CD105在结直肠癌组织中的表达及与血管生成的关系

曹怀宇 成雪梅 魏磊彬

·论著·

CD105在结直肠癌组织中的表达及与血管生成的关系

曹怀宇 成雪梅 魏磊彬

目的分析CD105在结直肠癌组织中的表达并探讨其与血管生成的关系。方法应用免疫组织化学方法检测60例原发性结直肠癌组织、20例结直肠腺瘤组织、10例结直肠黏膜组织中CD105的表达。结果60例结直肠癌标本平均微血管计数为(30±8)条。结直肠癌CD105标记的MVD值明显高于结直肠腺瘤组织(P<0.01)。CD105标记的MVD值与肿瘤分期、淋巴结转、远处转移明显差异有统计学意义(P<0.01)，而与患者的年龄、性别、肿瘤直径、大体类型、病理类型及组织学分级均差异无统计学意义(P>0.05)。结论MVD在TNM分期、淋巴结转移情况和远处转移情况有明显差异，提示CD105表达密度增强的患者浸润转移率高、预后差。

结直肠肿瘤；CD105；临床病理特征；微血管密度

结直肠癌是消化道中常见的恶性肿瘤之一，通过测定微血管密度(MVD)，发现肿瘤中新生血管数量越多癌组织发生转移的可能性越大[1]；研究表明，CD105在肿瘤组织及其周围的血管内皮细胞中表达丰富，可以成功标记新生血管[2]，且明显优于CD34、Ⅴ Ⅲ因子血管标记物[3]。本研究通过免疫组化检测结直肠癌组织中CD105表达情况并探讨其与血管生成的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2008至2012年我院就诊的的原发性结直肠癌术后标本60例，均有明确的病理组织学诊断结果，所有患者在术前均未经任何治疗，所有病例资料完整。随机从60例结直肠癌标本中选取10例，距结直肠癌组织边缘10 cm处经病理切片证实的正常黏膜组织为癌旁组织。同时选取结直肠腺瘤组织20例作为对照组。60例结直肠癌患者中，男35例，女25例，年龄45～65岁。临床分型：隆起型10例，溃疡型36例，浸润型5例，其他类型9例。组织学类型依照2003版美国肿瘤联合会(AJCC)分类标准分类：高分化腺癌14例，中分化腺癌23例，低分化腺癌23例；根据国际抗癌联盟(UICC)制定的TNM分类标准(2003)分期：Ⅰ期5例，Ⅱ期17例，Ⅲ期20例，Ⅳ期18例。病理证实伴有淋巴结转移41例，无淋巴结转移19例。

1.2 试剂 鼠抗人CD105单克隆抗体(即用型)、LSAB免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3 方法 将所选取的病例标本常规行HE染色确定病理类型。免疫组化染色程序按LSAB免疫组化染色试剂盒说明书进行。

1.4 结果判定 CD105表达呈阳性的血管内皮细胞多为不规则排列方式，较少见到明显的血管管腔，血管管壁较薄且极少见到平滑肌组织。在被染色的组织切片中，微血管的分布不均匀，许多部位的阳性内皮细胞数明显多于其他部位，比如在肿瘤实质边缘的间质即新生血管生成区CD105表达呈阳性的血管内皮细胞数明显多于其他部位。微血管计数参照Weidner方法[4]。

1.5 统计学分析 应用SPSS 17.0统计软件，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CD105在结直肠癌组织中的表达 CD105阳性细胞着色部位主要位于血管内皮细胞的胞膜和胞质，胞膜着色强于胞质。CD105标记的MVD所显示的血管多为新生薄壁、管径小的血管，大的厚壁血管未见CD105的表达。结直肠癌CD105标记的MVD值明显高于结直肠腺瘤组织(P<0.01)。见图1、表1。

2.2 CD105表达与结直肠癌血管生成的关系 CD105标记的MVD值与结直肠癌肿瘤分期、淋巴结转、远处转移明显相关: (Ⅲ+Ⅳ)期的MVD值明显高于(Ⅰ+Ⅱ)期MVD值，差异有统计学意义(P<0.01)；在结直肠癌，有淋巴结转移组的血管数为(33±7)，无淋巴结转移组为(23±4)，微血管数目与淋巴结是否转移，差异有统计学意义(P<0.01)。伴有远处转移组的血管数为(37±7)，无远处结转移组为(26±5)，微血管数目与患者是否有远处转移，差异有统计学意义(P<0.01)。而与年龄、性别、肿瘤直径、大体类型、病理类型及组织学分级，差异无相关性(P>0.05)。见表2。

a：结直肠癌；b：癌旁正常组织

表1 CD105在不同结直肠组织中的表达

表1 CD105在不同结直肠组织中的表达

组别CD105结直肠癌组(n=60)30±7*对照组(n=20)19±4 正常黏膜组(n=10)0

注：与腺癌组比较，*P<0.01

表2 CD105表达与结直肠癌血管生成的关系

3 讨论

CD105是内皮细胞表达的糖蛋白，分子量为180kD，由两个单体通过二硫键连接而成，编码基因位于9号染色体长臂(9q34-qter)，氨基酸序列含有精氨酸-甘氨酸一天门冬氨酸三肽序列[5]。血管生成在恶性肿瘤的生长和发展中起着重要的作用， 新生的肿瘤微血管在结构 上不完善 ， 具有高通透性的特性， 因此它比正常生理下产生的微血管抵抗肿瘤侵袭的能 力差，更容易发生血管侵袭和血行肝转移的发生[6,7]。

