CIKCIK细胞对化疗后晚期非小细胞肺癌的临床疗效评估

王秀文，易基群，梁继珍

临床研究

CIKCIK细胞对化疗后晚期非小细胞肺癌的临床疗效评估

王秀文，易基群，梁继珍

广州市红十字会医院肿瘤科，广东广州510220

目的探观察化疗后晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者给予细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokineinduced killer cells,CIK）治疗后免疫功能及生活质量变化，探讨CIK细胞治疗晚期肺癌的近期疗效及安全性。方法收集化疗后晚期NSCLC患者61例，选取同期最佳支持治疗的61例化疗后晚期NSCLC患者作为对照组，比较CIK细胞治疗后外周血T淋巴细胞亚群、KPS评分、近期疗效及评估安全性。结果CIK治疗组患者外周血CD3+、CD3+/CD4+细胞比率较治疗前显著上升（P＜0.05），对照组T淋巴细胞亚群没有变化。CIK细胞治疗后患者KPS评分为67.27±8.94，较治疗前显著提高（P＜0.05）。CIK治疗组疾病控制率为85.25％，显著高于对照组的59.01％（P＜0.05）。CIK治疗组中出现4例一过性发热和3例皮疹患者，未见其他明显毒副作用。结论CIK治疗化疗后晚期非小细胞肺癌患者，改善免疫功能及生活质量，提高近期疾病控制率，安全性好。

细胞因子诱导的杀伤细胞；非小细胞肺癌；免疫系统；生活质量；疗效

肺癌的发病率和病死率均居各类恶性肿瘤之首，且仍呈持续上升趋势［1］，非小细胞肺癌约占肺癌的80％，65％~75％肺癌患者确诊时已为ⅢB~Ⅳ期，全身化疗是晚期NSCLC的主要治疗手段。目前化放疗在一定程度上能杀灭绝大多数的肿瘤细胞，但是由于其严重的毒副反应、晚期肿瘤患者机体免疫力低下等因素，导致化疗方案的实施和获益受到极大的限制［2］。CIK免疫细胞治疗已逐步在临床上应用，它作为继手术、化疗、放疗等传统疗法之后的新治疗手段，在肿瘤的治疗中发挥着重要的作用。与传统化疗不同，抗肿瘤细胞免疫治疗对患者没有明显的毒副反应，且患者耐受性更好，生活质量明显提高。本研究对化疗后的晚期NSCLC进行CIK细胞治疗研究，探讨CIK细胞治疗对化疗后晚期NSCLC患者免疫功能、疗效及安全性的作用及影响。

1 材料与方法

1.1 临床资料

本研究选取我院肿瘤科2010年9月~2013年9月收治的化疗后接受CIK治疗的晚期非小细胞肺癌患者61例作为实验组，选取同期化疗后对症随访的晚期非小细胞肺癌患者61例作为对照组。实验组61例均为ⅢB~Ⅳ期患者，男患35例，女患26例，平均年龄56.42岁，ⅢB期患者19例，Ⅳ期患者42例。对照组61例均ⅢB~Ⅳ期患者，男患37例，女患24例，平均年龄55.78岁，ⅢB期患者24例，Ⅳ期患者37例。经比较，两组患者在年龄、性别、疾病分期以及病理类型等一般资料差异无显著，P>0.05。患者均经组织病理学确诊肺癌，KPS评分≥50，预计生存期>3个月，治疗前血常规、心电图正常，肝肾功能各指标正常。本临床应用程序均经医院伦理委员会审查批准，接受生物治疗患者均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 CIK细胞的制备及回输CIK组患者于清晨空腹状态下抽取患者外周血50 ml，肝素抗凝，在符合cGMP标准的实验室，用Ficoll淋巴细胞分离液分离并收集单个核细胞。用自体血清培养基培养，加入IFN-γ 1000 U/ml，置于37℃、5％CO2孵箱中培养，24 h后加入IL-2 1000 U/ml和抗CD3单抗50~100 ng/ml。此后每2~3天更换培养液并补加IL-2。培养至第8天时取部分细胞进行细菌及霉菌检测，如结果阴性则继续培养。第13天检测细胞杀伤活性，用台盼蓝染色计数，总数达2×109以上后收集细胞，悬浮于1％白蛋白生理盐水中，分5次于培养的第15、17、19、21、23天回输给患者，回输第1天起每日皮下注射rhIL-2增强CIK细胞活性。对照组患者在化疗后给予一般对症支持治疗。每例患者治疗1个疗程，每疗程回输细胞总数>1×1010。

