卵巢黏液性腺癌患者癌组织Pim-3、c-Myc和PTEN表达及相关性

刘海艳

(辽宁医学院附属第一医院妇产科，辽宁 锦州 121000)

黏液性腺癌是卵巢最常见的上皮性恶性肿瘤之一，最常见于老年人。肿瘤的发生和进展时多种蛋白表达失调，其促进作用明显〔1〕。Pim-3是一个与哺乳动物蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶密切相关的蛋白，其不仅可以促使凋亡相关分子发生磷酸化，还可以引起抗凋亡家族成员表达失调和癌相关基因发生改变，进而促进肿瘤进展〔2，3〕。C-myc可以调节肿瘤细胞中DNA合成及细胞的分化，对肿瘤进展有促进作用〔4，5〕。第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)是较经典的抑癌基因，具有双特异性磷酸酶的活性，可以广泛作用于细胞信号通路中的信号分子，抑制肿瘤发展〔6，7〕。本实验关注卵巢黏液性腺癌患者Pim-3、c-Myc和PTEN表达及相关性。

1 资料和方法

1.1临床资料 2010年1月至2013年12月我院行卵巢黏液性腺根治手术的女性患者118例为观察组，年龄56～81岁，中位年龄67岁。以同期确诊为卵巢交界性黏液性囊腺瘤术后的组织蜡块65例为对照组，年龄57～80岁，中位年龄66岁。以同期确诊为卵巢黏液性囊腺瘤术后的组织蜡块65例为正常对照组，年龄52～79岁，中位年龄65岁。3组一般临床资料无明显差别(P>0.05)。

1.2Pim-3、c-Myc和PTEN检测 Pim-3、c-Myc和PTEN蛋白浓缩液均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。浓缩液均稀释后进行正式实验。检测应用免疫组化二步法，均由病理科技师操作完成，严格按说明书，严格质量控制，努力减少误差。

1.3Pim-3、c-Myc和PTEN的判定方法 Pim-3阳性表达部位是细胞质，C-myc和PTEN以细胞质和(或)细胞膜中出现棕黄色颗粒为阳性细胞，选择阳性细胞较为集中的上皮细胞区域(热点区)，每个病例选取5个高倍视野(400倍)，计数总细胞数，Pim-3、c-Myc和PTEN均以阳性率≥5%定为阳性，以阳性率<5%定为阴性。

1.4统计学处理方法 应用SAS6.12软件进行χ2检验和线性相关分析。

2 结 果

2.13组Pim-3、c-Myc和PTEN表达阳性率比较 3组Pim-3、c-Myc和PTEN阳性表达率差别显著(P均<0.000 1)。见表1。

表1 3组Pim-3、c-Myc和PTEN阳性表达率比较〔n(%)〕

2.2观察组Pim-3、c-Myc和PTEN阳性表达与临床病理特征关系 观察组Pim-3、c-Myc和PTEN阳性表达率与肿瘤最大径、淋巴结转移、腹水中是否有癌细胞密切相关(P均<0.05)。见表2。

2.3观察组Pim-3、c-Myc和PTEN表达相关性 观察组Pim-3和PTEN(r=-0.49，P=0.032 5)、c-Myc和PTEN(r=-0.48，P=0.035 0)的表达均负相关。

