+罗瑞芳+李开云

摘要：以金线莲的顶芽、中部茎段和基部茎段为外植体，研究金线莲组织培养快繁成苗技术。结果表明，初代培养阶段在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中，以顶芽为外植体，诱导率、增殖倍数最高；芽苗增殖阶段，在MS+6-BA 1.5～2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中，3种外植体的芽苗增殖倍数都较高，其中顶芽增殖倍数达到7.5倍；细弱芽苗在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%马铃薯+2%蛋白胨培养基中可长势健壮；最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/ L+2%活性炭+10%香蕉泥。

关键词：金线莲；外植体；组织培养

中图分类号：S682.310.4+3 文献标志码：A

文章编号：1002-1302（2014）08-0057-03

金线莲，又名金线兰、金丝草、树草莲、金线虎头蕉、金线入骨消等，为兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus）植物，是多年生珍稀中草药，在我国云南、四川、广西、福建、台湾等地均有分布，但十分稀少，一般生长于密林下或溪边潮湿的草丛中。金线莲富含氨基酸和多种微量元素，有较高的药用价值，素有“药王”“金草”“神药”“乌人参”等美称，《全国中草药汇编》谓其可治疗肺结核、糖尿病、肾炎、膀胱炎、风湿性及类风湿性关节炎等症；在治疗肝病、排毒去火、降压凉血等方面有独特效果。民间常用其清水煎服或炖汤，治疗小儿惊风、妇女白带以及毒蛇咬伤等。随着金线莲的药用价值日益被人们所认同，在云南的西双版纳、保山、文山、德宏等地，农民无节制、掠夺式采收野生金线莲的现象比较普遍^[1]，且金线莲生长迟缓、开花结果不易，导致资源匮乏。因此，利用植物组织培养技术繁殖成为培育金线莲种苗的重要途径^[2-6]。本试验利用金线莲进行组织培养，以期探索适宜的外植体和高效的成苗技术，培育健壮试管苗。

1 材料与方法

1.1 材料

材料于2010年4月采自云南保山林区，引种于云南农业职业技术学院园艺实验训练基地。

1.2 方法

1.2.1 不同外植体进行初代培养

取生长正常、叶色浓绿、株高5～6 cm的植株茎段，除去根叶，流水冲洗1 h，洗洁精溶液浸泡约10 min，用软毛刷刷洗茎段节处绒毛，用自来水清洗干净。转移至超净工作台上，用75%乙醇灭菌30～60 s，转入0.1%氯化汞中灭菌8～10 min，边浸泡边搅拌以彻底灭菌，然后用无菌水冲洗5次。用解剖刀切取，分为顶芽、带1个节中部茎段和带1个节的基部茎段作为接种的外植体。诱导培养基为M1、M2、M3、M4，分别添加6-BA为0、1.0、2.0、3.0 mg/L，NAA浓度为0.5 mg/L，培养条件为：光照度1 500～3 000 lx，光照时间8～10 h/d，温度（25±2） ℃，MS为基本培养基，pH值为5.8，蔗糖浓度为30 g/L。每处理4瓶，每瓶5个外植体。培养10 d 后统计污染率，培养50 d后统计诱导率、增殖倍数。

1.2.2 不同激素组合对芽苗增殖途径的影响

用解剖刀切取无菌苗茎段，分为顶芽、带1个节中部茎段和带1个节的基部茎段，接种于增殖培养基I1、I2、I3、I4。增殖培养基I1～I4分别为添加6-BA 1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L，添加NAA 0.5 mg/L，培养条件同初代培养。培养50 d后，调查成苗情况，统计增殖倍数、黄化苗率。

1.2.3 壮苗培养

切取增殖培养中产生的芽苗，进一步进行壮苗培养，接种于壮苗培养基H1（MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%马铃薯）、H2（MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%马铃薯+2%蛋白胨）。每处理4瓶。培养 50 d 后，调查芽苗生长情况。培养条件同初代培养。

1.2.4 生根培养

切取约2 cm、生长健壮的茎段，进一步进行生根培养，采用1/2MS+NAA 0.5 mg/L，添加0～2%活性炭、0～10%香蕉泥为生根培养基，将小苗放在生根培养基中进行壮苗生根培养，长成完整植株。30 d后统计结果。培养条件同初代培养。

