GC—FPD测定茄子、西红柿、辣椒中甲基毒死蜱残留量

武中平　卢剑

摘要：采用气相色谱-火焰光度法测定了茄子、番茄、辣椒中甲基毒死蜱残留量。测定取得满意的结果，该方法平均加标回收率为81.8%～98.1%，相对标准偏差为3.2%～8.3%，检出限为0.01 mg/kg。

关键词：茄果类蔬菜；甲基毒死蜱；残留量；气相色谱-火焰光度检测法

中图分类号： S481+.8 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2014）04-0260-02

收稿日期：2013-08-13

基金项目：江苏省地方标准制定项目（编号：苏质技监标发[2006]171 号文）。

作者简介：武中平（1974—），男，湖南常德人，硕士，高级工程师，主要从事食品相关产品检验技术研究。Tel：（025）84470314；E-mail：jszj_wzp@139.com。甲基毒死蜱是一种硫代磷酸酯类杀虫剂，具有触杀、胃毒和熏蒸作用，主要用于防治各种叶类作物上和贮藏谷物中的害虫，也可用于防治蚊、蝇等卫生害虫，应用较为广泛。

甲基毒死蜱主要是通过抑制昆虫体内乙酰胆碱酯酶的活性而导致神经信号传导阻滞，进一步引起昆虫死亡。有研究表明，甲基毒死蜱对人红细胞膜乙酰胆碱酯酶也有明显抑制作用[1-2]。鉴于此，不少国家和组织，如中国、日本、欧盟都制定了部分农产品中甲基毒死蜱的最大残留限量，中国规定甲基毒死蜱残留量大白菜≤0.1 mg/kg、结球甘蓝≤0.1 mg/kg、韭菜和其他叶菜类蔬菜≤0.5 mg/kg；日本规定大白菜≤0.1 mg/kg、番茄≤0.5 mg/kg；欧盟规定大米≤0.01 mg/kg、蔬菜、甜菜≤0.03 mg/kg。另外，欧盟经过严格的安全评价，准备将茄子上甲基毒死蜱的允许残留量定为1.0 mg/kg[3]。

目前，已有不少研究者对水体、土壤、粮食作物、甘蓝、茶叶、果汁、水果等基质中甲基毒死蜱残留量的测定进行了研究，建立了高效液相色谱[4]、超高效液相色谱串联质谱[5]、气相色谱-电子捕获[6-7]、气相色谱-火焰光度[8-11]、气相色谱质谱[12-14]等测定方法。但茄子、番茄、辣椒等茄果类蔬菜中甲基毒死蜱残留量的测定还鲜有报道[15]。本试验重点研究样品前处理方法和色谱操作条件，为建立茄果类蔬菜中甲基毒死蜱残留检测方法与标准提供参考。

1材料与方法

1.1供试材料与试剂

茄子、番茄、辣椒购于超市。乙腈，色谱纯；丙酮，分析纯，使用前重蒸；氯化钠，优级纯；无水硫酸钠，分析纯，在 650 ℃ 灼烧4 h，贮于干燥器中，冷却后备用；磷酸三苯酯，分析纯；甲基毒死蜱标准物质，纯度≥99%，由中国计量科学研究院提供。甲基毒死蜱标准溶液：称取甲基毒死蜱标准物质0025 g（精确至 0.000 2 g）于25 mL容量瓶中，加丙酮超声振荡溶解，并定容至刻度，摇匀，配制成标准溶液。磷酸三苯酯丙酮溶液：称取磷酸三苯酯0.025 g（精确至 0.000 2 g）于25 mL容量瓶中，加丙酮超声振荡溶解，并定容至刻度，摇匀，配制成磷酸三苯酯丙酮储备溶液。根据需要将磷酸三苯酯丙酮储备溶液稀释成磷酸三苯酯丙酮溶液。

1.2仪器与设备

6890N气相色谱仪配火焰光度检测器（FPD）、化学工作站（美国Agilent公司）；氮吹仪（美国Organomation Associates公司）；分析天平：感量为0.000 1 g和0.01 g；超声波清洗器；组织捣碎机。

