IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR在大肠癌中的表达及意义

张序朋，周风举，申兴斌

(承德医学院附属医院病理科，河北承德 06700)

大肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤，发病率、死亡率均很高，近年来还在迅速上升，其中主要是结肠癌发病增多[1-2]。大肠癌的发生、生长、浸润和转移是一个非常复杂的过程，涉及多种癌基因、抑癌基因和错配修复基因的参与，是遗传、环境、免疫和内分泌等多种因素共同作用的结果[3]。胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growth factor-Ⅱ，IGF-Ⅱ)可促进多种细胞增殖、抑制凋亡，其生物学活性主要通过胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(insulinlike growth factor-I receptor，IGF-IR)介 导[4]。IGF-IR是一种酪氨酸激酶(RTK)受体，与IGF结合后发挥介导细胞增殖、抑制细胞凋亡的作用[5]。有研究表明IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR的高表达及相互作用在细胞分化和瘤变方面具有重要作用，并且与肿瘤的侵袭性有关，过度表达IGF-ⅠR的癌细胞表现出强烈的转移趋势[6]。但IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR是否参与大肠癌的发生发展以及具体机制，目前尚不清楚。本研究采用Maxvision免疫组化法检测IGF-Ⅱ及其受体IGF-ⅠR在大肠癌中的表达情况，探讨二者在大肠癌发生发展中的作用和意义。

1 材料与方法

1.1 材料 承德医学院附属医院2012年1月-2012年12月经手术切除并经病理确诊、存档的大肠癌病例(CC)50例以及距离肿瘤＞10cm的癌旁正常大肠组织(NM)50例，男33例、女17例，年龄35-81岁，平均(58±5.4)岁，其中直肠肿瘤27例、结肠肿瘤23例。同期大肠腺瘤(Ad)患者20例，男11例、女9例，年龄31-62岁，平均(47±4.2)岁。全部标本经4%甲醛固定，常规石蜡包埋，5μm连续切片。所有病例均为首发病例，术前未经放疗、化疗和生物学治疗。

1.2 方法 采用免疫组织化学MaxVision法检测IGF-Ⅱ、IGF-IR的表达情况。兔抗IGF-Ⅱ(1:100)、IGFIR(1:100)抗体，武汉博士德生物工程有限公司;即用型MaxVision羊抗兔试剂盒、即用型DAB显色试剂盒，福州迈新生物技术开发有限公司。操作步骤按说明书进行，并设阳性对照和PBS液阴性对照。IGF-Ⅱ、IGF-ⅠR均以细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性细胞。

1.3 结果判定 每张切片随机选取5个高倍镜视野(×400)，记数300个肿瘤细胞，并采用Volm双评分法判定结果。双评分法:按阳性细胞百分率(A值)评分:＜5%为0分，5%-25%为1分，25%-50%为2分，＞50%为3分;按染色强度(B值)评分:不着色为0分，浅棕黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。以A值与B值的和判断结果，阴性(-):0分，弱阳性(+):1-2分，中度阳性(++):3-4分，强阳性(+++):5-6分。

1.4 统计分析 采用SPSS 17.0统计软件进行统计处理，等级数据采用秩和检验，相关性分析采用Spearman等级相关分析。

2 结果

2.1 不同大肠组织IGF-Ⅱ蛋白的表达情况 IGF-Ⅱ蛋白阳性表达主要位于细胞浆，为棕黄色颗粒。正常大肠黏膜IGF-Ⅱ表达较少，且为弱阳性;大肠癌组织IGF-Ⅱ蛋白的表达较强，染色颗粒粗大。大肠正常黏膜、腺瘤和大肠癌IGF-Ⅱ的阳性表达率逐渐升高，大肠癌、大肠腺瘤IGF-Ⅱ蛋白的表达水平明显高于大肠正常黏膜(P＜0.05)。见表1。

表1 不同大肠组织IGF-Ⅱ的表达情况

2.2 不同大肠组织IGF-IR蛋白的表达情况 IGF-IR蛋白阳性表达主要位于细胞浆和细胞膜。大肠正常黏膜、腺瘤和大肠癌IGF-IR的阳性表达率逐渐升高，且两两比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 不同大肠组织IGF-IR的表达情况

2.3 大肠癌组织IGF-Ⅱ与IGF-IR表达的相关性 大肠癌组织IGF-Ⅱ与IGF-ⅠR的表达呈正相关，随着大肠癌IGF-Ⅱ阳性表达的增强，IGF-ⅠR的表达逐渐升高(r=0.585，P＜0.01)。

3 讨论

研究发现，多种肿瘤如结肠癌、肝癌和胚源性肿瘤等均有IGF的异常激活和表达，说明IGF-Ⅱ过度表达可使细胞逃避凋亡，从而过度增殖形成肿瘤[7]。IGF-Ⅱ与IGFIR结合后，受体酪氨酸发生磷酸化，激活细胞内的磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)，通过一系列蛋白激酶的级联反应，促进细胞增殖和分化，进而参与多种肿瘤的发生发展[8-9]。

本研究发现，大肠癌IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR的表达明显高于正常大肠黏膜，且正常大肠黏膜、大肠腺瘤、大肠癌，IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR的表达逐渐升高;相关分析结果显示，大肠癌IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR的表达呈正相关。

Pavelic等[10]的研究发现，切断IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR mRNA的转录和蛋白的表达能有效减少肿瘤细胞的增长;动物实验也证实应用抗IGF-ⅠR单克隆抗体封闭IGF-ⅠR可以明显抑制肿瘤细胞的增殖和转移。本研究提示IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR与大肠癌的发生发展有关，并且二者具有协同作用。因此后续的研究将探讨，降低IGF-Ⅱ和IGF-ⅠR的表达、或者阻断IGF-Ⅱ与其受体IGF-ⅠR结合，是否对大肠癌的生长具有抑制作用，以期为大肠癌的靶向治疗和改善预后提供新思路。

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