温通针法对慢性非细菌性前列腺炎大鼠IL-2、IL-6的影响*
2014-05-13赵耀东韩豆瑛
赵耀东,韩豆瑛
1甘肃中医学院,甘肃 兰州 730000;2甘肃省康复中心医院
温通针法对慢性非细菌性前列腺炎大鼠IL-2、IL-6的影响*
赵耀东1,韩豆瑛2
1甘肃中医学院,甘肃 兰州 730000;2甘肃省康复中心医院
目的:观察温通针法对慢性非细菌性前列腺炎大鼠血清IL-2、IL-6含量的影响,探讨温通针法治疗慢性非细菌性前列腺炎的作用机理。方法:将60只雄性W i st ar大鼠随机分为针刺组、药物组、模型组、空白组4组,每组15只。采用25%消痔灵注射液0.2 m L(每单侧叶注射0.1 m L)注入前列腺背侧叶的造模方法,造成CN BP的动物模型。针刺组采用温通针法治疗,药物组予前列康灌胃,均每日治疗1次,共30次,并观察各组大鼠血清中IL-2、IL-6的含量变化情况。结果:针刺组较药物组能明显降低大鼠血清中IL-2及IL-6水平(P<0.05)。结论:温通针法治疗慢性非细菌性前列腺炎的机理与降低IL-2、IL-6含量,调节机体免疫功能有关。
非细菌性前列腺炎,慢性;温通针法;IL-2;IL-6
慢性前列腺炎(c h r o n i cp r o s t a t i t i s,C P)是泌尿外科的常见病和多发病,我国约3 5%~4 0%3 5岁以上的男性患有此病,约5 0%的男性有过慢性前列腺炎的症状[1]。在C P中,慢性非细菌性前列腺炎(c h r o n i cn o n-b a c t e r i a lp r o s t a t i t i s,C N B P)发病率远高于细菌性前列腺炎,占发病总数的9 0%~9 5%。近年来C P发病率呈明显上升趋势,且发病年龄日趋年轻化[2]。通过多年的基础研究和临床实践,全国著名针灸专家郑魁山教授运用独创的“温通针法”治疗C N B P取得了满意效果,为进一步探讨该手法的独特性及其作用机理,现对其研究如下:
1 材料与方法
1.1 动物 W i s t a r大鼠,雄性,6 0只,体质量(2 0 0±2 0)g,3月龄,由甘肃中医学院科研实验中心提供,实验动物合格证号:S C X K(甘)2 0 1 1-0 0 0 1。
1.2 主要药品及试剂 前列康片(浙江康恩贝制药股份有限公司生产,0.5g/片,国药准字Z 3 3 0 2 0 3 0 3);消痔灵注射液[吉林省集安益盛药业股份有限公司生产,批号:Z Z-4 9 6 5-吉卫药准字(1 9 9 8)第4 0 0 3号]临用时用蒸馏水稀释成2 5%浓度;I L-2、I L-6放免试剂盒(中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所提供,批号:2 0 0 5 0 4 0 3、2 0 0 5 0 4 0 6)。
1.3 实验方法
1.3.1 动物分组 将6 0只大鼠按体质量编号,用随机数字表法随机分为空白组、模型组、药物组及针刺组4组,每组1 5只。
1.3.2 造模 实验动物购回后常规饲养1周以适应环境,参考张亚强[3]、雷久士等[4]的方法造模,除空白组外,其余3组大鼠称取其体质量后用异戊巴比妥钠(0.0 0 2 3 m L/g)麻醉,剪去大鼠下腹部毛,常规消毒,无菌条件下沿腹正中线切开皮肤,创口1.5c m左右,逐层剖开下腹壁,暴露膀胱,用特制不锈钢环状套圈套住膀胱,轻轻拉出,清楚暴露前列腺背侧叶,注入2 5%的消痔灵注射液0.2 m L(每单侧叶注射0.1 m L),取下套圈使膀胱复位,逐层关腹。术后大鼠腹腔注射庆大霉素0.1 m L/只以预防感染。空白组常规饲养。造模后各组大鼠精神状态较差,活动减少,食欲不佳,但均于术后第3天开始逐步恢复。连续观察9天,各组大鼠无1例死亡。伤口愈合良好,精神状态可,毛色润泽,食欲、二便无异常。于造模期结束即第9天,每组取2只处死,取前列腺组织做形态学观察,检测W B C数目和卵磷脂小体密度并做细菌培养,符合无菌性炎症改变,证明炎症模型成功。
