瑶药七爪风的化学成分研究

胡金陵，胡中立，卢张伟

1北京大学深圳医院，深圳 518036；2江苏南京亚晶医药科技有限公司，南京 210007

瑶药七爪风的化学成分研究

胡金陵1，胡中立1，卢张伟2*

1北京大学深圳医院，深圳 518036；2江苏南京亚晶医药科技有限公司，南京 210007

从七爪风中分离鉴定出6个三萜类化合物和1个甾醇，分别是suavissimoside R1（1）、nigaichigoside F1（2）、2α，3α，19α-三羟基乌苏-12-烯-28-酸（3）、2α，3β，19α-三羟基-12-烯-23，28-二酸（4）、乌索酸（5）、齐墩果酸（6）和β-胡萝卜苷（7）。化合物1～7均为首次从该植物中分离得到。

七爪风；化学成分；三萜类

传统瑶族药七爪风为蔷薇科植物深裂锈毛莓Rubus reflexusKer.var.lanceolobusMetc的干燥根，属风湿跌打损伤药，具有祛风除湿、强筋骨、收敛止血、活血调经的功效。该植物主要分布于浙江、江西、广西、广东、湖北、湖南等省区[1]。目前关于瑶药七爪风的报道很少[2-3]，周小雷等[2]对其化学成分做预实验研究，发现七爪风的根中主要含有三萜、甾体、糖类、苷类和有机酸等成分类型。本文通过多种柱色谱及制备型高效液相色谱等方法，从七爪风根的乙醇提取物中分离鉴定出7个化合物：2个三萜皂苷、4个三萜类化合物和一个β-胡萝卜苷；所有化合物均为首次从该植物中分离得到。

1 仪器、材料与试剂

Brucker AV-300，500型核磁共振仪（TMS内标）；Micromass Qauttro micro ES-CL质谱仪；Waters 600制备液相色谱仪，Waters 2487检测器；Kromasil®C18色谱柱。

D101型大孔吸附树脂（天津欧瑞生物科技有限公司）；羟丙基葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱（GE公司）；MCI柱层析填料（日本三菱公司）；ODS反相填料（日本YMC公司）；制备型HPLC用试剂为色谱纯；其余试剂均为分析纯。

七爪风Rubus reflexusKer.var.lanceolobusMetc的根，采自广西金秀，经由北京大学深圳医院中药房的胡虹教授鉴定确认。

2 提取与分离

七爪风8.5 kg经90%乙醇回流提取3次，合并提取液，减压浓缩成浸膏，加水混悬分散后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收得到石油醚萃取部位84 g、乙酸乙酯萃取部位122 g、正丁醇萃取部位175 g、水部分约345 g。乙酸乙酯部位经过硅胶柱色谱，三氯甲烷-甲醇（100∶0～0∶100）梯度洗脱，得到14个部分RE-1～RE-14。RE-5经过硅胶（200～300目）柱色谱，石油醚-丙酮（15∶1）洗脱，重结晶后分别得到化合物5（186 mg）和6（78 mg）；RE-8经过凝胶Sephadex LH-20柱色谱，甲醇洗脱，后再经过薄层色谱硅胶H柱色谱，得到化合物3（57 mg）和4（89 mg）；RE-9甲醇重结晶直接得到化合物7（约230 mg）；RE-11先经过MCI柱色谱，甲醇-水（5%、15%、30%、40%、55%、70%、100%，v/v）梯度洗脱，40%甲醇洗脱部分经过SephadexLH-20柱色谱，80%甲醇洗脱后再经过反复反相ODS柱色谱，甲醇-水梯度洗脱，得到化合物1（24 mg）；RE-12经过MCI柱色谱，甲醇-水（0～100%，v/v）梯度洗脱，50%甲醇洗脱部分经凝胶Sephadex LH-20柱色谱（80%甲醇洗脱），得到9个部分RE-11a～RE-11i，RE-11e经过ODS柱色谱（42%，v/v，甲醇-水）纯化后，经pre-HPLC继续纯化得到化合物2（17 mg）。七爪风化合物1～5结构式见图1。

