刚果红染色在临床病理诊断中的应用价值

李玉莲，袁宏伟，徐晓艳*

(1内蒙古医科大学病理学教研室，呼和浩特 010059;2内蒙古医科大学第一附属医院病理科;*通讯作者，E－mail:xxy_patho@163.com)

在病理技术飞跃发展的今天，因免疫组织化学技术及原位杂交技术在肿瘤病理诊断中有较大作用，但它们仍有一定的局限性。而常用的特殊染色及组织化学技术操作简便，结果稳定，可弥补上述病理技术的不足，并能广泛用于临床病理诊断，而且处于不断发展和完善中［1－3］。本文收集30例HE染色下有均质粉染区域的标本进行特殊组织化学染色—刚果红实验观察，以探讨该技术在日常病理诊断及科研工作中的应用价值。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本 30例标本包括10例声带息肉、10例甲状腺髓样癌、10例淀粉样变肾小球肾炎。标本来自本院2009－2012年间住院存档的病理标本。

1.1.2 仪器 全封闭式组织处理机、包埋机、石蜡切片机。

1.1.3 试剂 10%中性福尔马林、梯度酒精、二甲苯、石蜡(58－60℃)、明矾苏木素、氢氧化钾酒精分化液(氢氧化钾0.2 g，80%100 ml)、刚果红染液(刚果红0.5 g，50%酒精100 ml溶解即成)。

1.2 方法

30例标本经10%中性福尔马林固定，石蜡切片，HE染色及特殊组织化学刚果红染色。

刚果红染色方法:①石蜡切片3－4μm，切片脱蜡至水洗;②刚果红染液5 min;③直接用氢氧化钾酒精分化液冲洗3－10 s，至无多余染液流出为止;④自来水洗终止分化，刚果红染色结果为红色或砖红色;⑤进明矾苏木素染细胞核5 mis;⑥自来水洗，常法分化，返蓝;⑦各级酒精脱水(80%、95%酒精Ⅰ、Ⅱ各脱水5 min，无水乙醇Ⅰ、Ⅱ各脱水5 min)，二甲苯Ⅰ、Ⅱ各透明5 min，最后中性树胶封固。

2 结果

伴有淀粉样变性的声带息肉在光镜HE染色下，淀粉样变性区域呈现均质粉染云雾状或搓衣板样(见图1A，见第670页)，为无定形嗜酸性蛋白质性物质沉积所造成的，HE染色下很难与玻璃样变性鉴别。通过刚果红染色，淀粉样变性区域呈红色或砖红色(见图1B，见第670页)。同样伴有淀粉样变性的甲状腺髓样癌(见图2A，见第670页)，刚果红染色也呈现阳性反应(见图2B，见第670页)。淀粉样变性肾小球肾炎常常在肾小球系膜基质及血管基底膜有砖红色物质沉积(见图3，见第670页)。

3 讨论

淀粉样变性的染色方法有很多种，如结晶紫、刚果红、甲基紫、阿新蓝等［2］。目前，刚果红染色法是诊断淀粉样变性最简易而有效的方法，在免疫系统疾病或肿瘤疾病的病理诊断中起到关键性的作用，是当今病理诊断中的一个重要鉴别方法。淀粉样变性的确诊需要病理学检查出现刚果红染色阳性，光镜下观察呈现红色或砖红色，而在偏振光显微镜下呈现苹果绿双折光［5］。

本文通过对30例声带息肉、甲状腺髓样癌、淀粉样变肾小球肾炎进行观察，证明刚果红染色在科研及日常病理诊断中的应用价值。刚果红染色可以从颜色上区别玻璃样变性与淀粉样变性，而HE染色却达不到这种效果。声带息肉、甲状腺髓样癌、淀粉样变肾小球肾炎这三种疾病有时在HE染色下会看到细胞间质或细胞内存在大量均质粉染的蛋白质样物质的沉积，有时呈云雾状，很难判定它是玻璃样变性还是淀粉样变性。另外这两种变性的临床提示意义不同，玻璃样变性常常提示疾病的老化退变状态;而淀粉样变性在不同疾病中的临床提示意义有所不同。声带息肉淀粉样变性又称为淀粉样瘤［6］，是由于淀粉样物质寄居在喉部而引起的病变，并非真性肿瘤;可能与喉部慢性炎症，局部血液和淋巴循环障碍，蛋白质代谢紊乱和组织退行性病变有关;也有人认为与全身免疫缺陷有关。声带息肉间质内的淀粉样变性在HE染色下很容易诊断为玻璃样变性而被忽略掉，所以遇到此种病例时，可进行刚果红染色，从而有利于确定病因，提示患者应做全身检查以排除全身系统性淀粉样变性。另外在甲状腺髓样癌的标本中常常伴有淀粉样变性［7］，所以当肿瘤细胞形态及组织学结构在诊断髓样癌不太确定时，可进行刚果红染色，如发现刚果红染色阳性的区域，便可起到辅助诊断的作用。还有一类疾病，淀粉样变性则是其病变的主要原因，那就是淀粉样变肾小球肾炎。该类肾炎常因淀粉样物质沉积在毛细血管基底膜上，造成毛细血管基底膜增厚，管腔狭窄而闭合，肾小球被大量淀粉样物取代，肾小管萎缩。临床主要表现为蛋白尿、肾病综合征，后期常引起肾功能不全。此类疾病在电镜及免疫荧光下也有一定的表现。因为肾小球淀粉样变性会引起严重后果，另外淀粉样变性肾小球肾炎在光镜下HE染色很难辨认出是否存在淀粉样变性，所以对肾穿标本常规进行刚果红染色，有利于排除由于淀粉样变性导致的肾小球肾炎。本科室对肾穿标本常规进行刚果红染色，以排除淀粉样变性引起的这一类肾病，以便早期诊断，早期给予干预治疗。

综上所述，刚果红染色在病理诊断中发挥了重要的作用。我们在用普通染色法对病变进行全面观察的基础上，再选用此种染色方法，对需要显示区分或证实的组织病变成分进行观察和研究具有重要意义，有利于疾病的诊断与鉴别诊断。

［1］曾汉英，于桂臣，刘晓冬.常用特殊染色及组织化学技术在肿瘤病理诊断中的应用［J］.吉林医学院学报，1999，19(4):78.

［2］胥维勇.现代病理学技术条件下特殊染色的应用价值［J］.实用医技杂志，2012，19(3):313－314.

［3］王生灵，马逢春，刘亚平，等.常用特殊染色在病理诊断中的应用［J］.兰后医学，1985，6(2):138.

［4］曾汉英，于桂臣，杨秋佳，等.特殊染色在肿瘤病理组织学诊断中的应用［J］.第四军医大学吉林军医学院学报，2002，24(3):139－140.

［5］朱寅杰，张连华，薄隽杰，等.原发性膀胱淀粉样变性1例报告并文献复习［J］.临床泌尿外科杂志，2011，26(6):449－451.

［6］冯勇，奚玲，余晓旭，等.鼻、咽及喉部淀粉样变12例临床分析［J］.临床耳鼻咽喉头颈外科杂志，2011，25(24):1115－1117.

［7］陈瑞慧，刘勤江，廖世奇，等.甲状腺髓样癌的研究进展［J］.甘肃医药，2012，31(5):355－359.