2 结果与分析

2.1 适宜的初代培养外植体

外植体的选择和适宜的培养基是组织培养的关键，决定着能否建立高效的繁殖体系。结果表明，在初代培养过程中，以顶芽为外植体，在添加2.0 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA的M3培养基中，污染率最低，诱导率、增殖倍数最高；中部茎段次之；基部茎段污染率高，诱导率较低（表1），因此认为顶芽适宜作金线莲初代诱导培养时的外植体。

2.2 不同激素组合对芽苗增殖的影响

在芽苗增殖阶段，适宜浓度的6-BA和NAA对顶芽、中部茎段和基部茎段芽苗的增殖有促进作用。NAA浓度为0.5 mg/L时，6-BA 浓度为1.5～2.0 mg/L，3种外植体芽苗的增殖倍数都较高，但是随着6-BA浓度的增大，增殖倍数

3 讨论

金线莲组织培养快繁可选用种子、茎段、顶芽或叶片为外植体，再生成苗主要有原球茎、不定芽、丛生芽等3条途径，张铁等用种子诱导原球茎^[8]，刘芳等用中部茎段诱导丛生芽^[9]，阚世超等用茎尖诱导丛生芽^[5]，吴坤林等用中段茎段诱导不定芽^[10]，杨柏云等用茎段诱导原球茎^[11]。本试验采用顶芽、中部茎段和基部茎段增殖培养，发现顶芽的诱导率和增殖倍数高，芽苗健壮；中部茎段诱导易产生不定芽，诱导率和增殖倍数次之；基部茎段诱导产生的不定芽苗较为细弱。究其原因，一方面不同部位外植体的茎段组织发育程度不同；另一方面，不同部位外植体的内源激素含量和比例也不同，活性生长素在植株顶部芽中含量较高^[12]。因此，顶芽生长旺盛，组织培养产生的芽苗健壮，较适宜作为初代培养外植体。

在金线莲的组织培养过程中，芽苗增殖是十分关键的环节，只有提高增殖系数，才能达到快速繁殖的目的。组织培养产生的细弱芽苗在添加10%马铃薯+2%蛋白胨的壮苗培养基上可长势健壮。因此，顶芽增殖的健壮芽苗、中部茎段增殖的芽苗、增壮后的基部茎段芽苗等均可作为增殖材料继续用于增殖和生根，提高金线莲的组织培养繁殖系数。

参考文献：

[1]余东莉，张培松，范 萍，等. 西双版纳金线莲分布及利用现状[J]. 林业调查规划，2006，31（5）：97-99.

[2]郝丽丽，乙 引，申 刚，等. 金线莲腋芽增殖培养条件的优化[J]. 贵州农业科学，2010，38（7）：18-19.

[3]黄 勇. 金线莲组织培养新体系建立及优化[J]. 北方园艺，2010（13）：178-179.

[4]伍成厚，冯毅敏，贺漫媚，等. 金线莲种子培养的研究[J]. 中国野生植物资源，2008，27（1）：47-50.

[5]阚世超，张明生，李 花. 金线莲丛生芽诱导研究[J]. 安徽农业科学，2009，37（3）：981-982.

[6]宋丽莎，邓 伟，文治瑞，等. 金线莲外植体的筛选及不定芽诱导的研究[J]. 种子，2009，28（9）：19-22.

[7]刘 伟，王牛柱. 金线莲组织培养增殖培养基的筛选[J]. 安徽农业科学，2009，37（4）：1475-1476.

[8]张 铁，田雪琪，李 彬. 滇越金线莲快速繁殖技术研究[J]. 文山师范高等专科学校学报，2006，19（3）：110-114.

[9]刘 芳，韦鹏霄，岑秀芬，等. 外植体和基本培养基对台湾金线莲丛生芽诱导的影响[J]. 北方园艺，2009（4）：103-104.

[10]吴坤林. 金线莲快繁及工厂化生产中间试验[J]. 中药材，1997，20（12）：595-597.

[11]杨柏云，高荫榆，李春华，等. 金线莲原球茎的诱导与快速繁殖[J]. 安徽农业科学，2008，36（10）：3999-4001.

[12]郝建军，康宗利. 植物生理学[M]. 北京：化学工业出版社，2005：161.