1.3试验方法

1.3.1样品制备、提取取擦干净（不可水洗）的茄子、番茄、辣椒的可食部分，将其切成约2 cm×2 cm的小块，取小块样品 500 g，用组织捣碎机捣碎并混合均匀，装入洁净的容器内作为试样，密封并标记。将试样置于-18 ℃ 避光保存。称取 25 g 试样（精确至 0.02 g）于100 mL锥形瓶Ⅰ中，向锥形瓶Ⅰ中加入50 mL乙腈，置于超声波清洗器中超声提取 20 min，过滤，将滤液转移到100 mL具塞量筒中（预装5 g氯化钠），剧烈振荡 3 min，静置30 min。准确移取10 mL上层清液，使之通过装有2 cm厚的无水硫酸钠层的滤纸进入 100 mL 锥形瓶Ⅱ，用5 mL乙腈洗涤无水硫酸钠层，收集、合并乙腈于锥形瓶Ⅱ，于65 ℃水浴中氮气吹干，用 1 mL 磷酸三苯酯丙酮溶液溶解残渣，超声1 min，用有机滤膜过滤，供气相色谱测定。

1.3.2气相色谱分析条件色谱柱：DB-35ms石英毛细管色谱柱，30 m×0.25 mm×0.25 m；柱温：起始150 ℃，保持 2 min，以10 ℃/min升温速率升至250 ℃，再以30 ℃/min升温速率升至280 ℃，保持5 min；进样口温度：220 ℃；检测器温度：250 ℃；载气：氮气，纯度99.999%，柱流速 1.2 mL/min；氢气，流速75 mL/min；空气，流速100 mL/min；进样方式：不分流进样；进样量：1.0 L。在上述条件下，甲基毒死蜱标准溶液的气相色谱图如图1所示。由图1可见，甲基毒死蜱保留时间为10.71 min，磷酸三苯酯保留时间为 16.362 min。

1.3.3标准溶液的配制甲基毒死蜱标准工作溶液：准确移取适当体积的标准溶液于25 mL容量瓶中，加磷酸三苯酯丙酮溶液，定容至刻度，超声振荡，配制成浓度分别为0.16、080、8.00、20.00、100.00 mg/L甲基毒死蜱的标准工作溶液。

2结果与讨论

2.1样品前处理

对于蔬菜、水果中甲基毒死蜱的提取，一般选用乙腈、甲醇、丙酮等有机溶剂作为提取溶剂。在本试验中，分别用乙腈和甲醇对匀浆后茄果类蔬菜样品进行提取。发现用乙腈提取时，振荡后分层明显，而用甲醇提取时，分层不明显，同时上清液较浑浊。分层效果明显，有利于回收率的提高，上清液透明有利于提取液的后处理。因此，本试验选用乙腈为茄果类蔬菜中甲基毒死蜱的提取溶剂。endprint

从各种基体中提取化学物质时，超声波是常用的辅助手段。本试验在同一茄子空白样品中，加入相同量的甲基毒死蜱标准物质，加入相同体积的乙腈作为提取溶剂，对最佳的超声萃取时间进行试验。试验结果显示，超声萃取时间在 20 min 时，甲基毒死蜱的检出量达到最大，之后增加超声萃取时间，甲基毒死蜱检出量并没有明显增加，结果见表1。因此，本试验确定对茄果类蔬菜中甲基毒死蜱的超声萃取时间为20 min。

2.2色谱条件

用气相色谱对甲基毒死蜱进行分析时，可选用火焰光度检测器、电子捕获检测器和氮磷检测器。在本试验中，选用火焰光度检测器进行测定，原因在于火焰光度检测器对样品前处理的要求较低，能满足样品快速测定的要求，同时火焰光度检测器属于选择性检测器，对有机磷农药的最小检出量达10-11 g。在本试验中，选用DB-35ms对茄果类蔬菜中甲基毒死蜱农药进行测定，主要是考虑柱流失较低，同时能承受较高的柱温，减少高沸点物质对色谱柱、检测器的污染。

2.3线性范围和方法检出限

在“1.3.2”的条件下对浓度分别为0.16、0.80、8.00、2000、100.00 mg/L的甲基毒死蜱标准工作溶液分别进行测定。以浓度（x）-峰面积（y）求出线性方程：y=238.202 687x-10.367 22，相关系数为0.999 97。