1.2.2 观察指标

1.2.2.1 检测外周血T淋巴细胞表型化疗结束后2周及CIK治疗完成后2周采集患者外周血2 ml，Ficoll密度梯度离心法分离淋巴细胞，流式细胞仪检测T细胞亚群变化。

1.2.2.2 生活质量评估以Karnofsky为标准比较化疗后2周与CIK细胞免疫治疗后2周患者的生活质量。

1.2.2.3 评价近期疗效61例患者均可评价疗效，按RECIST评价标准在患者1周期治疗后通过CT、MRI、PET-CT等检查进行疗效评价。

1.3 统计学分析

本研究所得数据全部采用SPSS13.0进行数据分析，一般资料采取均数±标准差的表现形式，组间比较采用t检验，两组间率的比较采用卡方检验，P＜0.05为差异显著。

2 结果

2.1 外周血淋巴细胞亚群的变化

所有患者均完成1个疗程的CIK细胞输注，每次细胞回输数量在2.0×109以上。CIK细胞干预治疗后患者CD3+、CD3+/CD4+细胞亚群比率提高，存在统计学差异（P＜0.05），CD3+/CD8+细胞亚群在CIK治疗后提高，但未出现统计学差异，可能与样本量小、追踪时间短有关。对症治疗组CD3+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+细胞亚群百分数均未增加。说明CIK治疗对化疗后晚期非小细胞患者外周血CD3+、CD3+/CD4+细胞亚群显著增加作用，CD3+/CD8+有上升趋势，其升高作用优于一般对症治疗（表1）。

表1 61例患者治疗前后外周血T细胞表型变化Tab.1Changes of T-cell phenotype in peripheral blood of 61 patients after CIK cells treatment(％,x±s,n=61)

2.2 CIK治疗前后肺癌患者生活质量变化

CIK治疗前后61例肺癌患者的KPS评分为60.87±6.93和67.27±8.94，差异有统计学意义（P＜0.05），CIK治疗后患者体力状况改善，生存质量提高；而对照组的61例患者治疗前后的KPS评分为60.41±8.55和61.34±7.65，无统计学差异。本结果说明CIK治疗能够明显改善化疗后晚期肺癌患者的生活质量（表2）。

表2 CIK细胞治疗前后Karnofsky评分Tab.2 The Karnofsky score of 61 patients before and after CIK cells treatment(x±s,n=61)

2.3 近期疗效评价

CIK细胞治疗结束后经影像学评价，CIK治疗组完全缓解3例，16例部分缓解，33例稳定，客观缓解为31.15％，对症治疗组是27.87％，无显著差异。但CIK治疗组疾病控制率较对照组明显提高（85.25％vs59.01％，P＜0.05），存在显著性差异。提示CIK细胞治疗可有效控制化疗后晚期非小细胞肺癌进一步生长，多数接受CIK治疗的患者疾病维持稳定(表3)。

表3 近期疗效评价Tab.3 Short term evaluation of therapeutic effects(x±s,n=61)

2.4 CIK细胞治疗的安全性评价

CIK细胞回输过程中及回输后最常见的不良反应为发热，共4例，低热为主，均为一过性，自行缓解或对症处理后缓解，未出现高热、寒战。3例出现皮疹、乏力等症状，未予处理自行缓解。未出现明显肝肾功能异常、骨髓抑制等不良反应。

