茶多酚对维持性血液透析患者氧化应激及微炎症状态的影响

刘学义，柴红，杜占彩，张靖，袁莉

（1.唐山市工人医院肾内科，河北唐山063000；2.唐山市工人医院内分泌科，河北唐山063000；3.唐山市工人医院供应室，河北唐山063000；4.唐山市工人医院肾病科，河北唐山063000；5.唐山市工人医院神经内科，河北唐山063000）

茶多酚对维持性血液透析患者氧化应激及微炎症状态的影响

刘学义1，柴红2，杜占彩3，张靖4，袁莉5

（1.唐山市工人医院肾内科，河北唐山063000；2.唐山市工人医院内分泌科，河北唐山063000；3.唐山市工人医院供应室，河北唐山063000；4.唐山市工人医院肾病科，河北唐山063000；5.唐山市工人医院神经内科，河北唐山063000）

目的探讨茶多酚对维持性血液透析(maintenance hemodialysis，MHD）患者氧化应激和微炎症状态的影响及可能机制。方法60例MHD患者，随机分为常规组及茶多酚组；选择30个健康者作为正常对照组。3个月后检测常规组及茶多酚组丙二醛(malondialdehyde，MDA）、晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products，AOPP）、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD）、肿瘤坏死因子-α(turnor necrosis factor-α，TNF-α）、C-反应蛋白(C-reactive protein，CRP）、白介素-6(interleukin-6，IL-6）及核因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB）。结果治疗前，常规组及茶多酚组与对照组相比MDA、AOPP升高(P＜0.01），SOD下降(P＜0.01）；治疗后，茶多酚组与常规组相比，MDA、AOPP下降(P＜0.01），SOD升高(P＜0.01）。治疗后，常规组及茶多酚组与对照组相比，NF-κB、TNF-α、CRP、IL-6、氧化指标均有所升高，存在统计学差异(P＜0.01）；茶多酚组与常规组相比，氧化指标均有所下降，存在统计学差异(p＜0.01）。结论茶多酚可以改善MHD患者的氧化应激和微炎症状态。

血液透析；茶多酚；微炎症；氧化应激；核因子-κB

维持性血液透析是当前治疗血液病的一种常规疗法。据报道进行维持性血液透析的患者机体处于一个较高的氧化应激状态和微炎症的水平，通过不同的机制引起一系列的并发症，如心血管疾病、营养不良、红细胞生成素抵抗及淀粉样变等，严重影响维持性血液透析患者生活质量和存活时间［1-2］。减轻氧化应激和改善微炎症状态，可以提高患者生活质量及存活时间［3］。茶多酚是多种多羟基类化合物的总称，是一种天然的生物活性物质。近年来国内外研究人员发现绿茶多酚具有广泛的生物活性，包括抗炎、抗氧化、肿瘤、改善血管内皮细胞等作用，并进行了广泛深入的研究［4］；但未见报道茶多酚应用于MHD老年患者研究氧化应激及微炎症状态，本文就此进行了探讨。

1 资料与方法

1.1 研究对象与分组 选择唐山市工人医院血液透析中心进行血液透析患者60例，按随机数字表，将患者分成茶多酚组与常规组；另选本院体检健康的老年志愿者30例为正常对照组。常规组15例男性，15例女性，平均年龄（66.7±7.2）岁；茶多酚组15例男性，15例女性，平均年龄（65.4±6.4）岁；正常对照组，男15例，女性15例，平均年龄（65.8±7.4）岁。组间性别、年龄无显著性差异，本实验由当地伦理协会批准，并全程跟踪，所有患者均知情同意。纳入标准：①曾进行3个月以上的持续性透析；②精神神经无障碍，听力正常，锥体束征呈阴性。排除标准：①伴各种程度的感染、肝炎、肝病以及肿瘤、自身免疫系统紊乱；②近20 d内有抗炎药、降血脂药、维生素类药；③神经系统病变，如帕金森、癫痫等。2组患者给予透析方案具体如下：维持性碳酸氢盐血液透析采用浓度为1.5mmol/L的钙离子进行透析治疗，透析液流速500mL/min，血流速250mL/min，3次/周，4 h/次，对于有高血压病的患者，予以常规降压治疗，采用钙离子通道拮抗剂或ACEI类降压药；患有贫血患者，予以常规补血补铁治疗，常采取：铁剂静脉静点。茶多酚组予以患者茶多酚片剂，0.9 g口服，3次/d；常规组则予以安慰剂2片口服，每天3次。

