调胃舒颗粒剂对萎缩性胃炎大鼠血清一氧化氮含量的影响*

孙云廷 赵文波 王淑玲 舒 畅 曾友华

（1.浙江省杭州市中医院，浙江 杭州 310007；2.杭州师范大学生物医药与健康研究中心，浙江 杭州 321121）

调胃舒颗粒剂对萎缩性胃炎大鼠血清一氧化氮含量的影响*

孙云廷1赵文波1王淑玲2△舒 畅1曾友华1

（1.浙江省杭州市中医院，浙江 杭州 310007；2.杭州师范大学生物医药与健康研究中心，浙江 杭州 321121）

目的观察调胃舒颗粒剂对萎缩性胃炎大鼠血清一氧化氮（NO）含量的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组（A）、模型组（B）、调胃舒颗粒剂小剂量组（C）、调胃舒颗粒剂大剂量组（D）、三九胃泰治疗组（E），分别处理后观察大鼠体质量改变等一般情况，并测定血清NO含量。结果C组与D组血清NO含量均显著高于B组与E组（P＜0.05）；D组显著高于C组（P＜0.05）。D组大鼠体质量上升情况显著优于B组、C组、E组。结论调胃舒颗粒剂对萎缩性胃炎大鼠有治疗作用；对血清NO的影响呈量-效关系。

调胃舒颗粒剂 萎缩性胃炎 动物模型 血清NO

调胃舒颗粒剂经临床反复验证，对慢性萎缩性胃炎（CAG）疗效确切［1］。本研究通过观察调胃舒颗粒剂对CAG模型大鼠血清NO含量的影响，探讨调胃舒颗粒剂对CAG的治疗机理，为临床防治CAG提供实验依据。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 雄性SD大鼠50只，2月龄，体质量（180±20）g，实验动物及饲料由杭州师范大学实验动物中心提供。

1.2 主要试剂 调胃舒颗粒剂配方颗粒来源：江阴天江药业有限公司。配制成含生药浓度150 mg/mL和300 mg/mL的溶液。调胃舒颗粒配方主要组成：制半夏、黄芩、川黄连、干姜、炙甘草、西洋参、柴胡、醋香附、延胡索、白术。NO试剂盒由南昌贝塔生物科技有限公司提供，批号20120403。三九胃泰为华润三九医药股份有限公司生产，批号Z44020705。每粒150 mg，用蒸馏水配成3 mg/mL悬浊液，随配随用；冰醋酸100％浓度，由杭州师范大学生物医药研究中心提供。

1.3 分组与造模 50只大鼠适应性喂养1周后随机分为5组，每组10只：正常对照组（A）、模型组（B）、调胃舒颗粒剂小剂量组（C）、三九胃泰治疗组（D）、调胃舒颗粒剂大剂量组（E）。参照文献［2］方法，采用纯度为99％的N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍饮用液代替饮用水，自由饮用法造模。并参照文献方法［3］采用饥饱失常加耗气泻下法造模，加以改良，实验第5周开始模型组开始采用隔日喂食，自由饮MNNG饮用液。实验第6周开始，采用小承气汤液灌胃，2 mL/（只·d）。（大黄、厚朴、枳实按4∶2∶3的比例，采用江阴天江制药有限公司提供的中药免煎颗粒剂，配制成含生药200 mg/mL的药液），连续造模60 d，于30 d、60 d禁食禁水12 h后随机处死，做胃黏膜病理组织学检查，见胃黏膜腺体萎缩，出现肠化生或不典型增生，确定CAG动物模型复制成功。