3 讨论

目前中国乃至全球肺癌的发病率不断上升，在我国位于各癌症之首。由于大多数肺癌患者就诊时已是晚期，联合含铂类药物的化疗方案或配合局部放疗是晚期NSCLC的主要治疗手段［3］。化疗可使晚期肺癌患者CD3+、CD4+T细胞比例下降，免疫功能降低［4］。CIK细胞治疗是近年发展起来的肿瘤过继免疫治疗的全新策略［5］，近几年的相关文献报道，CIK治疗在各种癌症中的应用均取得了一定的疗效，特别是在肾细胞癌、胃癌以及非小细胞肺癌［6］。CIK细胞能调节和增强患者自身免疫功能，抑制肿瘤生长和清除残留微小病灶的作用，可以有效提高肿瘤的生存率和治愈率，防止肿瘤复发、转移［7］。本研究将CIK细胞作为化疗后维持治疗的手段，观察其治疗晚期非小细胞肺癌患者前后免疫系统的变化规律，分析其对患者生活治疗和近期疗效的影响，并评估其安全性。

本研究显示化疗后晚期非小细胞肺癌经CIK细胞治疗后，CD3+、CD3+/CD4+细胞亚群百分率明显升高，外周血T细胞亚群发生变化，与治疗前比较差异有统计学意义，对症治疗组无显著改变，表明患者治疗后免疫功能得到改善。杨志银等［8］亦报道了CIK治疗干预后T淋巴细胞亚群百分数的显著提高，与本研究结果一致。同时在本研究中61例肺癌患者CIK治疗后的KPS评分较治疗前也有显著提高，表明CIK治疗明显改善患者的生活质量，是CIK治疗的优势所在。在疗效方面，本结果显示，CIK治疗组疾病控制率较对照组明显提高，多数接受CIK治疗的患者疾病维持稳定，罗虎等［9］亦报告CIK治疗显著提高肺癌患者治疗的有效率及疾病控制率。本研究中，CIK治疗组少数患者出现发热、皮疹等，均易缓解，未出现肝肾功能、骨髓抑制等不良反应，安全性高，耐受性好。

综上所述，CIK细胞治疗能够显著提高化疗后晚期非小细胞肺癌患者的免疫功能，改善患者生存质量，提高近期疾病控制率，安全性好，值得在临床中广泛推广。

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［8］杨志银,王燕.CIK维持治疗中晚期肺癌的临床观察及影响因素分析［J］.临床肺科杂志,2014，19(4):706-9．

［9］罗虎,宫亮,陈永峰,等.CIK维持治疗中晚期肺癌的临床观察及影响因素分析［J］.第三军医大学学报,20134 35(6):569-72.

The Study of Cytokine-induced Killer Cells Treating Patients with Advanced Non-small Cell Lung Cancer after Chemotherapy

Wang Xiuwen,Yi Jiqun,Liang Jizhen
Department of Medical Oncology,Guangzhou Red Cross Hospital,Guangzhou 510220,China

ObjectiveTo investigate the changes of immunity and life quality after the treatment of cytokine induced-killer cells （CIKs）for patients with advanced NSCLC after chemotherapy，and to assess the effectiveness and safety of CIKs treatment.MethodSixty-one patients with advanced NSCLC after chemotherapy treated with CIKs were enrolled as CIKs group，and another sixty-one post-chemotherapy patients of advanced NSCLC treated with optimal supportive care during the same period were enrolled as control group．Before and after CIK cells being transfused back,the changes of immune system including subsets of T cells，quality of life(Karnofsky score),therapeutic effects and side effects were compared between the two groups.ResultCompared with before CIK cells therapy,the ratios of CD3+and CD3+/CD4+T cells significantly increased (P＜0.05),while there was no significant change in the control group.KPS score significantly increased in the CIKs group, which was 67.27±8.94（P＜0.05）.The disease control rate(DCR)were 85.25％in the CIKs group，which was significantly higher than those in the control group(59.01％)（P＜0.05）．The major adverse events were transient fever and skin rash,and no other side effect was observed.ConclusionCIK cells treatment is safe and effective for advanced NSCLC patients.It can improve the immune imbalance,DCR and quality of life of the patients．

cytokine-induced killer cell;NSCLC;immunity;effectiveness;quality of life

2014-05-30

王秀文，研究生，主治医师，E-mail:wnwnwang@163.com