摘要：以金线莲的顶芽、中部茎段和基部茎段为外植体，研究金线莲组织培养快繁成苗技术。结果表明，初代培养阶段在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中，以顶芽为外植体，诱导率、增殖倍数最高；芽苗增殖阶段，在MS+6-BA 1.5～2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中，3种外植体的芽苗增殖倍数都较高，其中顶芽增殖倍数达到7.5倍；细弱芽苗在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%马铃薯+2%蛋白胨培养基中可长势健壮；最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/ L+2%活性炭+10%香蕉泥。

关键词：金线莲；外植体；组织培养

中图分类号：S682.310.4+3 文献标志码：A

文章编号：1002-1302（2014）08-0057-03

金线莲，又名金线兰、金丝草、树草莲、金线虎头蕉、金线入骨消等，为兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus）植物，是多年生珍稀中草药，在我国云南、四川、广西、福建、台湾等地均有分布，但十分稀少，一般生长于密林下或溪边潮湿的草丛中。金线莲富含氨基酸和多种微量元素，有较高的药用价值，素有“药王”“金草”“神药”“乌人参”等美称，《全国中草药汇编》谓其可治疗肺结核、糖尿病、肾炎、膀胱炎、风湿性及类风湿性关节炎等症；在治疗肝病、排毒去火、降压凉血等方面有独特效果。民间常用其清水煎服或炖汤，治疗小儿惊风、妇女白带以及毒蛇咬伤等。随着金线莲的药用价值日益被人们所认同，在云南的西双版纳、保山、文山、德宏等地，农民无节制、掠夺式采收野生金线莲的现象比较普遍^[1]，且金线莲生长迟缓、开花结果不易，导致资源匮乏。因此，利用植物组织培养技术繁殖成为培育金线莲种苗的重要途径^[2-6]。本试验利用金线莲进行组织培养，以期探索适宜的外植体和高效的成苗技术，培育健壮试管苗。

1 材料与方法

1.1 材料

材料于2010年4月采自云南保山林区，引种于云南农业职业技术学院园艺实验训练基地。

1.2 方法

1.2.1 不同外植体进行初代培养

取生长正常、叶色浓绿、株高5～6 cm的植株茎段，除去根叶，流水冲洗1 h，洗洁精溶液浸泡约10 min，用软毛刷刷洗茎段节处绒毛，用自来水清洗干净。转移至超净工作台上，用75%乙醇灭菌30～60 s，转入0.1%氯化汞中灭菌8～10 min，边浸泡边搅拌以彻底灭菌，然后用无菌水冲洗5次。用解剖刀切取，分为顶芽、带1个节中部茎段和带1个节的基部茎段作为接种的外植体。诱导培养基为M1、M2、M3、M4，分别添加6-BA为0、1.0、2.0、3.0 mg/L，NAA浓度为0.5 mg/L，培养条件为：光照度1 500～3 000 lx，光照时间8～10 h/d，温度（25±2） ℃，MS为基本培养基，pH值为5.8，蔗糖浓度为30 g/L。每处理4瓶，每瓶5个外植体。培养10 d 后统计污染率，培养50 d后统计诱导率、增殖倍数。

1.2.2 不同激素组合对芽苗增殖途径的影响

用解剖刀切取无菌苗茎段，分为顶芽、带1个节中部茎段和带1个节的基部茎段，接种于增殖培养基I1、I2、I3、I4。增殖培养基I1～I4分别为添加6-BA 1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L，添加NAA 0.5 mg/L，培养条件同初代培养。培养50 d后，调查成苗情况，统计增殖倍数、黄化苗率。

1.2.3 壮苗培养

切取增殖培养中产生的芽苗，进一步进行壮苗培养，接种于壮苗培养基H1（MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%马铃薯）、H2（MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%马铃薯+2%蛋白胨）。每处理4瓶。培养 50 d 后，调查芽苗生长情况。培养条件同初代培养。

1.2.4 生根培养

切取约2 cm、生长健壮的茎段，进一步进行生根培养，采用1/2MS+NAA 0.5 mg/L，添加0～2%活性炭、0～10%香蕉泥为生根培养基，将小苗放在生根培养基中进行壮苗生根培养，长成完整植株。30 d后统计结果。培养条件同初代培养。

