隆尧鸡腿葱中3种水溶性维生素含量分析

赵杰，王菁菁，丁利杰，王庭欣，刘峥颢

（河北大学 质量技术监督学院，河北 保定 071000）

鸡腿葱是大葱的一种，它的味道鲜美，少辛辣，多香甜，嚼之清香盈口，是一种较好的调味品.隆尧鸡腿葱是鸡腿葱的一种，不仅具有较高的食用价值［1］，而且还有很高的药用价值［2－5］：葱白主治感冒风寒，腹痛尿闭，头痛鼻塞；葱叶能消肿解毒；葱苒能散热止痛；葱须能通气止血；葱花能治心脾痛、腹胀；葱实能补中益气、明目.文献报道，葱中含有丰富的蛋白质、糖类、脂肪、维生素和微量元素等等［6－8］.本实验将采用高效液相色谱方法对隆尧鸡腿葱葱白部分的3种水溶性维生素（VC，VB1，VB2）的含量进行分析，并以莱芜鸡腿葱作对比分析，诣在开发隆尧鸡腿葱的营养价值.

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器

高效液相色谱仪：Agilent 1100型，安捷伦科技有限公司；数控超声波清洗器：KQ－500DE 型，山东省昆山市超声仪器有限公司；离心机：TGL－10C型，上海安亭科学仪器厂；料理机：山东九阳股份有限公司；电子天平：AR1140型，梅特勒－托利多仪器（上海）有限公司；超纯水仪：NEX UP 1000型，韩国HUMAN 公司.

1.1.2 试剂

VC，VB1，VB2标准品：中国食品药品检定所；甲醇为色谱纯，磷酸二氢钾、盐酸、草酸为优级纯，均购于天津市科密欧化学试剂有限公司.

1.1.3 样品

河北隆尧鸡腿葱（LY），由隆尧质监局提供；山东莱芜鸡腿葱（SD），购于莱芜蔬菜基地.采用葱白部分进行实验研究.

1.2 色谱条件

色谱柱：Kromat Universil C184.6 mm×250 mm，5 μm；检测波长270 nm；流动相A：甲醇，B：0.05mol／L磷酸二氢钾（pH＝6.0），梯度洗脱，流速1.0 mL／min，进样体积20μL；柱温35 ℃；保留时间25min.梯度设定见表1.

表1 梯度设置Tab.1 Setting of gradient

1.3 方法

1.3.1 标准溶液的配制

分别准确称取标准品VC 15.0mg，VB15.0mg，VB25.0mg，用0.01mol／L盐酸－0.001mol／L草酸（V:V＝1:1）混合溶液定容至500mL 容量瓶，配制成以下质量浓度的标准品储备液备用：VC 30mg／L，VB110mg／L，VB210mg／L，将储备液置于4 ℃条件下避光保存.

分别准确吸取2.5，5，7.5，10，12.5，15 mL 标准储备液至50 mL 的容量瓶中，用0.01 mol／L 盐酸－0.001mol／L草酸（V:V＝1:1）混合溶液定容，制成VC 1.5，3，4.5，6，7.5，9mg／L 的标准系列；VB10.5，1，1.5，2，2.5，3mg／L的标准系列；VB20.5，1，1.5，2，2.5，3mg／L的标准系列.

1.3.2 样品前处理

准确称取葱样品10g，加入0.01mol／L盐酸－0.001mol／L草酸（V:V＝1:1）混合溶液打浆，再将样品转入离心管中，超声波处理30 min，10 000r／min离心25 min，取上层清液定容至50 mL 容量瓶.将溶液经0.45μm滤膜过滤2次，取20μL进行进样检验.

1.3.3 回收率和精密度的测定

取鸡腿葱样品2份，按1.3.2的方法进行样品前处理后，1份加入维生素标准溶液，另1份作为对照.利用高效液相色谱仪测定3种维生素的质量浓度，通过公式分别计算3种维生素的回收率和变异系数.

回收率＝（加标后样品质量浓度－样品质量浓度）／加入标品的质量浓度×100%；

变异系数RSD%＝标准差／样品质量浓度均值×100%.