本试验对甲基毒死蜱在茄子、番茄、辣椒中的检测限进行了测定，其中在辣椒中检测限的气相色谱测定谱图见图2。按3倍噪声水平，得到气相色谱检测限为0.01 mg/kg。

2.4平均回收率及精密度

在空白茄子、番茄、辣椒（25 g样品）中进行甲基毒死蜱的添加回收率试验。共设3个添加水平，分别是0.01、005、0.25 mg/kg，同一添加水平在同一样品上重复6次，按照“1.3.1”前处理方法处理之后，在“1.3.2”条件下测定，计算回收率和变异系数，结果见表2。

3结语

本试验采用气相色谱测定茄果类蔬菜（茄子、番茄、辣椒）中甲基毒死蜱的残留量。该方法简便、快速、可操作性很强，准确度、精密度和灵敏度等指标均令人满意。本测定方法的建立为茄果类蔬菜中甲基毒死蜱残留的标准化检测提供了技术参考。

参考文献：

[1]李龙，宋瑞琨，刘毓谷.甲基毒死蜱的代谢转化机制研究[J]. 中国公共卫生，2002，18（10）：1185-1186.

[2]朱砂，邹俊，罗运达，等. 甲基毒死蜱对红细胞膜乙酰胆碱酯酶的抑制作用及其与膜脂相互关系[J]. 生物化学杂志，1993，9（5）：569-573.

[3]EC.No 396/2005 European parliament and of the council to establish Annex I listing the food and feed products to which maximum levels for pesticide residues apply[S/OL]. [2013-07-20]. http：//bbs.instrument.com.cn/shtml/20110615/3364411/.

[4]张超，杨红. 水、土壤和蔬菜中毒死蜱、甲基毒死蜱残留检测前处理方法[J]. 农药，2010，49（5）：367-370.

[5]刘辉，汪霞，何艺梅，等. 水果、蔬菜中11种有机磷农药残留的快速测定[J]. 中国卫生检验杂志，2009（10）：2314-2316.

[6]孙大利，胡琼波，杨峰，等. 分散固相萃取-气相色谱法测定水果中9种农药残留[J]. 华南农业大学学报，2011，32（2）：44-47.

[7]张霞，曹艳平，季萍.水中毒死蜱和甲基毒死蜱的GC-ECD测定方法[J]. 中国卫生检验杂志，2010（7）：1656-1657，1659.

[8]范志先，朱杰丽，许允成，等. 甲基毒死蜱在甘蓝及土壤上的残留动态研究[J]. 农业环境科学学报，2003，22（2）：235-237.

[9]侯志广，王秀梅，范志先，等. 甲基毒死蜱在甘蓝及土壤上的残留动态研究[J]. 吉林农业大学学报，2005，27（6）：654-657.

[10]张敬平，刘文卫，周闰，等. 气相色谱法同时检测生活饮用水中的27种有机磷农药残留[J]. 中国卫生检验杂志，2010（3）：527-528.

[11]高巍，卢剑，武中平，等. 气相色谱双柱法测定果汁中多种有机磷类农药残留量[J]. 食品科学，2010，31（4）：190-193.

[12]朱杰丽，范志先，沈翠丽，等. 气质联用法测定甲基毒死蜱的水解速率[J]. 青岛科技大学学报：自然科学版，2008，29（3）：210-212.

[13]陈红平，刘新，汪庆华，等. 气相色谱-串联质谱法测定茶叶中88种农药残留量[J]. 色谱，2011，29（5）：409-416.

[14]SN/T 2324—2009进出口食品中抑草磷、毒死蜱、甲基毒死蜱等33种有机磷农药残留量的检测方法[S].

[15]张征，武中平.番茄、辣椒、茄子中甲基毒死蜱残留量测定[J]. 食品科学，2011，32（22）：257-259.endprint

从各种基体中提取化学物质时，超声波是常用的辅助手段。本试验在同一茄子空白样品中，加入相同量的甲基毒死蜱标准物质，加入相同体积的乙腈作为提取溶剂，对最佳的超声萃取时间进行试验。试验结果显示，超声萃取时间在 20 min 时，甲基毒死蜱的检出量达到最大，之后增加超声萃取时间，甲基毒死蜱检出量并没有明显增加，结果见表1。因此，本试验确定对茄果类蔬菜中甲基毒死蜱的超声萃取时间为20 min。