1.4 处理方法 对各组动物分别于治疗前后称取体质量，再分别做如下处理。A组在相同条件下正常饲养，自然光照，不做其他处理。B组于造模后相同条件下正常饲养，自然光照，于造模后第3日开始，模拟捉拿、固定、擦拭、酒精消毒。生理盐水灌胃1 mL/100 g。上午10∶00和下午3∶00共分2次灌服，共60 d。C组加用调胃舒颗粒溶液（含生药0.15 g/mL）20 mL/（kg·d）灌胃（相当人正常用量的20倍），上午10∶00和下午3∶00共分2次灌服，连续60 d。D组调胃舒颗粒剂大剂量治疗组加用调胃舒颗粒溶液 （含生药0.3 g/mL）20 mL/（kg·d）灌胃（相当人正常用量的40倍），上午10：00和下午3：00共分2次灌服，连续60 d。E组造模后第3日开始用三九胃泰悬浊液灌胃，每日剂量1 mL/100 g体质量，上午10∶00和下午3∶00共分2次灌服，连续60 d。

1.5 NO含量测定 治疗完毕后处死大鼠，断头取血1 mL装入P管，静置2 h，以3000 rpm离心10 min，取上清夜测定NO含量，用化学法，严格按照试剂盒说明书方法测定。

1.6 统计学处理 应用SPSS13.0统计软件。计量资料以（±s）表示，采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同阶段的大鼠的一般情况观察结果 造模前各组大鼠行动灵活，反应迅速，目光有神，形体饱满，皮毛光泽，食欲良好，大便成型。造模后1周A组大鼠未见异常，体质量上升。其他各组大鼠行动迟缓，反应迟钝，目光浑浊呆滞，形体消瘦，皮毛蓬松无泽，食量减少，粪便转稀或不成形。用药1周后C组、D组及E组大鼠行动迟缓有明显改善，反应较为敏捷，双目灵活，皮毛转光泽，饮食增加，粪便转干燥。B组无明显改善。

2.2 各组血清中NO含量比较 见表1。B组与其他各组比较，NO含量显著降低（P＜0.05）；E组显著低于C组与D组（P＜0.05）；D组明显高于C组（P＜0.05）。

2.3 大鼠体质量的变化 见表2。C组、D组与E组体质量上升情况均优于B组（P＜0.05）；但均较A组差（P＜0.05）。D组体质量上升情况优于C组和E组（P＜ 0.05）。

表1 血清中NO含量的测定结果比较（μmol/L，s）

表1 血清中NO含量的测定结果比较（μmol/L，s）

与B组比较，*P＜0.05；与小C组比较，△P＜0.05；与C组比较，▲P＜0.05。

组 别 n A组 10 B组 10 C组 10 NO 12.93±0.88*12.11±0.95 13.33±0.63*▲D组 10 12.91±0.95*E组 10 13.92±0.86*△▲

表2 给药后各组大鼠不同时期的体质量变化（g，±s）

表2 给药后各组大鼠不同时期的体质量变化（g，±s）

与A组同期比较，*P＜0.05；与B组同期比较，△P＜0.05；与E组同期比较，▲P＜0.05。

组 别 n A组 10 B组 10 C组 10 1周 2周 4周 8周364.50±22.76 383.48±23.54 395.34±24.55 415.65±27.48 261.43±23.45* 272.33±24.69* 283.48±23.68* 309.44±24.12*287.55±25.43*△▲296.45±26.48*△▲321.38±31.82*△▲347.14±25.72*△▲D组 10 286.36±23.56*△▲297.33±23.12*△▲310.34±23.45*△▲326.49±28.19*△▲E组 10 312.54±23.87*△ 328.27±24.44*△ 351.32±23.34*△ 388.47±21.66*△

3 讨论

调胃舒颗粒剂是本课题组经过年多的临床验证和筛选组成的治疗萎缩性胃炎的经验效方，由半夏、黄芩、川黄连、干姜、炙甘草、西洋参、柴胡、醋香附、延胡索、白术、茯苓、八月札、鸡内金、焦山楂、蒲黄等药物组成，深度融合了清代程钟龄的中医治病八法中“和法”的理论，根据CAG患者普遍存在的肝郁气滞、寒热错杂、虚实互见、阴阳失调的复杂病机特点，将调和寒热、调和阴阳、调和脾胃、调和肝脾等各种治法统筹兼顾，有机结合。前期临床研究结果表明，调胃舒颗粒剂口服治疗CAG，其痊愈率、显效率、总有效率均显著优于服用吗丁啉片以及乳酶生片对照组［1］。

