反向点杂交法在β-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断中的应用

何晓清 何继宏 李远珍

反向点杂交法在β-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断中的应用

何晓清 何继宏 李远珍

目的 探讨反向点杂交法在β-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断中的应用价值。方法 抽取我院2012年10月至2013年10月收治的30例β-珠蛋白生成障碍性贫血患者采用反向点杂交法进行β-珠蛋白生成障碍性贫血基因检测，同时结合其相关临床资料进行回顾性分析。结果 30例β-珠蛋白生成障碍性贫血患者中，发生CD41-42突变者13例（43.3%），发生IVS-2-654者6例（20.0%），发生TATAbox-28者5例（16.7%），发生CD17突变者4例（13.3%），发生CD43和CD26者各1例（3.3%）。结论 给予β-珠蛋白生成障碍性贫血患者反向点杂交法诊断，能有效诊断患者的基因突变情况，临床应给予足够重视，并通过合理应用该诊断方式，加强产前诊断和防控。

反向点杂交法；β-珠蛋白生成障碍性贫血；基因诊断

在广东省，珠蛋白生成障碍性贫血是一种较为常见的遗传病症，其发病率具有明显的地域性，主要以热带、亚热带等地区较为多见，并且好发于地中海沿岸、北非、印度以及东南亚等地区[1]。一般地中海贫血主要包括两种类型，即α-地中海贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血，其中以β-珠蛋白生成障碍性贫血在我国南方最为多见[2]。为了加强临床对β-珠蛋白生成障碍性贫血的基因诊断，以做到尽早诊断和及时治疗，本文就我院2012年10月至2013年10月收治的30例β-珠蛋白生成障碍性贫血患者及其临床资料进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2012年10月至2013年10月到我院确诊并接受治疗的30例β-珠蛋白生成障碍性贫血住院患者及其临床资料，其中男17例，女13例，年龄7～64岁，平均年龄（28±5）岁。

1.2 方法

1.2.1 血液学诊断 所有入选患者均需进行血常规、红细胞脆性、血红蛋白电泳等检测。血常规采用ABX pentra DF 120血细胞分析仪检测；红细胞脆性参照比色一管测定方式[3]；血红蛋白电泳采用美国海伦娜公司生产的RZP快速电泳仪对其行检测。

1.2.2 β-珠蛋白生成障碍性贫血基因诊断 β-珠蛋白生成障碍性贫血基因检测盒由亚能生物技术公司所提供，严格按照说明书操作。若样本红细胞的平均容积在80 fl以内，红细胞渗透脆性不超过60%，或者是体检健康者的δ-HbA2超过3.5%，则认为患有β-珠蛋白生成障碍性贫血症状。

2 结果

30例β-珠蛋白生成障碍性贫血患者中，13例有发生CD41-42基因突变，突变率为43.3%；6例IVS-2-654突变，占20.0%；另外发生TATAbox-28、CD17、CD43和CD26基因突变者分别有5例、4例、1例和1例，见表1。

3 讨论

反向点杂交法是近年来常用于检测β-珠蛋白生成障碍性贫血的一种基因诊断方式，不过在大部分临床研究中，该基因诊断方法常与其他检测手段共同联用，以进一步确保β-珠蛋白生成障碍性贫血的诊断符合率[4-5]。通常在给予疑为β-珠蛋白生成障碍性贫血患者血液学诊断时，可选择反向点杂交法联合血液学诊断法。血液学诊断法主要是通过对疑似为β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的血红蛋白、血红蛋白-A2的表型改变情况进行检查，以此来为病情的诊断提供参考数据，同时，该诊断方法的检测成本相对低廉，而且操作简单、安全，诊断速率高，为基层医院在诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血方面提供了可行性[2,6]。不足的是，该诊断方法无法对β-珠蛋白生成障碍性贫血提供确切诊断，且也无法对其进行分型。相对来说，反向点杂交法在该方面则具有这两方面的优势，并且与其他基因诊断手段类似，具有操作安全、简单和诊断率高的特点。结合本研究结果来看，30例β-珠蛋白生成障碍性贫血患者经反向点杂交法检测后，发现有接近一半的患者（13例）发生CD41-42突变，基因突变率为43.3%，有6例发生IVS-2-654基因突变，另外发生TATAbox-28者有5例，发生CD17突变者有4例，发生CD43和CD26者各有1例。提示反向点杂交法可深入诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血疾病，并对其进行分型观察，效果相对令人满意。

表1 30例β-珠蛋白生成障碍性贫血患者的基因诊断结果分析

经本研究表明，给予β-珠蛋白生成障碍性贫血患者反向点杂交法诊断，能有效诊断患者的基因突变情况，临床应给予足够重视，并通过合理应用该诊断方式，加强产前诊断和防控。

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R556.61

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1673-5846(2014)07-0180-02

广东省惠州市第三人民医院检验科，广东惠州 516002