巴洛沙星分散片与普通片的药代动力学比较研究※

赵玉梅 贾天华 朱仁英 尹松鹤

巴洛沙星分散片与普通片的药代动力学比较研究※

赵玉梅1贾天华1朱仁英1尹松鹤2

目的 建立测定血浆中巴洛沙星浓度的HPLC法，比较巴洛西林分散片与巴洛沙星普通片在健康大鼠体内药代动力学差异。方法选择12只健康大鼠分为两组，分别单剂量口服巴洛沙星分散片与巴洛沙星普通片各10mg，采用高效液相色谱法检测巴洛沙星的血药浓度。结果巴洛沙星分散片与巴洛沙星普通片主要药代动力学参数 Cmax分别为（93.0±2.4）μg/L和（89.0±3.1）μg/L，tmax分别为（1.30±0.21）h和（1.80±0.11）h，t1/2分别为（4.68±1.65）h和（4.85±1.42）h，AUC0∞分别为（953.0±27.8）μg/（μg /l）和（836.0±30.1）μg/（μg /l），AUC01分别为（856.0±24.2）μg/（μg /l）和（735.0±32.5）μg/（μg /l）。结论巴洛沙星分散片tmax、t1/2小于普通片，AUC0∝、Cmax高于普通片，说明巴洛沙星分散片具有一定的速释优点，明显优于普通片。

巴洛沙星；分散片；药代动力学；血药浓度

巴洛沙星是第四代喹诺酮类抗菌药物，由日本中外制药株式会社研制并与韩国 Choongwae公司共同开发[1]，巴洛沙星水溶性差，溶解度仅为1.5mg/m l；口服吸收差，目前国内仅有的制剂为胶囊剂和片剂，但其生物利用度较低，且体积较大，给老人、幼儿、特别是吞咽固体制剂困难患者的治疗带来了困难。本实验研究制备的巴洛沙星分散片，药物释放迅速，血药浓度在短时间内达到峰值。本实验建立了血浆中巴洛沙星的HPLC方法学；同时采用该方法，在健康大鼠体内，对巴洛沙星分散片与其普通片的药代动力学行为进行了比较，获得了比较满意的试验结果。

1 材料与仪器

1.1 仪器高效液相色谱仪（LC1100美国安捷伦公司）施涡混合器（XW-80上海医科大学仪器厂）低温离心机（CS-15R型美国Beemkna公司）电子天平（AL-204 赛多利斯）。

1.2 实验动物选取健康大鼠12只，其均为黑龙江中医药大学实验动物中心提供合格证号为P00101006（发证单位为黑龙江省实验动物管理委员会）。

1.3 试剂与材料巴洛沙星对照品：由中国药品生物制品检定所提供；加替沙星对照品：由中国药品生物制品检定所提供；巴洛沙星分散片（自制）；巴洛沙星片：由广东爱康药业有限公司提供，批号20100708。乙腈为色谱纯，其他试药均为分析纯。

2 方法

2.1 受试动物选择12只大鼠，雄、雌各6只，平均体重（0.30±0.01）kg，两个月内未参加过药物试验。采用随机单剂量双交叉试验设计方案[2]。将12只大鼠随机分成两组，每组6只。给药前禁食12h，试验当日，分别单剂量1次口服巴洛沙星10mg，温开水25m l送服，4h后进食；试验期间统一饮食、饮水，2次交叉试验清洗期均为1周，观察并记录给药后反应情况。

2.2 样本采集分别于服药前和服药后0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、5.0、9.0、12.0、24.0h，采取 12只大鼠的1.5m l耳缘静脉血，置于肝素试管中，离心，分取血浆贮存于-40℃冰箱备测。

2.3 方法学考察

2.3.1 色谱条件 色谱柱：ODS C18（5μm，200.0 mm ×4.6mm）；流动相：磷酸二氢钾缓冲液-乙腈（75:25）（磷酸和三乙胺调pH为3.4）；流量：1.0m l；波长294nm；进样量20μl；柱温：25℃。

2.3.2 血浆样品预处理[3]精密量取 0.5m l血浆，加入50μl 5mg/l内标储备液，漩涡1min混匀，加入4m l二氯甲烷，漩涡5min混匀，然后在4000r/min下离心15m in，取有机层2m l，在40℃下氮气吹干，用200μl流动相溶解残渣，进样量20μl，在上述色谱条件下测定样品，记录其色谱图和巴洛沙星峰面积，计算血清中巴洛沙星的浓度。

2.3.3 专属性 在上述色谱条件下所得色谱图显示，巴洛沙星的保留时间约为9.6min，内标物加替沙星的保留时间约为11.8min，分离度为2.5；血浆中的杂质不干扰样品的测定，基线平稳；因此本法专属性良好。

2.3.4 标准溶液与标准曲线制备 精密称取25.0mg巴洛沙星对照品置于 25m l量瓶中，加水溶解并加0.5m l稀盐酸助溶，稀释至刻度制成1.0g/L的标准贮备液。另精取10.0mg加替沙星对照品置于10m l量瓶中溶解，稀释至5.0mg/L的标准工作液。精密吸取标准贮备液适量，分别加入空白血浆0.5m l中，制成含巴洛沙星 50、100、200、500、1000、2000和4000μg/L的标准血浆样品，对其进行液相色谱分析。结果表明，以巴洛沙星与内标的峰面积比(Y)对浓度(X)回归，血浆浓度在50～4000μg/L内呈良好的线性关系。用加权法处理，得回归方程:Y=8.2 ×10-4X－3.5×10-2，Y=0.9982。

