猪瘟疫苗田间免疫效果监测

何长生，朱良强，占松鹤，王 军，沈 艳，刘 华，周迎春，陈 静

(安徽省动物疫病预防与控制中心，合肥230091)

猪瘟(Classical Swine Fever，CSF)是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus，CSFV)引起猪的一种高热稽留、出血和高病死率为特征的高度接触性传染病，严重危害全球养猪业，造成巨大的经济损失［1－2］。世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫病［3］，我国将其列为一类动物传染病。目前，猪瘟在50多个国家和地区都有不同程度的发生和流行［4－6］。

至今，对该病尚无有效的治疗药物，疫苗免疫是唯一有效预防该病的手段［7］。为有效防控猪瘟，我国将其列为强制免疫病种。生产中使用的猪瘟疫苗为均弱毒活疫苗，主要有两种:一种是细胞苗，另一种为脾淋组织苗。目前，这两种疫苗均在安徽省使用，且由不少于20个厂家提供疫苗。为准确掌握猪瘟疫苗免疫效果，给猪瘟防控工作提供依据和参考，2010年下半年至2012年上半年，对投放安徽省的猪瘟疫苗田间免疫效果进行了监测，现报道如下:

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清来源 2010年下半年至2012年上半年全国重大动物疫病集中强制免疫期间，委托安徽省县级动物疫控机构，采集免疫猪瘟细胞苗或猪瘟脾淋组织苗后1个月左右的猪血清，每个猪场按5%比例随机采集，共采集了454个猪场的7439份血清。其中，种猪血清1375份，商品猪血清6064份。

1.1.2 检测试剂 猪瘟病毒抗体阻断ELISA检测试剂盒，购自美国IDEXX公司，批号有:43200－V731、43220 －X561、43220 －X681、43220 －2431、43220 －2551、43220 －2571、43220 －2821。

1.1.3 疫苗 猪瘟细胞苗和猪瘟脾淋组织苗，主要由南京、成都、广西等20家国内猪瘟疫苗厂家生产，田间使用按照产品说明书进行。

1.2 方法 采用ELISA检测试剂盒对不同厂家生产的猪瘟疫苗对规模场和散养户饲养的种猪及商品猪的免疫效果进行了监测和比较。

1.2.1 检测方法 按照猪瘟病毒抗体阻断ELISA检测试剂盒说明书进行。

1.2.2 判定标准 样品的阴阳性按照试剂盒说明书进行。样品阻断率=(阴性对照平均OD450值－样品OD450值)/阴性对照平均OD450值×100%。阻断率大于或等于40%，为阳性样品;阻断率小于或等于30%，为阴性样品;样品阻断率在30% ～40%之间，为可疑样品。

1.2.3 统计方法 采用卡方检验(χ2)。

2 结果

2.1 种猪和商品猪猪瘟免疫效果 共检测了1375份种猪血清、6064份商品猪血清，结果见表1。

表1 不同类型猪群使用猪瘟疫苗免疫效果

可以看出:(1)种猪和商品猪的猪瘟免疫抗体合格率分别为80.07%和74.11%，达到了农业部免疫抗体合格率不低于70%的要求，两者之间差异不显著(P＞0.05);(2)种猪的脾淋组织苗和细胞苗的免疫抗体合格率分别为77.39%和92.59%，差异不显著(P＞0.05);(3)商品猪的脾淋组织苗和细胞苗的免疫抗体合格率分别为76.05%和66.87%，差异极其显著(P＜0.01)。

由此可见，种猪和商品猪的猪瘟免疫效果总体良好，种猪的脾淋组织苗和细胞苗免疫效果相当，商品猪的脾淋组织苗免疫效果显著好于细胞苗。

2.2 不同饲养方式猪瘟免疫效果 共检测了6371份规模场猪血清、1068份散养户猪血清，结果见表2。

表2 不同饲养方式的猪群使用猪瘟疫苗免疫效果

可以看出:(1)规模场和散养户猪瘟免疫抗体合格率分别为75.37%和74.25%，达到了农业部免疫抗体合格率不低于70%的要求，两者之间差异不显著(P＞0.05);(2)规模场脾淋组织苗和细胞苗的免疫抗体合格分别为76.93%和69.82%，差异显著(P＜0.05);(2)散养户脾淋组织苗和细胞苗的免疫抗体合格率分别为73.00%和83.21%，差异不显著(P ＞0.05)。

由此可见，规模场和散养户猪瘟免疫效果均较好，规模场的脾淋组织苗免疫效果明显好于细胞苗，散养户的脾淋组织苗和细胞苗免疫效果相当。

2.3 不同年份监测的猪瘟免疫效果 共检测了5913份免疫脾淋组织苗猪血清、1526份免疫细胞苗血清，结果见表3。

表3 不同年份监测的猪瘟免疫效果

可以看出:(1)脾淋组织苗和细胞苗总体抗体合格率分别为76.31%和70.97%，达到了农业部免疫抗体合格率不低于70%的要求，两者之间差异不显著(P＞0.05)。2010年和2012年，脾淋组织苗和细胞苗差异不显著(P＞0.05);2011年，脾淋组织苗和细胞苗差异极其显著(P＜0.01)。(2)脾淋组织苗总体免疫合格率为76.31%。2010、2011、2012年的抗体合格率分别为79.09%、74.70%和79.45%，差异不显著(P ＞0.05)。(3)细胞苗总体抗体合格率为70.97%。2010、2011、2012 年的抗体合格率分别为 80.60%、39.47%和 75.28%，2010与2012差异不显著(P＞0.05)，2011年与其余两年相比，差异极其显著(P＜0.01)。