2 结果与分析

2.1 适宜的初代培养外植体

外植体的选择和适宜的培养基是组织培养的关键，决定着能否建立高效的繁殖体系。结果表明，在初代培养过程中，以顶芽为外植体，在添加2.0 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA的M3培养基中，污染率最低，诱导率、增殖倍数最高；中部茎段次之；基部茎段污染率高，诱导率较低（表1），因此认为顶芽适宜作金线莲初代诱导培养时的外植体。

2.2 不同激素组合对芽苗增殖的影响

在芽苗增殖阶段，适宜浓度的6-BA和NAA对顶芽、中部茎段和基部茎段芽苗的增殖有促进作用。NAA浓度为0.5 mg/L时，6-BA 浓度为1.5～2.0 mg/L，3种外植体芽苗的增殖倍数都较高，但是随着6-BA浓度的增大，增殖倍数

3 讨论

金线莲组织培养快繁可选用种子、茎段、顶芽或叶片为外植体，再生成苗主要有原球茎、不定芽、丛生芽等3条途径，张铁等用种子诱导原球茎^[8]，刘芳等用中部茎段诱导丛生芽^[9]，阚世超等用茎尖诱导丛生芽^[5]，吴坤林等用中段茎段诱导不定芽^[10]，杨柏云等用茎段诱导原球茎^[11]。本试验采用顶芽、中部茎段和基部茎段增殖培养，发现顶芽的诱导率和增殖倍数高，芽苗健壮；中部茎段诱导易产生不定芽，诱导率和增殖倍数次之；基部茎段诱导产生的不定芽苗较为细弱。究其原因，一方面不同部位外植体的茎段组织发育程度不同；另一方面，不同部位外植体的内源激素含量和比例也不同，活性生长素在植株顶部芽中含量较高^[12]。因此，顶芽生长旺盛，组织培养产生的芽苗健壮，较适宜作为初代培养外植体。

在金线莲的组织培养过程中，芽苗增殖是十分关键的环节，只有提高增殖系数，才能达到快速繁殖的目的。组织培养产生的细弱芽苗在添加10%马铃薯+2%蛋白胨的壮苗培养基上可长势健壮。因此，顶芽增殖的健壮芽苗、中部茎段增殖的芽苗、增壮后的基部茎段芽苗等均可作为增殖材料继续用于增殖和生根，提高金线莲的组织培养繁殖系数。

参考文献：

[1]余东莉，张培松，范 萍，等. 西双版纳金线莲分布及利用现状[J]. 林业调查规划，2006，31（5）：97-99.

[2]郝丽丽，乙 引，申 刚，等. 金线莲腋芽增殖培养条件的优化[J]. 贵州农业科学，2010，38（7）：18-19.

[3]黄 勇. 金线莲组织培养新体系建立及优化[J]. 北方园艺，2010（13）：178-179.

[4]伍成厚，冯毅敏，贺漫媚，等. 金线莲种子培养的研究[J]. 中国野生植物资源，2008，27（1）：47-50.

[5]阚世超，张明生，李 花. 金线莲丛生芽诱导研究[J]. 安徽农业科学，2009，37（3）：981-982.

[6]宋丽莎，邓 伟，文治瑞，等. 金线莲外植体的筛选及不定芽诱导的研究[J]. 种子，2009，28（9）：19-22.

[7]刘 伟，王牛柱. 金线莲组织培养增殖培养基的筛选[J]. 安徽农业科学，2009，37（4）：1475-1476.

[8]张 铁，田雪琪，李 彬. 滇越金线莲快速繁殖技术研究[J]. 文山师范高等专科学校学报，2006，19（3）：110-114.

[9]刘 芳，韦鹏霄，岑秀芬，等. 外植体和基本培养基对台湾金线莲丛生芽诱导的影响[J]. 北方园艺，2009（4）：103-104.

[10]吴坤林. 金线莲快繁及工厂化生产中间试验[J]. 中药材，1997，20（12）：595-597.

[11]杨柏云，高荫榆，李春华，等. 金线莲原球茎的诱导与快速繁殖[J]. 安徽农业科学，2008，36（10）：3999-4001.

[12]郝建军，康宗利. 植物生理学[M]. 北京：化学工业出版社，2005：161.

