乙型肝炎病毒DNA定量与乙型肝炎五项结果的对比分析

郑金菊 刘 珊 王 荣

1.青岛市中心医院检验科，青岛 266042；2.青岛市肿瘤医院，青岛 266042

乙型肝炎病毒DNA定量与乙型肝炎五项结果的对比分析

郑金菊1刘 珊1王 荣2

1.青岛市中心医院检验科，青岛 266042；2.青岛市肿瘤医院，青岛 266042

目的 探讨乙型肝炎病毒DNA定量与乙型肝炎五项的相关性。 方法 分别用微粒子化学发光法和荧光定量PCR法检测645例患者的乙型肝炎五项和乙型肝炎病毒DNA含量，并分析两者的关系。 结果 HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组的乙型肝炎病毒DNA阳性率和DNA定量均显著高于其他组（P＜0.05）。HBeAg阳性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为93.4%，HBeAg阴性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为42.8%；HBsAg阳性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为65.3%，HBsAg阴性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为7.4%。结论乙型肝炎病毒DNA与HBeAg呈正相关，部分HBsAg阴性患者也能检出乙型肝炎病毒DNA，乙型肝炎病毒DNA与乙型肝炎五项联合检测能更好地监测乙型肝炎病毒的复制情况，对监测疗效和判断预后有重要价值。

乙型肝炎病毒DNA；乙型肝炎五项；分析

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒感染引起的一种疾病，已成为严重威胁人类健康的世界性疾病。目前乙型肝炎的病原学诊断指标主要有乙型肝炎五项（俗称两对半）和乙型肝炎病毒DNA定量，乙型肝炎五项能反映机体对乙型肝炎病毒免疫应答的情况，但不能反映血清中病毒复制活跃与否，不能监测病毒载量的变化。乙型肝炎病毒DNA定量能准确反映血清中病毒复制的活动性，是乙型肝炎病毒存在、活动性复制及具有传染性的可靠指标[1-3]。本文对本院收治的645例乙型肝炎病毒感染者进行乙型肝炎五项检测和乙型肝炎病毒DNA定量检测，并分析其相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2013年1 ～11月到本院就诊的645例乙型肝炎病毒感染者，男382例，其中门诊152例，住院230例，女263例，其中门诊120例，住院143例；年龄13～85岁，平均（46.6±14.7）岁。

1.2 方法

检测者抽取静脉血后分别送至免疫室和PCR室，3000 r/min，离心10 min，分离血清，分别进行乙型肝炎五项检测和乙型肝炎病毒DNA定量检测。乙型肝炎五项采用微粒子化学发光法检测，乙型肝炎病毒DNA采用荧光定量PCR法进行检测，以copies/ml格式报告，当结果＜5×102copies/ml时直接报告为＜最低检出限，严格按照标准操作程序进行。

1.3 试剂与仪器

乙型肝炎五项试剂：美国雅培公司；仪器：雅培i2000全自动微粒子化学发光免疫分析仪，美国雅培公司。乙型肝炎病毒DNA定量试剂：乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针法），中山大学达安基因股份有限公司；仪器：Mx 3000P荧光定量PCR仪，美国安捷伦科技有限公司。

1.4 统计学处理

采用SPSS 17.0统计软件对数据进行分析和处理，计量资料以±s表示，采用方差分析，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同乙型肝炎五项模式乙型肝炎病毒DNA阳性率和乙型肝炎病毒DNA定量的比较

HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组的乙型肝炎病毒DNA阳性率和乙型肝炎病毒DNA定量均显著高于其他组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1不同乙型肝炎五项模式乙型肝炎病毒DNA阳性率和乙型肝炎病毒DNA定量的比较

2.2 HBsAg和HBeAg的乙型肝炎病毒DNA阳性情况

HBsAg阳性组乙型肝炎病毒 DNA阳性率为65.3%（359/550），HBeAg阳性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为93.4%（197/211），两组比较差异有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