3 结构鉴定

化合物1白色粉末（甲醇），mp 254～255℃，易溶于吡啶，Liebermann-Burchard试验和Molish反应均为阳性，提示化合物可能为皂苷类化合物。ESI-MS（m/z）：703.2[M+Na]+，679.1[M-H]-，715.1[M+ Cl]-。1H-NMR（Pyr-d6，500 MHz）δ：1.05（3H，d，J= 5.5 Hz），1.15（3H，s），1.21（3H，s），1.37（3H，s），1.62（3H，s），1.72（3H，s），2.91（1H，s，H-18），4.62（1H，d，J=8.0 Hz，H-12），6.29（1H，d，J=7.0 Hz，H-1′）。13C-NMR（Pyr-d5，125 MHz）δ：48.5（C-1），68.6（C-2），80.9（C-3），54.3（C-4），52.2（C-5），21.4（C-6），33.2（C-7），40.6（C-8），48.2（C-9），37.6（C-10），24.4（C-11），128.1（C-12），139.2（C-13），42.0（C-14），29.0（C-15），26.0（C-16），48.1（C-17），54.7（C-18），72.5（C-19），42.0（C-20），26.6（C-21），38.5（C-22），180.0（C-23），13.4（C-24），17.4（C-25），17.3（C-26），24.4（C-27），176.8（C-28），26.9（C-29），16.6（C-30），95.7（C-1′），74.0（C-2′），78.9（C-3′），71.1（C-4′），79.1（C-5′），62.3（C-6′）。以上数据与文献[4]数据基本一致，故推断化合物1为suavissimoside R1。

图1 化合物1～5的结构式

化合物2白色无定型粉末（甲醇），mp 230～231℃，易溶于甲醇、吡啶。ESI-MS（m/z）：667.4[M+ H]+，665.3[M-H]-，701.3[M+Cl]-。1H-NMR（Pyrd5，500 MHz）δ：1.02（3H，d，J=6.5 Hz），1.05（3H，s），1.10（3H，s），1.23（3H，s），1.39（3H，s），1.65（3H，s），2.90（1H，s，H-18），5.30（1H，br.s，H-12），6.30（1H，d，J=6.5 Hz，H-1′）。13C-NMR（Pyr-d5，125 MHz）δ：47.4（C-1），68.0（C-2），78.1（C-3），43.8（C-4），47.3（C-5），18.1（C-6），32.9（C-7），40.6（C-8），46.6（C-9），35.4（C-10），23.9（C-11），127.6（C-12），138.8（C-13），37.8（C-14），28.7（C-15），25.8（C-16），47.9（C-17），53.8（C-18），72.2（C-19），41.7（C-20），26.4（C-21），37.1（C-22），64.5（C-23），14.3（C-24），17.1（C-25），17.4（C-26），24.8（C-27），175.9（C-28），27.0（C-29），16.7（C-30），95.1（C-1′），72.9（C-2′），76.2（C-3′），70.2（C-4′），77.5（C-5′），61.4（C-6′）。以上数据与文献[5]对照基本一致，故推断化合物2为nigaichigoside F1。

化合物3白色颗粒状结晶（甲醇），香草醛-硫酸溶液显蓝色斑点。1H-NMR（500 MHz，Pyr-d5）δ：0.90（3H，s，CH3），0.98（3H，s，CH3），1.11（3H，s，CH3），1.26（3H，s，CH3），1.42（3H，s，CH3），1.63（3H，s，H-29），1.12（3H，d，J=6.6 Hz，H-30)，5.58（1H，d，J=3.0 Hz，H-12），4.29（1H，m，H-2），3.76（1H，d，J=3.0 Hz，H-3）。13C-NMR（125 MHz，Pyr-d6）δ：43.1（C-1），66.1（C-2），79.4（C-3），38.8（C-4），48.8（C-5），18.6（C-6），33.6（C-7），40.6（C-8），47.7（C-9），38.7（C-10），24.4（C-11），128.0（C-12），140.0（C-13），42.9（C-14），29.5（C-15），26.4（C-16），48.3（C-17），54.6（C-18），72.7（C-19），42.0（C-20），27.0（C-21），28.5（C-22），29.1（C-23），22.3（C-24），16.8（C-25），17.3（C-26），24.7（C-27），180.7（C-28），27.1（C-29），16.7（C-30）。以上数据与文献[5]对照基本一致，故鉴定化合物3为2α，3α，19α-三羟基乌苏-12-烯-28-酸（2α，3α，19α-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid）。