2.2色谱条件

用气相色谱对甲基毒死蜱进行分析时，可选用火焰光度检测器、电子捕获检测器和氮磷检测器。在本试验中，选用火焰光度检测器进行测定，原因在于火焰光度检测器对样品前处理的要求较低，能满足样品快速测定的要求，同时火焰光度检测器属于选择性检测器，对有机磷农药的最小检出量达10-11 g。在本试验中，选用DB-35ms对茄果类蔬菜中甲基毒死蜱农药进行测定，主要是考虑柱流失较低，同时能承受较高的柱温，减少高沸点物质对色谱柱、检测器的污染。

2.3线性范围和方法检出限

在“1.3.2”的条件下对浓度分别为0.16、0.80、8.00、2000、100.00 mg/L的甲基毒死蜱标准工作溶液分别进行测定。以浓度（x）-峰面积（y）求出线性方程：y=238.202 687x-10.367 22，相关系数为0.999 97。

本试验对甲基毒死蜱在茄子、番茄、辣椒中的检测限进行了测定，其中在辣椒中检测限的气相色谱测定谱图见图2。按3倍噪声水平，得到气相色谱检测限为0.01 mg/kg。

2.4平均回收率及精密度

在空白茄子、番茄、辣椒（25 g样品）中进行甲基毒死蜱的添加回收率试验。共设3个添加水平，分别是0.01、005、0.25 mg/kg，同一添加水平在同一样品上重复6次，按照“1.3.1”前处理方法处理之后，在“1.3.2”条件下测定，计算回收率和变异系数，结果见表2。

3结语

本试验采用气相色谱测定茄果类蔬菜（茄子、番茄、辣椒）中甲基毒死蜱的残留量。该方法简便、快速、可操作性很强，准确度、精密度和灵敏度等指标均令人满意。本测定方法的建立为茄果类蔬菜中甲基毒死蜱残留的标准化检测提供了技术参考。

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从各种基体中提取化学物质时，超声波是常用的辅助手段。本试验在同一茄子空白样品中，加入相同量的甲基毒死蜱标准物质，加入相同体积的乙腈作为提取溶剂，对最佳的超声萃取时间进行试验。试验结果显示，超声萃取时间在 20 min 时，甲基毒死蜱的检出量达到最大，之后增加超声萃取时间，甲基毒死蜱检出量并没有明显增加，结果见表1。因此，本试验确定对茄果类蔬菜中甲基毒死蜱的超声萃取时间为20 min。

2.2色谱条件

用气相色谱对甲基毒死蜱进行分析时，可选用火焰光度检测器、电子捕获检测器和氮磷检测器。在本试验中，选用火焰光度检测器进行测定，原因在于火焰光度检测器对样品前处理的要求较低，能满足样品快速测定的要求，同时火焰光度检测器属于选择性检测器，对有机磷农药的最小检出量达10-11 g。在本试验中，选用DB-35ms对茄果类蔬菜中甲基毒死蜱农药进行测定，主要是考虑柱流失较低，同时能承受较高的柱温，减少高沸点物质对色谱柱、检测器的污染。

2.3线性范围和方法检出限

在“1.3.2”的条件下对浓度分别为0.16、0.80、8.00、2000、100.00 mg/L的甲基毒死蜱标准工作溶液分别进行测定。以浓度（x）-峰面积（y）求出线性方程：y=238.202 687x-10.367 22，相关系数为0.999 97。

本试验对甲基毒死蜱在茄子、番茄、辣椒中的检测限进行了测定，其中在辣椒中检测限的气相色谱测定谱图见图2。按3倍噪声水平，得到气相色谱检测限为0.01 mg/kg。

2.4平均回收率及精密度

在空白茄子、番茄、辣椒（25 g样品）中进行甲基毒死蜱的添加回收率试验。共设3个添加水平，分别是0.01、005、0.25 mg/kg，同一添加水平在同一样品上重复6次，按照“1.3.1”前处理方法处理之后，在“1.3.2”条件下测定，计算回收率和变异系数，结果见表2。

3结语

本试验采用气相色谱测定茄果类蔬菜（茄子、番茄、辣椒）中甲基毒死蜱的残留量。该方法简便、快速、可操作性很强，准确度、精密度和灵敏度等指标均令人满意。本测定方法的建立为茄果类蔬菜中甲基毒死蜱残留的标准化检测提供了技术参考。

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