CD105在肿瘤组织及其周围的血管内皮细胞中有丰富的表达[8]，可以成功标记新生血管[2]，且明显优于CD34、ⅤⅢ因子血管标记物[3]，而其在正常组织的血管上无表达。

Takahashi等[9]检测了110例实体肿瘤患者 (其中34例结直肠癌、16例乳腺癌、51例其他肿瘤)、8例良性疾病患者和31例健康志愿者的血清CD105水平，发现有转移的肿瘤患者血 清CD105高于无转移者，且均高于对照组；化疗后血清CD105下降。有学者应用逆转录-聚合酶反应(RT-PCR)技术检测32例原发性肝细胞癌(HCC)行根治性切除术后随访1年以上患者及20例肝内胆管结石患者(对照组)肝组织CD105mRNA的表达，发现CD105mRNA的高表达与肿瘤大小、临床病理分期和病理类型无关(P>0.05)，而与术后早期复发转移有关(P<0.05)，这表明CD105的高表达有可能成为术后早期复发转移的标志物[10]。Sandlund等[11]通过对肾细胞癌的研究发现，CD105的表达同肾细胞癌的分期、分级、预后密切相关。Chien等[12]通过对舌鳞癌的研究发现，CD105的高度表达同淋巴结转移以及TNM分期密切相关(P均<0.01)，提示CD105的免疫表达是舌鳞癌的预后指标。相似的研究结果亦见于肺非小细胞癌、口腔癌、胃癌等的研究[13，14]。研究表明，CD105可作为肿瘤诊断、转移和复发及判断预后理想指标[5,15]。

本实验研究结果表明，CD105标记的MVD所显示的血管多为新生薄壁、管径小的血管，大的厚壁血管未见CD105的表达。60例结直肠癌标本平均微血管计数为(30±8)条。结直肠癌CD105标记的MVD值明显高于结直肠腺瘤组织(P=0.005)。

结直肠癌CD105标记的MVD值明显高于结直肠腺瘤组织(P=0.005)。CD105标记的MVD值与肿瘤分期、淋巴结转、远处转移明显相关(P均<0.01)，而与患者的年龄、性别、肿瘤直径、大体类型、病理类型及组织学分级均无明显相关(P均>0.05)。

本实验研究结果表明，CD105标记的MVD所显示的血管多为新生薄壁、管径小的血管，大的厚壁血管未见CD105的表达。结直肠癌CD105标记的MVD值明显高于结直肠腺瘤组织。这一结果与Akagi等[4]的研究一致，说明CD105是预测结直肠腺瘤癌变的有效指标，CD105有助于早期诊断疾病。本实验研究结果还显示，微血管数目与是否有淋巴结转移及远处转移有显著的差异性，这与Saad 等[16，17]的研究结果一致。

此外，本研究结果还显示(Ⅲ+Ⅳ)期的MVD均值明显高于(Ⅰ+Ⅱ)期的MVD均值，这些均说明了CD105作为血管标志物，可参与血管生长，在结直肠癌血管生长过程中发挥了重要的作用，且与结直肠癌的进展与预后密切相关。由此，本实验研究结果认为由于CD105与血管内皮细胞的关系密切，人们有望通过CD105这一途径来抑制血管内皮细胞的生长，从而有效控制结直肠癌的生长和转移，达到治疗结直肠癌的目的。

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4 Akagi K,Ikeda Y,Sumiyoshi Y,et al.Estimation of angiogenesis with anti-CD105 immunostaining in the process of colorectal cancer development.Surgery，2002，131(1 Suppl): S109-113.

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ExpressionofCD105incolorectalcarcinomaanditsrelationshipwithangiogenesis

CAOHuaiyu,CHENGXuemei,WEILeibin.DepartmentofAnesthesiology,TheNo.251HospitalofPLA,Hebei,Zhangjiakou075000,China

ObjectiveTo investigate the expression of CD105 in colorectal carcinoma and to explore the relationship between the expression and angiogenesis.MethodsImmunohistochemistry was used to detect the expression of CD105 in 60 cases of primary colorectal carcinomas,20 cases of colorectal adenomas and 10 cases of normal colorectal tissues.ResultsThe average microvessel number labeled with CD105 in 60 cases of colorectal carcinoma was 30±8.The MVD value in primary colorectal carcinomas labeled with CD105 was significantly higher than that in colorectal adenomas (P<0.01),which was closely related to TNM stage,lymph node metastasis and distant metastasis (P<0.01),however,which was not correlated with patient’s sex and age,the tumor’s size,histological type,pathological type and the degree of differentiation (P>0.05).ConclusionMVD has significant differences at the respects of TNM stage,lymph node metastasis and distant metastasis,which suggests that the patients with enhancement of CD105 expression density have higher rates of tumor metastasis and poorer prognosis.

colorectal carcinoma;CD105;clinicopathologic factors;microvessel density

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.10.008

075000 河北省张家口市，中国人民解放军解放军第251医院麻醉科

R 735.31

A

1002-7386(2014)10-1463-03

2014-01-12)