摘要：以金线莲的顶芽、中部茎段和基部茎段为外植体，研究金线莲组织培养快繁成苗技术。结果表明，初代培养阶段在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中，以顶芽为外植体，诱导率、增殖倍数最高；芽苗增殖阶段，在MS+6-BA 1.5～2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中，3种外植体的芽苗增殖倍数都较高，其中顶芽增殖倍数达到7.5倍；细弱芽苗在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%马铃薯+2%蛋白胨培养基中可长势健壮；最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/ L+2%活性炭+10%香蕉泥。

关键词：金线莲；外植体；组织培养

中图分类号：S682.310.4+3 文献标志码：A

文章编号：1002-1302（2014）08-0057-03

金线莲，又名金线兰、金丝草、树草莲、金线虎头蕉、金线入骨消等，为兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus）植物，是多年生珍稀中草药，在我国云南、四川、广西、福建、台湾等地均有分布，但十分稀少，一般生长于密林下或溪边潮湿的草丛中。金线莲富含氨基酸和多种微量元素，有较高的药用价值，素有“药王”“金草”“神药”“乌人参”等美称，《全国中草药汇编》谓其可治疗肺结核、糖尿病、肾炎、膀胱炎、风湿性及类风湿性关节炎等症；在治疗肝病、排毒去火、降压凉血等方面有独特效果。民间常用其清水煎服或炖汤，治疗小儿惊风、妇女白带以及毒蛇咬伤等。随着金线莲的药用价值日益被人们所认同，在云南的西双版纳、保山、文山、德宏等地，农民无节制、掠夺式采收野生金线莲的现象比较普遍^[1]，且金线莲生长迟缓、开花结果不易，导致资源匮乏。因此，利用植物组织培养技术繁殖成为培育金线莲种苗的重要途径^[2-6]。本试验利用金线莲进行组织培养，以期探索适宜的外植体和高效的成苗技术，培育健壮试管苗。

1 材料与方法

1.1 材料

材料于2010年4月采自云南保山林区，引种于云南农业职业技术学院园艺实验训练基地。

1.2 方法

1.2.1 不同外植体进行初代培养

取生长正常、叶色浓绿、株高5～6 cm的植株茎段，除去根叶，流水冲洗1 h，洗洁精溶液浸泡约10 min，用软毛刷刷洗茎段节处绒毛，用自来水清洗干净。转移至超净工作台上，用75%乙醇灭菌30～60 s，转入0.1%氯化汞中灭菌8～10 min，边浸泡边搅拌以彻底灭菌，然后用无菌水冲洗5次。用解剖刀切取，分为顶芽、带1个节中部茎段和带1个节的基部茎段作为接种的外植体。诱导培养基为M1、M2、M3、M4，分别添加6-BA为0、1.0、2.0、3.0 mg/L，NAA浓度为0.5 mg/L，培养条件为：光照度1 500～3 000 lx，光照时间8～10 h/d，温度（25±2） ℃，MS为基本培养基，pH值为5.8，蔗糖浓度为30 g/L。每处理4瓶，每瓶5个外植体。培养10 d 后统计污染率，培养50 d后统计诱导率、增殖倍数。

1.2.2 不同激素组合对芽苗增殖途径的影响

用解剖刀切取无菌苗茎段，分为顶芽、带1个节中部茎段和带1个节的基部茎段，接种于增殖培养基I1、I2、I3、I4。增殖培养基I1～I4分别为添加6-BA 1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L，添加NAA 0.5 mg/L，培养条件同初代培养。培养50 d后，调查成苗情况，统计增殖倍数、黄化苗率。

1.2.3 壮苗培养

切取增殖培养中产生的芽苗，进一步进行壮苗培养，接种于壮苗培养基H1（MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%马铃薯）、H2（MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%马铃薯+2%蛋白胨）。每处理4瓶。培养 50 d 后，调查芽苗生长情况。培养条件同初代培养。

1.2.4 生根培养

切取约2 cm、生长健壮的茎段，进一步进行生根培养，采用1/2MS+NAA 0.5 mg/L，添加0～2%活性炭、0～10%香蕉泥为生根培养基，将小苗放在生根培养基中进行壮苗生根培养，长成完整植株。30 d后统计结果。培养条件同初代培养。