表2 观察组Pim-3、c-Myc和PTEN阳性表达与临床病理特征的关系〔n(%)〕

3 讨 论

卵巢黏液性腺癌是指由部分或全部含细胞内黏液的瘤细胞构成的卵巢肿瘤。瘤细胞与宫颈内膜、胃幽门部或小肠的上皮相似，一些肿瘤有散在的杯状细胞分布。其与交界性黏液性肿瘤的区别在于有卵巢间质侵袭。在病理诊断中，当缺乏明显的间质侵袭时腺体呈复杂的乳头状或腺体排列密集、背靠背、间质很少或无间质，细胞异型性明显时也认为侵袭性，即判定为腺癌〔8〕。肿瘤发展过程中异质性明显，也反映肿瘤从良性到恶性的进展过程。研究显示，黏液性肿瘤从良性、交界性转化为浸润性癌过程中，上皮内癌和单纯扩张性侵袭性癌在黏液性癌的发生过程中代表转化阶段，同时分子生物学研究也逐渐证实了此观点〔9〕，即在此变化过程中，多种基因和蛋白指标变化具有趋势作用。Pim-3最初是在鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞发现，并被鉴定为诱导去极化的基因KID-1，由于KID-1与表达丝氨酸/苏氨酸激酶活性的原癌基因Pim家族具有高度的同源性，因此命名为Pim-3〔10，11〕。研究显示Pim-3在多种肿瘤中高表达〔12〕。赵辉等〔13〕通过观察食管鳞癌中Pim-3表达，发现肿瘤中Pim-3 mRNA和蛋白均表达升高，认为Pim-3是导致鳞癌发生发展的作用机制之一。C-myc是一种原癌基因，其内在结构较复杂，发挥作用时可以与DNA结构进行有效结合，引起肿瘤转录因子改变〔14，15〕。有学者认为C-myc可以调控细胞周期，如C-myc作为从G0/G1期进入S期的开关起作用等等，因此C-myc可能具有多元性机制〔16，17〕。PTEN是抑癌基因，由于其为具有磷酸酯酶活性的蛋白，因此可以使细胞内第二信使磷脂酰肌醇(3，4，5)-三磷酸( PIP3)出现去磷酸化，不仅抑制细胞增殖，还可以抑制肿瘤转化〔18〕。

本实验提示Pim-3和c-Myc高表达、PTEN低表达是肿瘤发生的重要因素，Pim-3、c-Myc类似癌基因的作用，高表达时可以激活多种癌相关基因、抑制多种抑癌基因，而PTEN即为二者抑癌作用靶向因子之一，在通路上具有一定协同性。Pim-3、c-Myc和PTEN均参与肿瘤的生长、淋巴结播散和肿瘤性腹水的生成，由于以上因素均为TNM分期和临床判断生物学行为及预后的重要指标，因此联合检测三者可能对判断肿瘤的分期及预后有重要意义，即Pim-3、c-Myc高表达、PTEN低表达患者的预后可能不良。这个推测需要后续随访研究中的生存分析进行证实。Pim-3、c-Myc在作用过程中均可以促进肿瘤增殖，使肿瘤细胞活化，失控性增生明显，细胞处于高繁殖期，肿瘤生长快〔19～22〕。而PTEN是重要抑癌蛋白，正常上皮中高表达，而当肿瘤形成或细胞恶变时，PTEN表达下调或丢失，使PTEN对正常细胞癌变的控制作用下降，肿瘤恶性变的能力升高，癌化加速，肿瘤生长及播散明显。

4 参考文献

1Wu R，Hendrix-Lucas N，Kuick R，etal.Mouse model of human ovarian endometrioid adenocarcinoma based on somatic defects in the Wnt/beta-catenin and PI3K/Pten signaling pathways〔J〕.Cancer Cell，2007；11(4)：321-33.

2Wang C，Li HY，Liu B，etal.Pim-3 promotes the growth of human pancreatic cancer in the orthotopic nude mouse model through vascular endothelium growth factor〔J〕.J Surg Res，2013；185(2)：595-604.

3Xu D，Cobb MG，Gavilano L，etal.Inhibition of oncogenic Pim-3 kinase modulates transformed growth and chemosensitizes pancreatic cancer cells to gemcitabine〔J〕.Cancer Biol Ther，2013；14(6)：492-501.

4Kaur M，Cole MD.MYC acts via the PTEN tumor suppressor to elicit autoregulation and genome-wide gene repression by activation of the Ezh2 methyltransferase〔J〕.Cancer Res，2013；73(2)：695-705.

5Huang X，Zhang Y，Tang Y，etal.A novel PTEN/mutant p53/c-Myc/Bcl-XL axis mediates context-dependent oncogenic effects of PTEN with implications for cancer prognosis and therapy〔J〕.Neoplasia，2013；15(8)：952-65.

