雷诺嗪应用于健康人体的药代动力学研究※

王加良 夏洪莲 胡春阳

雷诺嗪应用于健康人体的药代动力学研究※

王加良 夏洪莲 胡春阳

目的 研究雷诺嗪在健康人体中的药代动力学。方法选取8名健康志愿者作为研究对象，其中5名口服雷诺嗪缓释片，3名口服安慰剂，应用LC-MS/MS法（液相色谱-串联质谱法）检测每名受试者的血药浓度，并对药代动力学参数进行计算。结果雷诺嗪血药浓度线性变化范围在5.3～4000.8ng/m l内，定量下限值为5.3ng/m l，日间及日内精密度均＜15%。药代动力学参数：CL为（0.104±0.047）L/h、V为（0.73±0.34）L、t1/2为（3.12±1.48）h、Cmax为（1.28 ±0.51）mg/m l。结论LC-MS/MS法具有灵敏度高、操作便捷的特点，可用于检测雷诺嗪缓释片在健康人体中的药代动力学。

药代动力学；液相色谱-串联质谱法；雷诺嗪

雷诺嗪是一种PFOX（部分脂肪酸氧化酶）抑制剂，是临床治疗慢性心绞痛的常用药物[1]。雷诺嗪可对部分脂肪酸代谢加以抑制，促进葡糖糖氧化代谢，使心脏需氧量减少，从而缓解、预防心绞痛，并且这一作用过程还不会对患者的血流动力学及心率产生影响[2]。另外，雷诺嗪还能对INa（晚钠离子电流）发挥阻滞作用，从而使缺血心肌细胞的钙超载状态加以改善，降低心肌耗氧量，并对心室复极化情况加以改善[3]。血雷诺嗪浓度的测定方法包括蛋白沉淀、固相萃取等方法，但这些方法都较为复杂，本研究应用了LC-MS/MS法进行血雷诺嗪浓度检测，并对其药代动力学参数进行了计算，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取 8名健康志愿者作为研究对象，男5名，女3名，年龄在22～28岁，平均（23.2 ±1.6）岁，体重在58～71kg，平均（61.2±7.6）kg，身高在166～182cm，平均（169.8±7.3）cm，体质量指数（BM I）平均值为（21.6±2.0）kg/cm2。随机分为研究组（5名）和对照组（3名），经心电图、尿常规、血常规、血生化检查，均显示正常。受试者均知情同意，并自愿签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 仪器与药品 仪器：Shimadzu 20AD型高效液相色谱分析仪（日本岛津公司），Sciex QTRAP 5500型三重四极杆——线性离子阱串联质谱仪（美国AB公司）。药品：由大连中信制药生产的雷诺嗪缓释片（500mg/片）、安慰剂（雷诺嗪对照品，99.46%），由中国药品生物制品检定所生产的氯胺地平对照品。

1.2.2 给药及检测方法 两组受试者均在试验前1d晚上开始禁食（12h），次日早晨，研究组受试者空腹服用雷诺嗪缓释片，剂量为1500mg，以250m l温开水送服；对照组空腹服用安慰剂，2h后可开始饮水，服药4h后统一进餐。服药前及服药后0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、8.0h，均采集5.0m l静脉血，置于肝素化试管保存，离心10min（转速3000r/min）后，取下层血浆，并置于可控温冰箱中保存（-80℃）。

1.2.2.1 色谱条件 Waters Xterra RPC18色谱柱（3.5μm，2.10mm×100.00mm），流动相为乙腈（-7mmol/m l）醋酸铵水溶液（90:20），柱温40℃，流速0.25m l/min，进样量5μl。

1.2.2.2 质谱条件 ESI（电喷雾离子源）、正离子方式检测、MRM（多反应监测）。离子喷射电压、温度分别为4500V、550℃，气帘气压208kPa，GS1（源内气体1）压力380kPa，GS2（气体2）压力415kPa。采用 LC-MS/MS法（液相色谱-串联质谱法）对血液样本中的雷诺嗪浓度进行检测，并对药代动力学参数进行计算。

1.3 统计学方法本次研究采用软件Win Nonlin 5.2处理血药浓度相关数据，对药代动力学参数进行计算。

2 结果

雷诺嗪血药浓度线性变化范围在 5.3～4000.8 ng/m l内，定量下限值为5.3ng/m l，日间及日内精密度均＜15%。口服 1500mg雷诺嗪缓释片的各项药代动力学参数比较，见表1。

表1 口服1500mg雷诺嗪缓释片的各项药代动力学参数比较 (±s)

表1 口服1500mg雷诺嗪缓释片的各项药代动力学参数比较 (±s)

项目 参数12.68±4.02 12.26±4.04 17.72±8.30 17.51±8.30 0.104±0.047 0.73±0.34 5.01±1.48 3.12±1.48 1.28±0.51 MRT0-∞(h) MRT0-48(h) AUC0-∞(mg/h·m l) AUC0-48(mg/h·m l) CL(L/h) V(L) t1/2(h) tmax(h) Cmax(mg/m l)

3 讨论

本次研究对文献[4]中的血药浓度检测方法进行了创新、改进。结果显示，在优化条件后，实施固相萃取，具有较高的稳定性和回收率，同时所需血浆样本量少、无基质效应、线性范围宽[5]。在本次研究中，对不同比例的甲醇-乙腈-水、乙腈-水、甲醇-水流动相加以优化，结果表明，在流动相中加入乙酸铵和乙酸可提高响应，同时能更好地将内源性物质和雷诺嗪分离开来，该方法快速、灵敏、准确，定量下限值为 5.3ng/m l，能较好地满足雷诺嗪血药浓度检测要求。通过检测发现，健康人体在服用1500mg雷诺嗪缓释片后，在3.12h时可达到血药浓度峰值，t1/2为 5.01h，这一结果与相关文献报道一致。

[1] 侯文静,李扬,胡欣,史爱欣.雷诺嗪在健康人体的药代动力学[J].中国临床药理学杂志,2013(5):342-344,349.

[2] 李长军,于艳玲,杨清敏,等.盐酸雷诺嗪缓释片处方优化及犬体内药代动力学的研究[J].药学学报,2010(9):1170-1176.

[3] 谭亲友,朱荣华,李焕德,等.HPLC-MS/MS法测定雷诺嗪血药浓度及其缓释制剂的药代动力学研究[J].中国临床药理学与治疗学,2012(5):549-553.

[4] 廖明琪.雷诺嗪光学异构体手性拆分、药动学及药效学研究[D].兰州大学,2013.

[5] 王源,陈笑艳,孙昨明,等.液相色谱串联质谱法同时测定人血浆中雷诺嗪及其三种代谢产物[C].中国药学会、烟台市人民政府、2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集,2011.

R969.1

A

1673-5846(2014)05-0216-02

牡丹江医学院红旗医院，黑龙江牡丹江 157011

黑龙江省教育厅科研项目，项目编号：12521579。黑龙江省卫生厅科研项目，编号2011-304