1.2 研究方法

1.2.1 标本收集：2组患者经治疗3个月后，晨取空腹静脉血样5mL，离心处理，取出血浆上清液，加入0.2%EDTA抗凝，-70℃保存。取静脉血5mL，加入细胞分离液对单核细胞进行分离，核蛋白提取参照说明书，于-70℃冷冻保存。

1.2.2 检测氧化应激指标：MDA、SOD、AOPP；炎症反应指标：CRP、IL-6及NF-κB活性等。

1.2.3 检测方法：对于MDA检测采用硫代巴比妥酸反应（TBA）法；SOD检测采用化学比色法；CRP采用免疫比浊法本院化验室测定。

AOPP采用紫外分光光度法：400μL PBS、20μL碘化钾，及40μL冰醋酸混合物作为空白对照；以400μL氯胺T（0～100 μmol/L）、20μL碘化钾及40μL冰醋酸混合物作为标准对照。400μL血浆PBS稀释液（1：5）、20μL碘化钾，及40μL冰醋酸混合物测340 nm吸光度（A）值，AOPP的浓度以氯胺T含量（μmol/L）表示。

NF-κB、IL-6的测定均采用酶联免疫法（ELISA），试剂盒购自美国RD公司。NF-κB活性的测定：按试剂盒说明书提取细胞核蛋白，用BAC-100蛋白质定量测定试剂盒测定蛋白浓度，取5μg核蛋白抽提物稀释至20μL，滴于96孔板中（加NF-κB寡核苷酸双链探针），在20℃中振荡1 h，洗涤3次，再加入经稀释至浓度为1：1000的NF-κB p65单抗中，20℃下进行反应，1 h后洗涤。洗涤后加入四甲基联苯胺底物液进行显色反应，反应时间为10min，后加终止液。于全自动酶标仪测取活性的相对值。IL-6测定与此类似。

1.3 统计学方法 应用SPSS 14.0统计软件处理，正态计量数据用“±s”表示，正态资料组间比较采用t检验，以P＜ 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组、常规组及茶多酚组氧化应激指标的比较 治疗前，常规组及茶多酚组与对照组相比MDA、AOPP升高（P＜0.01），SOD下降（P＜0.01）；治疗后，茶多酚组与常规组相比，MDA、AOPP下降（P＜0.01），SOD升高（P＜0.01，见表1）。

表1 茶多酚组与常规组氧化应激指标的比较Tab.1 Comparison of Oxidative stress indices

2.2 对照组、常规组及茶多酚组微炎症状态的比较 治疗后，常规组及茶多酚组与对照组相比，氧化指标均有所升高，存在统计学差异（P＜0.01）；茶多酚组与常规组相比，氧化指标均有所下降，存在统计学差异（P＜0.01，见表2）。

表2 对照组、常规组及茶多酚组微炎症状体的比较Tab.2 Comparison of Inflammatory factor

3 讨论

微炎症指的是由免疫机制调节异常而引起的体内炎性蛋白、炎症因子升高，导致出现非感染性炎症的一种表现［1］。这种微炎症状态可造成终末期肾病患者动脉硬化及血管钙化，导致营养不良，加重贫血，从而介导体内产生级联炎性反应，导致多器官、多组织损伤，患者死亡率大大增加［6］。调节微炎症水平能够有效提高透析患者生存质量。目前研究显示CRF患者微炎症状态与氧化应激反应关系密切［1］。

氧化应激是CRF患者心血管、神经系统等并发症的重要致病因素之一，是影响CRF患者预后的重要影响因素［7］。氧化应激存在于各种肾脏疾病的始末，在肾脏疾病进展及其并发症发病中的作用十分重要，随着肾功能的减退逐渐加重。肾脏中很多细胞都可以产生氧自由基，包括肾小球系膜细胞、肾间质细胞、肾小管上皮细胞等，都可以成为氧自由基的来源。血液中的补体系统被氧化因子活化，产生白介素-1、白介素-6以及TNF-α等免疫因子，而白细胞介素在慢性肾功能衰竭微炎症状态中以IL-6升高最为显著［8］。Handelmandeng发现，CRF患者血浆中CRP水平和氧化应激的替代标志物AOPP水平存在相关性；同样和脂质过氧化产物硫代巴比妥酸反应底物水平呈正相关［9］。研究认为，氧化应激是微炎症状态的重要机制之一，抗氧化药物可以减轻CRF微炎症状态［1］。