2 结果

2.1 标准曲线的绘制

将5组标准系列混合样品过4.5μm 滤膜过滤，质量浓度由小到大依次进样，进样量为20μL，记录峰面积.分别以峰面积为横坐标（X）、进样质量浓度为纵坐标（Y）绘制标准曲线并计算回归方程，得到3 种维生素的线性范围和相关系数等指标，结果见表2.

表2 3种维生素线性范围和相关系数Tab.2 Linear ranges and correlation coefficient of three kinds of vitamins

3种维生素在各自的测试质量浓度范围内都具有良好的线性关系，相关系数都在0.999 0 以上，标准溶液的液相色谱见图1.

图1 3种维生素标准溶液色谱Fig.1 Chromatogram of standard solution of three kinds of vitamins

2.2 精密度

将混合标准溶液按实验条件，连续进样5次，考察方法的变异度，结果如表3所示.可以看出：变异系数RSD 为1.20%～2.21%，说明此方法的精密度良好，可以进行准确的定量分析.

表3 3种维生素的变异系数Tab.3 RSD of three kinds of vitamins

2.3 回收率

取一葱样品50mL，向其加入已知量的VC，VB1，VB2，充分混匀，按照上述条件进行测定.通过添加标准样品，按照本方法测定回收率，其结果为85.48%～102.40%，见表4.说明此前处理及测定方法准确可行，可以进行准确的定量分析.

表4 高效液相色谱所测3种维生素的回收率Tab.4 Recovery rate of three kinds of vitamins

2.4 样品的测定

对样品进行处理，按照实验方法提取和测定葱中各维生素含量，然后根据标准曲线及回归方程计算VC，VB1，VB2的含量，结果见表5.

表5 3种维生素的含量Tab.5 Content of three kinds of vitamins

续表5Continue tab.5

对所得的实验数据进行统计学分析，即求各水溶性维生素的均值和标准偏差，并对2种鸡腿葱进行t检验.结果如表6所示.

表6 3种维生素检测结果（M±SD）Tab.6 Test results of three kinds of vitamins（M±SD）

表6显示，隆尧鸡腿葱中VC和VB2含量高于莱芜鸡腿葱，且有统计学差异；而VB1含量二者没有明显差异.

3 讨论

采用高效液相色谱法检测鸡腿葱中3 种水溶性维生素的含量.3 种水溶性维生素的检出限均为0.05mg／L，方法的精密度RSD 为0.96%～1.65%，回收率为85.48%～102.40%，因此可以认为本文所用的方法是准确可靠的，可以用于鸡腿葱中3种水溶性维生素的检测.

本文在对流动相的选择方面做了大量研究，用甲醇－水体系、甲醇－醋酸缓冲溶液体系对溶液进行分离，所得色谱峰扩散现象严重，分离效果较差；而用甲醇－磷酸二氢钾缓冲溶液体系进行分离，色谱峰较为集中，分离效果良好，并且能缩短出峰时间.此前曾有利用高效液相色谱测定水溶性维生素的报道［9］，但它的流动相用到了辛烷磺酸钠离子对试剂，这就大大增加了实验成本.本文在对样品处理方法方面同样做了多项研究，分别用水、盐酸、乙酸、草酸以及他们的混合溶液作为提取溶液，以保留时间、回收率等作为指标，得出盐酸－草酸的混合溶液提取效果最佳.

通过对实验所得结果进行分析，隆尧鸡腿葱中VC和VB2含量高于莱芜鸡腿葱，且2种葱具有显著的统计学差异.由此可见，在水溶性维生素含量方面，隆尧葱营养价值要高于莱芜葱.在此实验基础上，可以增加样本量，通过大量的实验数据来制定隆尧鸡腿葱水溶性维生素的质量标准，以此来鉴别未知种类的葱是否是隆尧鸡腿葱，对我省隆尧县这一标志性产品起到保护作用，同时也为隆尧鸡腿葱的开发利用提供技术支持.

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