2.3.5 精密度 按血浆标准曲线测定方法，配制低、中、高不同浓度数份巴洛沙星血浆样品100、500、2000μg/L，按血浆样品预处理过程对血浆样品进行预处理，当日内测定5批，连续测定3d，并求得日内精密度和日间精密度。结果日内 RSD分别为0.8%、0.6%、1.1%（n=5）；日间RSD分别为2.5%、 2.7%、3.0%（n=3）。

2.3.6 回收率 配制低、中、高3种不同浓度的巴洛沙星标准血浆样品100、500、2000μg/L各5份，按以上相同方法处理步骤操作，计算血浆提取回收率。结果巴洛沙星在3种浓度时的方法回收率分别为98.3%、98.8%、99.1%（n=5）。

2.3.7 稳定性 将含巴洛沙星血浆样品，于-20℃冷冻24h，反复分别冻融3次后其含量下降了5%，置于-20℃冰箱分段低温保存。分别测定其在1、2、5、10、20d冰冻样品稳定性，测定结果RSD均在±13%以内。结果说明巴洛沙星在血浆中的稳定性良好。

3 结果

取12只大鼠分为两组，分别给与口服巴洛沙星分散片10mg和巴洛沙星普通片10mg后，测定两组大鼠的血浆，其平均血药浓度-时间曲线见图1。对巴洛沙星的药-时曲线，采用DAS 2.1软件进行拟合，所计算出的主要药动学参数见表1。结果表明，巴洛沙星的药-时曲线符合二室模型。

表1 巴洛沙星主要药代动力学参数[(±s),n=6]

表1 巴洛沙星主要药代动力学参数[(±s),n=6]

参数 巴洛沙星分散片 巴洛沙星片AUC0-t(μg/h/L) AUC0-∞(μg/h/L) Cmax(μg/L) tmax(h) t1/2(h) 856.0±24.2 953.0±27.8 93.0±2.4 1.30±0.21 4.68±1.65 735.0±32.5 836.0±30.1 89.0±3.1 1.80±0.11 4.85±1.42

图1 单剂量口服巴洛沙星分散片和巴洛沙星普通片10mg后大鼠体内的血药浓度-时间曲线

4 讨论

用不同剂量巴洛沙星分散片和谱通片对 12只健康大鼠交叉口服，测定药代动力学参数，结果t1/2与给药剂量无关。从药代动力学参数比较，巴洛沙星分散片达到最大峰值时间tmax为1.3h左右，而巴洛沙星普通片达到最大峰值时间tmax约为1.8h；巴洛沙星分散片的生物利用度是巴洛沙星普通片的1.4倍。结果表明，巴洛沙星分散片的优势是高效、速释、生物利用度高，从而证明了分散片制剂的科学性、优越性。

本实验采用反相高效液相色谱法，以ODS C18（5μm，200.0 mm×4.6mm，）；流动相：乙腈-磷酸二氢钾缓冲液（25:75）（三乙胺和磷酸调pH为3.4）；流量：1.0m l/m in；波长294nm进行定量检测，检测样品中巴洛沙星与加替沙星（内标）均获得满意的分离效果，且峰形对称良好，保留时间短。文中建立的测定人血浆中巴洛沙星浓度的HPLC法，具有操作简便、灵敏度高、分析时间短等优点。

[1] 糜志远,刘万忠.新氟喹诺酮类抗生素巴洛沙星研究进展[J].中国新药杂志,2005,14(9):1205-1207.

[2] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1993: 556-557,562-564.

[3] 徐叔云.药理实验方法学[M].2版.北京:人民卫生出版社,1991: 712-712.

Pharmacokinetics Comparison Between Amoxicillin Dispersible Tablets and Balofloxacin Tablets and Balofloxacin tablets in Healthy Volunteers

Zhao Yumei Jia Tianhua Zhu Renying Yin Songhe

Ob jective To develop a HPLC method for determ ination of balo floxacin in human plasma and com pare the pharmacokinetics of balofloxacin dispersible tab lets and ba lo floxacin tablets in healthy volunteers.MethodsTwe lve hea lthy m ale volunteers were selected and divided into two groups,who

a single oral dose of 10 m g balofloxacin sustained release tablets and balofloxacin tablets respectively.The p lasma concentrations of balofloxacin were determ ined by HPLCResu ltsBalofloxacin dispersible tablets and balofloxacin tab lets in the main pharm acokinetic parameters of Cmaxwere(93±2.4)μg/L and (89±3.1)μg/L,Tmaxwere (1.30±0.21)h and (1.80±0.11)h, t1/2were(4.68±1.65)h and (4.85±1.42)h,AUC0∞) were (953±27.8)μg/(μg/l) and (836±30.1)μg/(μg/l), AUC01were (856 ±24.2)μg/(μg/l) and (735±32.5)μg/(μg/l).Conc lusionBalofloxacin dispersible tab lets Tmax,t1/2is less than common tablets, AUC0∞, Cmaxhigher than ordinary tablets, indicate that it has certain advantages of quick release balofloxacin dispersib le tablets,significantly better than the ordinary tab lets.

Balofloxacin;Dispersibletablets;Plasmadrug concentration;Pharmacokineticd

R969.1

A

1673-5846(2014)05-0214-03

1黑龙江省牡丹江医学院红旗医院，黑龙江牡丹江 157011

2牡丹江市食品药品检验检测中心，黑龙江牡丹江 157011

黑龙江省卫生厅科研课题（2011-305）