化合物4白色粉末（甲醇），mp大于300℃，Liebermann-Burchard反应阳性，10%硫酸乙醇溶液呈亮蓝色斑点。ESI-MS（m/z）：517.4[M-H]-，553.4 [M+Cl]-。1H-NMR（Pyr-d5，500 MHz）δ：13C-NMR（Pyr-d5，125 MHz）δ：48.2（C-1），68.5（C-2），81.0（C-3），54.8（C-4），52.2（C-5），21.4（C-6），33.3（C-7），40.1（C-8），48.2（C-9），38.8（C-10），24.3（C-11），128.0（C-12），139.9（C-13），42.2（C-14），29.1（C-15），26.5（C-16），48.5（C-17），54.8（C-18），72.7（C-19），42.6（C-20），27.2（C-21），38.4（C-22），180.4（C-23），13.5（C-24），17.5（C-25），17.2（C-26），24.8（C-27），180.7（C-28），29.0（C-29），24.9（C-30）。以上数据与文献[6]对照基本一致，故推断化合物4为2α，3β，19α-三羟基-12-烯-23，28-二酸（2α，3β，19α-trihydroxyurs-12-en-23，28-dioic acid）。

化合物5白色针晶（甲醇），mp 287～289℃。ESI-MS（m/z）：457.3[M+H]+，479.3[M+Na]+。1H-NMR（CDCl3，300 MHz）和13C-NMR（CDCl3，75 MHz）数据与文献[7]报道基本一致，故确定化合物5为乌索酸。

化合物6白色针晶（甲醇），mp 302～304℃。ESI-MS（m/z）：456.1[M]+。1H-NMR（CDCl3，300 MHz）和13C-NMR（CDCl3，75 MHz）数据与文献[8]报道基本一致，故确定化合物6为齐墩果酸。

化合物7白色粉末，溶于甲醇、含水甲醇。与β-胡萝卜苷标准品对照，薄层色谱Rf值一致，斑点显色相同。鉴定化合物7为β-胡萝卜苷。

[1] 戴斌.中国现代瑶药[M].南宁：广西科学技术出版社，2009：106.

[2] 周小雷，王硕，樊溪源，等.瑶药七爪风的化学成分预实验研究[J].中国民族民间医药杂志，2012，21（2）：2-3.

[3] 梁冰，文志云，韦韡，等.瑶药七爪风薄层色谱检测方法研究[J].中国民族民间医药杂志，2012，21（11）：3.

[4] 都述虎，冯芳，刘文英，等.茅莓化学成分的分离鉴定[J].中国天然药物，2005，3（1）：17-20.

[5] 刘向前，邹亲朋，冯胜，等.高山地榆中3个乌苏烷型三萜成分[J].西北药学杂志，2011，26（4）：239-41.

[6] Wang BG,Zhu WM,Li XM,et al.Two triterpenoid dimersfromRubuspungensCambvar.oldhamii[J].Chin Chem Lett,2000,11(2):143-6.

[7] 常军民，热娜·斯木，诸年生.新疆鼠尾草的化学成分研究[J].天然产物研究与开发，2001，13（1）：27-9.

[8] 周大颖，杨小生，杨波，等.黔产毛子草化学成分研究[J].天然产物研究与开发，2007，19（5）：807-8.

Chemical Components from the Roots of Rubus reflexus Ker.var.lanceolobus Metc

HU Jin-ling1,HU Zhong-li1,LU Zhang-wei2*
1Peking University Shenzhen Hospital,Shenzhen 518036,China;2Nanjing Yajing Medical Technology Co., Ltd,Nanjing 210007,China

The seven compounds obtained from the roots ofRubus reflexusKer.var.lanceolobusMetc were suavissimoside R1(1),nigaichigoside F1(2),2α,3α,19α-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid(3),2α,3β,19αtrihydroxyurs-12-en-23,28-dioic acid(4),ursolic acid(5),oleanic acid(6)and daucosterol(7).All compounds were obtained from this plant for the first time.

Rubus reflexusKer.var.lanceolobusMetc;Chemical components;Triterpene

R284.2

A

1673-7806（2014）03-231-03

胡金陵，男，主治医师 E-mail:454744476@qq.com

*通讯作者 卢张伟，男，硕士，工程师

E-mail:Lzwsunbird@126.com

2014-01-08

2014-02-17