乙型肝炎病毒是与人类关系密切的嗜肝DNA病毒，是病毒性肝炎的主要病原体之一[4-5]。目前乙型肝炎病毒的病原学检测指标主要有乙型肝炎免疫学标志物和乙型肝炎病毒DNA定量。乙型肝炎五项是反映乙型肝炎病毒感染后机体免疫应答情况的指标，主要包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb[6]。本研究显示，HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性患者乙型肝炎病毒DNA阳性率高达93.4%，显著高于其他组，DNA含量也高于其他组，表明大三阳患者体内乙型肝炎病毒复制活跃，病毒载量高，传染性强，大三阳组有6.6%的患者乙型肝炎病毒DNA阴性，可能是病毒基因S区发生有意义的点突变或插入、缺失突变[7]，导致现用的荧光定量PCR试剂无法检测出乙型肝炎病毒DNA；HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性患者乙型肝炎病毒DNA阳性率为55.4%，低于大三阳组，但乙型肝炎病毒DNA含量仍然较高，表明小三阳患者体内HBeAg虽然转阴，但并不表示病毒复制停止，仍具有传染性，与相关文献报道一致[8]。

乙型肝炎病毒感染后HBsAg是第一个出现的血清学标志物[9]，HBsAg阳性可见于急性肝炎、慢性肝炎或无症状携带者。本研究显示，HBsAg阳性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为65.3%，显著低于HBeAg阳性组，表明HBsAg并不能作为乙型肝炎病毒复制的标志；阴性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为7.4%，表明HBsAg阴性患者仍可能存在乙型肝炎病毒复制；HBeAg阳性组乙型肝炎病毒DNA阳性率高达93.4%，表明乙型肝炎病毒复制与HBeAg呈显著正相关，主要因为HBeAg是乙型肝炎病毒基因前C或C区的mRNA表达[10]，与乙型肝炎病毒的活动性关系密切，但阴性并不能排除乙型肝炎病毒复制，HBeAg阴性组乙型肝炎病毒DNA阳性率为42.8%，可能与乙型肝炎病毒基因突变有关，突变后HBeAg表达减弱，甚至消失，但病毒仍在复制。

对于乙型肝炎病毒感染者如果只检测乙型肝炎五项容易造成漏诊及延误治疗，要准确了解乙型肝炎患者病毒复制情况有必要同时检测乙型肝炎病毒DNA定量，乙型肝炎病毒DNA是诊断乙型肝炎病毒感染最直接的指标，检测乙型肝炎病毒DNA对于了解乙型肝炎患者的传染性大小、正确判断抗病毒的疗效及预后意义重大[4，11]。本研究所用的荧光定量PCR法通过PCR反应，使极微量的DNA在体外呈百万倍扩增，极大地提高了检测敏感性。乙型肝炎五项与乙型肝炎病毒DNA定量同时检测才能正确判断病情及预后，更好地监测乙型肝炎病毒的复制情况、观察病情的变化、判断病毒载量的大小及监测抗病毒的疗效，为临床诊断及抗病毒治疗提供重要依据。

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Comparision analysis of HBV-DNA and five items in patient with hepatitis B

ZHENG Jin-ju1LIU Shan1WANG Rong2
1.Department of Laboratory,Central Hospital of Qingdao City,Qingdao 266042,China;2.Tumor Hospital of Qingdao City, Qingdao 266042,China

ObjectiveTo investigate the correlation between HBV-DNA and HBV five makers.MethodsChemiluminescent microparticles immunoassay analysis method and fluorogenic quantitative PCR method was used to detect the HBV serological markers and HBV-DNA in 645 patients with hepatitis B respectively,and then correlation between HBV-DNA and HBV five makers was analyzed.ResultsHBV-DNA positive rate and HBV-DNA content in HBsAg, HBeAg and HBcAb positive group was high than that in other groups respectively(P＜0.05).HBV-DNA positive rate in HBeAg positive group was 93.4%,HBV-DNA positive rate in HBeAg negative group was 42.8%.HBV-DNA positive rate in HBsAg positive group was 93.4%,HBV-DNA positive rate in HBsAg negative group was 42.8%.ConclusionHBV-DNA is positively correlated with HBeAg.HBV-DNA can be detected in part of HBsAg negative patients.Combined detection of HBV-DNA and HBV five makers can effectively monitor HBV replication,it has important value in monitoring curative effect and judging prognosis.

HBV-DNA;HBV five makers;Analysis

R512.6

A

1674-4721（2014）03（c）-0096-03

2014-02-13本文编辑：李亚聪）