茶多酚是茶叶中的主要活性成分，有很强的生物活性。它是30多种酚类化合物的复合体，其中儿茶素类占茶多酚总量的60%～90%。茶多酚的酚羟基是天然的供氢体，体内体外均具有很强的抗氧化和清除自由基的作用［4］。研究显示茶多酚可以预防和治疗多种肾病：可以减轻慢性肾炎的临床症状，可以通过对TNF-α的抑制延缓糖尿病肾病进展，可以增加血肌酐清除率，可以抑制慢性肾功能不全的脂质过氧化等［10］；但未见报道茶多酚是否能改善维持血液透析患者的微炎症状态及氧化应激反应。本研究通过给予老年维持性透析患者口服茶多酚进行了茶多酚对氧化应激及微炎症状态影响的研究。结果显示，茶多酚降低了MDA和AOPP而升高了SOD活性，使茶多酚组CRP及IL-6等下降，改善了维持性血液透析老年患者的微炎症状态。另外文献报道茶多酚可以抑制核因子-κB，而核因子-κB是一种氧化应激敏感的转录因子，调节控制免疫及促炎症反应分子的基因的表达，在炎症反应中起中枢作用，抑制核因子-κB可以阻止炎症的病理反应［11］。茶多酚抗氧化并改善微炎症状态，可能与其拮抗了单核细胞及中性粒细胞的激活，减弱了补体系统的活化，减少了炎性细胞因子的产生有关。

目前抗氧化剂或改善微炎症状态的药物，作用较单一，而要使其它各方面也都得到改善，可能需要多种药物协同作用；而茶多酚同时具有的效能，在抗氧化及改善微炎症状态的同时可以获得诸多收益，在维持性血液透析老年患者的治疗中值得推广。

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［2］樊瑞芬，王银龙，高丽萍，等.抗氧化治疗对维持性血液透析患者微炎症及氧化应激状态的影响［J］.现代预防医学，2008，35(18）：3648-49.

［3］焦占峰，白光辉.维持性血液透析患者微炎症状态研究的意义及进展［J］.中国血液净化，2010，99(12）：675-677.

［4］杨敏.茶多酚治疗慢性肾功能不全中抗自由基作用的研究［J］.中华肾脏病杂志，1994，10(5）：278-279.

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（编校：谭玲，秦晓英）

Effect of tea polyphenols on oxidative stress and m icro inflammatory condition in maintenance hemodialysis patients

LIU Xue-yi1，CHAIHong2，DU Zhan-cai3，ZHANG Jing4，YUAN Li5

（1.Department of Renal，Tangshan Workers Hospital，Tangshan 063000，China；2.Department of Endocrine，Tangshan Workers Hospital，Tangshan 063000，China；3.Department of Supply Room，Tangshan Workers Hospital，Tangshan 063000，China；4.Department of Renal，Tangshan Workers hospital，Tangshan 063000，China；5.Department of Medicine-Neurology，Tangshan Workers Hospital，Tangshan 063000，China）

ObjectiveTo investigate the influence and the possiblemechanism of tea polyphenols on maintenance hemodialysis（MHD）patients’oxidative stress and micro inflammatory condition.Methods60 cases of MHD patients were random ly divided into routine group and tea polyphenols group.30 healthy subjectswere chosen as normal control group.After 3 months，MDA，AOPP，SOD，TNF-α，CRP，IL-6 and NF-κB of routine group and tea polyphenols group were detected.ResultsBefore treatment，compared with normal control group，MDA and AOPP of routine group and tea polyphenols group increased（P＜0.01），SOD decreased（P＜0.01）；after treatment，compared with routine group，MDA and AOPP of tea polyphenols group decreased（P＜0.01），SOD increased（P＜0.01）.After treatment，compared with normal control group，NF-κB，TNF-α，CRP，IL-6 and oxidative index of routine group and tea polyphenols group increased，and the differencewas statistically significant（P＜0.01）；compared with routine group，oxidative index of tea polyphenols group decreased，and the difference was statistically significant（P＜0.01）.ConclusionTea polyphenol can improve MHD patients’oxidative stress and micro inflammatory state.

hemodialysis；tea polyphenol；micro inflammation；oxidative stress；nuclear factor-κB

R692.3

A

1005-1678(2014）07-0087-03

河北省唐山市科技攻关项目（121302022a）

刘学义，男，本科，主治医师，研究方向：慢性肾功能衰竭治疗，E-mail：drlxy1973@126.com。