结果表明，脾淋组织苗和细胞苗免疫效果均较好，但不同年份，脾淋组织苗免疫效果较稳定，细胞苗免疫效果不太稳定。

2.4 不同厂家疫苗猪瘟免疫效果 选取了疫苗用量在我省较大的南京、成都、广西等地 A、B、C、D、E、F、G等6个厂的疫苗进行免疫效果监测，结果见表4。

可以看出:(1)A厂、E厂、F厂疫苗免疫效果最好，差异不明显(P＞0.05)，与 C厂、G厂相比，差异极其显著(P＜0.01)，与B厂、D厂相比，差异显著(P＜0.05);(2)G厂疫苗免疫效果较差，与B厂、D厂相比，差异显著(P＜0.05)，与C厂相比，差异不显著(P＞0.05);(3)B厂、C、厂、D厂疫苗免疫效果相当，差异不显著(P＞0.05)。

表4 不同厂家疫苗猪瘟疫苗免疫效果

结果表明，不同厂家疫苗质量存在差异，六个厂中，G厂疫苗免疫效果较差，其免疫抗体合格率仅为63.56%，达不到不低于70%的要求。

3 讨论

3.1 我省猪瘟疫苗免疫效果总体良好。从监测结果来看，无论是种猪还是商品猪，无论是规模场还是散养户，无论是种猪场还是商品猪场，猪瘟疫苗的免疫抗体合格率均超过了70%。说明近年来我省大力推行猪瘟疫苗强制免费免疫，提高猪群群体免疫力，已取得了一定的成效。

3.2 从本次监测结果来看，不同厂家疫苗的免疫效果有差异，少数厂家疫苗免疫效果达不到农业部要求。这可能与不同厂家疫苗毒株来源、生产工艺、疫苗抗原含量等因素有关。因此，相关部门要加强疫苗质量监管，从根本上杜绝劣、次、假疫苗流入市场。

3.3 从本次监测结果来看，猪瘟脾淋组织苗免疫效果要优于猪瘟细胞苗，这与曹世祯等［8］试验结果一致，可能与脾淋组织液中的确含有某些免疫增强因子，能够明显增强活疫苗的免疫作用有关［9］。但是，不同年份，猪瘟细胞苗的免疫效果波动性较大。经过分析，2011年之前(包括2011年)我省猪瘟细胞疫苗用量很小，2010年使用的疫苗主要是F厂的，2011年主要是G厂的，而F厂疫苗免疫效果较好，G厂疫苗的免疫效果较差，从而导致2011年猪瘟细胞疫苗免疫抗体合格率只有39.47%。可见加强疫苗质量的监管显得尤为重要。

3.4 部分猪场猪瘟免疫不到位。本次监测，虽然大多数猪场猪瘟疫苗免疫效果较好，但是仍有少部分猪场猪瘟免疫抗体水平达不到保护水平。推测其原因可能有以下几种:一是与猪群中广泛存在猪瘟病毒的持续感染，多病原感染、免疫抑制、母源抗体参差不齐等因素的存在，使常规免疫剂量和完全统一的免疫预防接种，很难达到有效控制猪瘟的目的;二是与疫苗的质量有关，有学者指出，当前我国猪瘟疫苗的生产主要存在两大问题，即疫苗中病毒含量低和疫苗污染问题［10］。同时，从本次监测结果来看，不同疫苗生产厂家，疫苗免疫效果参差不齐，而且细胞苗免疫效果不稳定;三是可能与疫苗接种技术和猪场管理有关，部分养殖场免疫程序不合理，农村散养户补免不及时，疫苗使用和保管不当、管理粗放等，往往导致抗体水平较低。因此，规模猪场应定期或不定期开展猪瘟免疫抗体水平监测，及时掌握猪群免疫水平，以利于猪瘟的防控。

［1］Jamin A，Gorin S，Cariolet R，et al.Classical swine fever virus induces activation of plasmacytoid and conventional dendritic cells in tonsil，blood and spleen of infected pigs［J］.Vet Res，2008，39(1):1－17.

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［7］蔡宝祥.家畜传染病学［M］.4版.北京:中国农业出版社，2001.

［8］曹世祯，孟晓琴，孙晓军，等.不同厂家生产的猪瘟疫苗免疫效果跟踪对比试验报告［J］.当代畜牧，2012，(8):55－57.

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［10］万遂如.关于猪瘟的净化问题［J］.养猪，2013，(4):97－99.