6Kim HS，Woolard K，Lai C，etal.Gliomagenesis arising from Pten- and Ink4a/Arf-deficient neural progenitor cells is mediated by the p53-Fbxw7/Cdc4 pathway，which controls c-Myc〔J〕.Cancer Res，2012；72(22)：6065-75.

7Wang J，Kobayashi T，Floch N，etal.B-Raf activation cooperates with PTEN loss to drive c-Myc expression in advanced prostate cancer〔J〕.Cancer Res，2012；72(18)：4765-76.

8Christie M，Oehler MK.Molecular pathology of epithelial ovarian cancer〔J〕.J Br Menopause Soc，2006；12(2)：57-63.

9Chen Y，Zheng H，Yang X，etal.Effects of mutation and expression of PTEN gene mRNA on tumorigenesis and progression of epithelial ovarian cancer〔J〕.Chin Med Sci J，2004；19(1)：25-30.

10Yang H，Wang Y，Qian H，etal.Pim protein kinase-3 is regulated by TNF-α and promotes endothelial cell sprouting〔J〕.Mol Cells，2011；32(3)：235-41.

11Forshell LP，Li Y，Forshell TZ，etal.The direct Myc target Pim3 cooperates with other Pim kinases in supporting viability of Myc-induced B-cell lymphomas〔J〕.Oncotarget，2011；2(6)：448-60.

12Chen LS，Redkar S，Taverna P，etal.Mechanisms of cytotoxicity to Pim kinase inhibitor，SGI-1776，in acute myeloid leukemia〔J〕.Blood，2011；118(3)：693-702.

13赵 辉，刘宇琼，李惠翔，等.Pim-3在食管鳞癌组织中mRNA和蛋白的表达及其意义〔J〕.世界华人消化杂志，2010；18(28)：2976-80.

14Guo P，Nie Q，Lan J，etal.C-Myc negatively controls the tumor suppressor PTEN by upregulating miR-26a in glioblastoma multiforme cells〔J〕.Biochem Biophys Res Commun，2013；441(1)：186-90.

15Antonarakis ES，Keizman D，Zhang Z，etal.An immunohistochemical signature comprising PTEN，MYC，and Ki67 predicts progression in prostate cancer patients receiving adjuvant docetaxel after prostatectomy〔J〕.Cancer，2012；118(24)：6063-71.

16Zafarana G，Ishkanian AS，Malloff CA，etal.Copy number alterations of c-MYC and PTEN are prognostic factors for relapse after prostate cancer radiotherapy〔J〕.Cancer，2012；118(16)：4053-62.

17Kaveri D，Kastner P，Dembele D，etal.β-Catenin activation synergizes with Pten loss and Myc overexpression in Notch-independent T-ALL〔J〕.Blood，2013；122(5)：694-704.

18Yeh ES，Belka GK，Vernon AE，etal.Hunk negatively regulates C-myc to promote Akt-mediated cell survival and mammary tumorigenesis induced by loss of Pten〔J〕.Proc Natl Acad Sci USA，2013；110(15)：6103-8.

19罗 强，熊 畅，熊 珊，等.PIM-3在肺癌组织中的表达〔J〕.华南国防医学杂志，2012；26(1)：16017.

20Mukaida N，Wang YY，Li YY.Roles of Pim-3，a novel survival kinase，in tumorigenesis〔J〕.Cancer Sci，2011；102(8)：1437-42.

21Zheng HC，Tsuneyama K，Takahashi H，etal.Aberrant Pim-3 expression is involved in gastric adenoma-adenocarcinoma sequence and cancer progression〔J〕.J Cancer Res Clin Oncol，2008；134(4)：481-8.

22Francis JC，Thomsen MK，Taketo MM，etal.β-catenin is required for prostate development and cooperates with Pten loss to drive invasive carcinoma〔J〕.PLoS Genet，2013；9(1)：e1003180.