丙种球蛋白对感染柯萨奇B3病毒小鼠 心肌的保护及心肌炎的治疗作用

付西蒙

【中图分类号】R542.2【文献标识码】B【文章编号】1672-8602(2014)04-0023-01

病毒性心肌炎发病过程免疫反应起了重要作用,近年国外在动物实验及临床上将人血静脉丙种球蛋白(IVIG) 用于该疾病的防治, 取得了较好的效果。我们探讨了不同剂量的国产IVIG对小鼠感染柯萨 奇B3病毒(CVB3)后心肌的保护作用及治疗效果。

1材料及方法

实验选用156只雄性、4～5周龄、体重13～15 g的Balb/ c小鼠,随机分为IV I G保护组80只及治疗组76只。每只小鼠均腹腔注射含5×105TCID50的CVB30. 1 ml。IV I G保护组分别按IV I G用量,分为200 mg•kg-1•d-1组、500 mg•kg-1•d-1组、1g•kg-1•d-1组及对照组4个组每组各20只。CVB3 接种半小时后分别腹腔注射上述剂量的IV I G(成都生物制品所提供) ,对照组注射相应剂量的5 %葡萄糖,各7天。治療组则将接种CVB3 后存活到1周的60只小鼠分为剂量不同的3个用药组及对照组各15只,按上述剂量及方法治疗7天。两组动物均观察14天,记录发病及死亡情况。实验结束时处死存活动物,测体重、心脏重及心脏重/体重,取心脏做病理组织学检查,并用计算机图像分析对心肌病变定量评价。生存率分析用Log2rank 检验,体重、心脏重/体重用单因素方差分析,图像分析结果用t 检验。

2结果

(1) IV I G保护组中500 mg及1g组无发病症状,生存率100 %(20/ 20) ,镜检亦未见心肌炎病变发生; 200mg组少数动物出现发病症状,死亡1只,生存率95 % ,镜检有轻微心肌炎病变发生。对照组死亡7只,生存率为65 % ,心肌炎症呈弥漫性分布。3个剂量组生存率与对照相比差异有显著意义(x2=8. 64 ,P<0. 05) ,但3个剂量组之间却无明显差异(x2= 4. 18 ,P> 0. 05) 。3个组小鼠体重增加,心脏重/体重比值小于对照组( F=21. 44 ,P< 0. 05) ,而对照组体重不增,心脏重/体重比值增大。(2) IVIG治疗组生存率,200mg组为80 %(12/ 15) ,500 mg及1 g组均为93. 3 %(14/ 15) ,对照组为53. 3 %(8/ 15) 。治疗组生存率明显升高,但200mg组与对照相比差异无显著性。实验结束时200 mg治疗组虽然发病症状明显减轻,从87 %(13/15)降至33 %(4/ 12) ,但组织学病变与对照相比无差异; 500mg及1g组治疗后症状完全消失,病变明显减轻,病灶平均面积、病灶总面积/所测心肌总面积与对照组比较差异显著。但500mg与1g组间病变无显著差异。治疗组体重均有增加,心脏重/体重比值较小,但200mg组与对照组相比,上述两值无显著差异( q=3. 14 ,P> 0. 05) 。图像分析结果见附表。

3讨论

病毒性心肌炎的治疗,目前仍以对症支持疗法为主,针对其发病机理中有免疫反应参与,国外学者分别使用多克隆鼠免疫球蛋白及IVIG 进行试验,证实在病毒接种前及接种当时用药可抑制心肌炎发生,接种后1周用药可减轻炎症,提高生存率。临床应用中发现患儿血液动力学及一年生存率明显改善。在我们的实验中,进一步明确了不同剂量间的疗效差异,在小鼠感染CVB3 后立即用药3个剂量对动物均有明显保护作用。500mg及1g剂量组IVIG可完全抑制病毒在体内的复制,不发生心肌炎性病变。200mg剂量组仅个别小鼠有轻微炎症发生,但生存率与500mg及1g组相比差异无显著性。因此,在急性病毒血症期200mg剂量可基本抑制体内病毒的复制,保护绝大多数小鼠不发生心肌炎。IVIG的保护作用可能是通过其特异性中和抗体实现的。在感染CVB31周后用药,仍然可以使心肌炎症明显减轻,而此时实验动物体内的中和抗体滴度与对照无差异,提示IVIG对炎症及免疫反应有抑制作用。我们也证实了IVIG对心肌炎的疗效。除1g•kg-1•d-1剂量外,还选取了两个较小剂量,治疗后心肌病变、生存率及发病症状均有改善,但200mg组疗效与对照相比较差异无显著性。而500mg及1g组疗效明显,提示在中等剂量上仍可达到满意的效果。从上述结果看,国产IVIG对病毒性心肌炎有较好的防治效果,其适宜的治疗方案和安全性尚待临床进一步验证。

表1IV I G保护组及治疗组计算机图像分析结果组别 例数 病灶数病变面积

(mm2) 所测心肌总

面积(mm2)病变平均面积(mm2)t值 病变总面积

所测心肌总面积 10- 2 t 值保护及对照 200mg保护 20 11 0.19 137.21 0. 017 * 2.71 0. 14 ** 3. 86500mg保护 20 0 0 - 0 - 1g保护 20 0 0 - 0 - 对照组 20 147 15.63 132.61 0. 110 11. 79 治疗及对照 200mg治疗 15 98 8.78 131.55 0. 089△ 1.74 6. 68△ 1. 83500mg治疗 15 34 1.48 149.34 0. 044△△ 2.28 1. 00 ** 3.751g治疗 15 19 0.48 129.75 0. 026△△ 2.43 0. 37 ** 4. 03对照组 15 154 20.23 142.87 0. 130 14. 16 *P< 0 . 01 ,**P< 0 . 001 ,△P> 0 . 05 ,△△P< 0 .