1.3.3 治疗方法 针刺组选取关元、曲骨、行间等穴。取穴依据林文注主编《实验针灸学》[5],并参考人体有关穴位,依动物比较方法学而定。关元:脐下约2 5 m m处;曲骨:耻骨联合上缘中点处;行间:后肢趾背第一二趾缝间。造模后9天开始治疗,针刺组每天针刺1次,即穴位局部消毒后,进针得气即行温通针法[6]:左手加重力量,右手拇指向前连续捻按9次,针下沉紧后,针尖拉着感应的部位连续重插轻提9次,拇指再向前连续捻按9次,针尖顶着有感应的部位推弩守气,使针下继续沉紧,此时医者押手可明显感觉到经气冲动。每穴操作6 0秒,留针3 0分钟,每1 5分钟行针1次,然后慢慢将针拔去,按压针孔。药物组每次胃饲前列康混悬液(前列康片研末,加蒸馏水制成0.0 5 4 g/m L的混悬液)1 m L,1次/d。空白组每次胃饲蒸馏水1 m L,模型组经抓取、固定等同针刺组全过程,但不做治疗。
1.3.4 标本采集及检测 治疗3 0天,禁食不禁水2 4小时后杀检。血清标本制备:各组动物于末次针刺、给药2 4小时后,称取大鼠体质量后用异戊巴比妥钠(0.0 0 2 3 m L/g)麻醉,分离颈动脉取血5m L,3 7℃水中放置半小时,以35 0 0r/m i n离心1 5分钟,取上清液放入尖底试管中,置4℃冰箱内保存,待测。用放射免疫法测定血清I L-2、I L-6含量。
1.4 统计学方法 数据采用S P S S1 7.0统计软件处理,计量资料以(±s)表示,组间比较采用t检验,P<0.0 5为差异有统计学意义。
2 结果
各组大鼠血清I L-2、I L-6含量变化结果见表1。
表1 各组大鼠血清IL-2、IL-6含量变化情况(±s)
表1 各组大鼠血清IL-2、IL-6含量变化情况(±s)
注:与空白组比较,**表示P<0.01;与模型组比较,△表示P<0.05,△△表示P<0.01;与药物组比较,▲表示P<0.05。
组别 只数 IL-2/(ng·m L-1) IL-6/(ng·L-1)空白组 13 5.8912±1.1546 0.8584±0.2537模型组 13 7.6701±1.2529** 1.6585±0.4211**药物组 13 6.2680±0.9817△ 1.2490±0.4164△针刺组 13 6.2083±1.5098△△▲ 1.0815±0.2660△△▲
造模后模型组I L-2、I L-6水平与空白组相比显著增高(P<0.0 1);治疗后药物组和针刺组I L-2、I L-6含量较模型组显著降低(P<0.0 5),且针刺组与药物组在降低I L-2、I L-6水平方面相比有显著性差异(P<0.0 5),提示造模后细胞毒T细胞损伤靶细胞,机体产生免疫反应,I L-2水平随之升高;抗炎性细胞因子I L-6水平增高,使前列腺局部免疫细胞被激活,产生多种炎性介导的细胞因子及免疫性抗体,而温通针法的针刺组能显著改善机体的自身免疫反应,降低血清中的I L-2水平,提高机体免疫力,增强抗炎能力,使血清中I L-6水平显著降低,其效果优于药物组。
3 讨论
C N B P属中医“精浊”“白浊”“白淫”“淋浊”等范畴。本病的病因病机多为“本虚标实”“本虚为脾肾不足,标实指湿热瘀血、败精热结于精室而形成本虚标实、虚实夹杂之证”[7]。本虚的发生,一则“邪之所凑,其气必虚”;二则本病病程较长,湿热瘀血等邪气长期停留体内,会进一步耗伤机体正气。
现代医学研究证实,C N B P是由相关细胞因子和免疫炎性细胞介导的局部免疫反应[8]。I L-2是T辅助细胞(T h)分泌产生的一种前炎性细胞因子,其主要生物学活性是促进T细胞和自然杀伤细胞(N K)的增殖,促进B细胞分化、增殖及抗体生成,在C N B P时机体的免疫应答、免疫调节中具有重要作用;I L-6是重要的抗炎性细胞因子,能下调和抑制I L-1和γ干扰素(I F N-γ)等前炎性细胞因子合成和产生;I L-2和I L-6均参与C N B P的局部免疫反应。
本研究显示,温通针法较药物能更显著地降低大鼠血清I L-2和I L-6水平,其机理可能有以下几个方面:第一、从针刺手法方面看,由于本病病理因素中以正虚最为关键,因而扶正祛邪成为治疗本病的大法。故而运用全国著名针灸专家郑魁山教授的家传手法“温通针法”[9-10],温可温补脾肾,温通阳气,振奋和提高正气,通可疏通经络,行气和血,活血解毒,“温”对正虚,“通”对邪实,从而在最大范围和程度上调整了前列腺局部气血和免疫功能,起到了扶正祛邪的作用。第二、根据现代研究,温通针法针刺关元、曲骨等小腹部穴位,一可调节支配前列腺血液循环的腹壁浅动、静脉分支,髂总动、静脉及会阴动、静脉,从而有效改善前列腺局部微循环,达到活血化瘀的治疗目的;二可调节、整合支配前列腺的髂腹股沟神经及会阴神经,缓解盆底肌群痉挛,松弛周围肌肉,有益于前列腺管的引流通畅,解除了诸如会阴、少腹及腰骶部的坠胀疼痛等不适,促使前列腺分泌功能康复[11];针刺行间有抗炎和抗变态反应,扩张外周血管,改善微循环等作用[12]。