NO是人体内的一种具有生物活性的信息分子，是生物体内重要的生理信使和病理介质。NO不仅参与机体多种细胞的不同生理作用，而且还参与多种疾病发生发展的病理过程［4］。在生理状态下，NO通过调节胃黏膜微循环和胃粘液的分泌保护胃黏膜；病理状态下则可导致细胞膜脂质过氧化损伤和细胞毒性［5］。目前的研究认为NO对胃黏膜具有肯定的保护作用；已经发现胃的平滑细胞和胃肌间神经丛含有大量一氧化氮合酶（NOS），说明了NO在调节胃动力方面的也有一定的重要性。

NO在胃黏膜的修复中起重要作用。本实验应用调胃舒颗粒剂治疗并观察其与萎缩性胃炎大鼠血清NO含量的关系，结果表明，调胃舒颗粒剂小剂量和大剂量治疗在CAG大鼠的体质量上升方面均显著优于模型组，说明对CAG的治疗作用是肯定的。调胃舒颗粒剂能显著改变血清NO含量，可使CAG大鼠体内NO含量升高，且优于小剂量组、模型组和三九胃泰治疗组，说明调胃舒颗粒剂对CAG有治疗作用，不同剂量治疗作用有所不同。其机制可能与改变NO含量有关。调胃舒颗粒剂的治疗作用可能与其能显著提高血清NO含量有关。

［1］孙云廷，王淑玲.调胃舒颗粒剂治疗不同证型慢性萎缩性胃炎的临床观察［J］.中国中医药科技，2013，20（1）：67.

［2］李兰珍，朱向东，段永强，等.胃炎灵对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织氧化与抗氧化系统的作用［J］.中国中医基础医学杂志，2008，14（3）：186-187.

［3］徐珊，周嘉鹤，王常松，等.慢性萎缩性胃炎证病结合模型的复制［J］.中国中医药科技，2008，15（1）：6-8.

［4］成映霞，段永强，朱立鸣，等.治萎防变胶囊对萎缩性胃炎大鼠胃黏膜NO/NOS和胃泌素、内皮素的影响［J］.中国老年学杂志，2011，31：611-612.

［5］孙波.肿瘤坏死因子α和白介素1β及诱导型一氧化氮合酶的表达与幽门螺杆菌相关性胃炎的关系［J］.中国全科医学，2010，13（4）：1155-1157.

Influence of Tiaoweishu Granules on Nitric Oxide Content in Serum of Rats w ith Atrophic Gastritis

SUN Yun-ting，ZHAO Wen-bo，WANG Shu-ling，et al. TCM Hospital of Hangzhou，Zhejiang Province，Zhejiang，Hangzhou 310007，China

Objective：To explore Nitric oxide（NO）levels in serum of rats with atrophic gastritis treated by Tiaoweishu Granules.M ethods：SD rats were random ly divided into five groups which were normal control group，atrophic gastritis model group，Tiaoweishu granules low-dose group，Tiaoweishu Granules high-dose group，and Sanjiuweitai treatment group.Change of weight was observed after treatment and contents of NO in serum were determined.Groups were compared after statistics processing.Results：Content of NO in serum of high-dose group and low-dose group were significantly higher than those of model group and Sanjiuweitai treatment group（P＜0.05）.Content of NO in serum of high-dose group was significantly higher than that of low-dose group（P＜ 0.05）.Rats putting more weight in high-dose group than ranitidine model group，low-dose group，and control group.Conclusion：Tiaoweishu Granules has a therapeutic effect on rats with atrophic gastritis and certain influence on NO in serum.Different dosage of Tiaoweishu granules has different effects on NO in serum.This could be one of the mechanisms of Tiaoweishu granules treating atrophic gastritis.

Tiaoweishu Granules；Atrophic Gastritis；Animal Models；NO in Serum

R285.5

A

1004-745X（2014）04-0617-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2014.04.022

浙江省中医药科学研究基金计划（No.2012ZB109）；浙江省杭州市卫生科技计划项目（No.2011A054）

△通信作者

2013-12-31）