2 结果与分析

2.1 适宜的初代培养外植体

外植体的选择和适宜的培养基是组织培养的关键，决定着能否建立高效的繁殖体系。结果表明，在初代培养过程中，以顶芽为外植体，在添加2.0 mg/L 6-BA、0.5 mg/L NAA的M3培养基中，污染率最低，诱导率、增殖倍数最高；中部茎段次之；基部茎段污染率高，诱导率较低（表1），因此认为顶芽适宜作金线莲初代诱导培养时的外植体。

2.2 不同激素组合对芽苗增殖的影响

在芽苗增殖阶段，适宜浓度的6-BA和NAA对顶芽、中部茎段和基部茎段芽苗的增殖有促进作用。NAA浓度为0.5 mg/L时，6-BA 浓度为1.5～2.0 mg/L，3种外植体芽苗的增殖倍数都较高，但是随着6-BA浓度的增大，增殖倍数

3 讨论

金线莲组织培养快繁可选用种子、茎段、顶芽或叶片为外植体，再生成苗主要有原球茎、不定芽、丛生芽等3条途径，张铁等用种子诱导原球茎^[8]，刘芳等用中部茎段诱导丛生芽^[9]，阚世超等用茎尖诱导丛生芽^[5]，吴坤林等用中段茎段诱导不定芽^[10]，杨柏云等用茎段诱导原球茎^[11]。本试验采用顶芽、中部茎段和基部茎段增殖培养，发现顶芽的诱导率和增殖倍数高，芽苗健壮；中部茎段诱导易产生不定芽，诱导率和增殖倍数次之；基部茎段诱导产生的不定芽苗较为细弱。究其原因，一方面不同部位外植体的茎段组织发育程度不同；另一方面，不同部位外植体的内源激素含量和比例也不同，活性生长素在植株顶部芽中含量较高^[12]。因此，顶芽生长旺盛，组织培养产生的芽苗健壮，较适宜作为初代培养外植体。

在金线莲的组织培养过程中，芽苗增殖是十分关键的环节，只有提高增殖系数，才能达到快速繁殖的目的。组织培养产生的细弱芽苗在添加10%马铃薯+2%蛋白胨的壮苗培养基上可长势健壮。因此，顶芽增殖的健壮芽苗、中部茎段增殖的芽苗、增壮后的基部茎段芽苗等均可作为增殖材料继续用于增殖和生根，提高金线莲的组织培养繁殖系数。

参考文献：

[1]余东莉，张培松，范 萍，等. 西双版纳金线莲分布及利用现状[J]. 林业调查规划，2006，31（5）：97-99.

[2]郝丽丽，乙 引，申 刚，等. 金线莲腋芽增殖培养条件的优化[J]. 贵州农业科学，2010，38（7）：18-19.

[3]黄 勇. 金线莲组织培养新体系建立及优化[J]. 北方园艺，2010（13）：178-179.

[4]伍成厚，冯毅敏，贺漫媚，等. 金线莲种子培养的研究[J]. 中国野生植物资源，2008，27（1）：47-50.

[5]阚世超，张明生，李 花. 金线莲丛生芽诱导研究[J]. 安徽农业科学，2009，37（3）：981-982.

[6]宋丽莎，邓 伟，文治瑞，等. 金线莲外植体的筛选及不定芽诱导的研究[J]. 种子，2009，28（9）：19-22.

[7]刘 伟，王牛柱. 金线莲组织培养增殖培养基的筛选[J]. 安徽农业科学，2009，37（4）：1475-1476.

[8]张 铁，田雪琪，李 彬. 滇越金线莲快速繁殖技术研究[J]. 文山师范高等专科学校学报，2006，19（3）：110-114.

[9]刘 芳，韦鹏霄，岑秀芬，等. 外植体和基本培养基对台湾金线莲丛生芽诱导的影响[J]. 北方园艺，2009（4）：103-104.

[10]吴坤林. 金线莲快繁及工厂化生产中间试验[J]. 中药材，1997，20（12）：595-597.

[11]杨柏云，高荫榆，李春华，等. 金线莲原球茎的诱导与快速繁殖[J]. 安徽农业科学，2008，36（10）：3999-4001.

[12]郝建军，康宗利. 植物生理学[M]. 北京：化学工业出版社，2005：161.