综上所述,温通针法治疗C N B P的机理与降低I L-2、I L-6含量,调节机体免疫功能从而达到扶正祛邪的作用有关。而且本研究显示温通针法明显优于药物治疗,疗效确切,效果独特,值得推广应用。
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Effects of Warm-promotion Needling on IL-2 and IL-6 of Rats with Chronic Nonbacterial Prostatitis
ZHAO Yaodong1,HAN Douying2
1 Gansu University of Traditional Chinese Medicine,Lanzhou 730000,China;2 Gansu Rehabilitation Central Hospital
Objective:To explore the mechanism of warm-promotion needling in treating chronic nonbacterial prostatitis(CNBP)by observing the effects of warm-promotion needling on the contents of IL-2 and IL-6 of rats with chronic nonbacterial prostatitis.Methods:All 60 rats were randomized into the acupuncture group,the medicine group,the model group and the blank group,15 rats each group.CNBP animal model was established by giving 25% XiaoZhiLing injection,0.2 mL (each dorsal lobe,0.1mL)to dorsal lobe of the prostate.The acupuncture group received warm-promotion needling,the medicine group accepted gastric administration of QianLieKang,once each day,for 30 days,the contents of IL-2 and IL-6 of rats in each group were observed.Results:The levels of IL-2 and IL-6 of rats in the acupuncture group were decreased more significantly than these of the medicine group (P<0.05).Conclusion:The mechanism of warm-promotion needling in treating chronic nonbacterial prostatitis might be related to regulating the immunity of the body,decreasing the contents of IL-2 and IL-6.
nonbacterial prostatitis,chronic;warm-promotion needling;IL-2;IL-6
R277.5
B
1004-6852(2014)05-0114-03
2014-01-26
国家自然科学基金项目(编号81060304),甘肃省教育厅项目(编号0906B-03),甘肃省科技厅自然基金项目(编号1208RJZA 248)
赵耀东(1972—),男,硕士学位,副教授。研究方向:传统针刺手法的临床及实验研究。