养殖场利用ELISA方法建立自家IB抗体基准线的意义

李玉燕等

鸡传染性支气管炎（IB）是由传染性支气管炎病毒（IBV）引起鸡的一种急性、高度接触性传染病，主要侵害鸡的呼吸、泌尿生殖和消化系统等。IBV对不同日龄的鸡产生不同程度的危害：雏鸡感染后，开产时变成假母鸡，引起生殖系统受损，如输卵管永久性退化，输卵管短小，管腔狭窄，闭塞，导致生产力衰竭，甚至发生死亡；产蛋鸡感染后产蛋下降，蛋品质降低，饲料报酬降低，死淘率增加。该病致使国内养鸡业的直接经济损失达数亿元人民币。目前，传染性支气管炎呈世界分布，是危害世界养禽业的重大传染病之一。

目前IB血清学诊断方法有病毒中和试验（VN）、血凝试验（HA）和血凝抑制试验（HI）、琼脂扩散试验（AGP）、干扰试验、免疫荧光技术（IFA）、ELISA技术、胶体金检测方法（DIGFA）和对流免疫电泳等。其中ELISA方法灵敏性高、特异性强，是检测群特异性抗体的常用方法，适于做传染性支气管炎的血清学鉴定和免疫状态的评估。酶联免疫系统被证明在IBV抗体水平的定量检测中是有效的，适用于鸡群免疫状态的监测。

ELISA技术需要检测目前IB抗体滴度值是否在正常范围内，证实没有野毒感染。这就需要有大量的数据积累作参考，以便对新的检测数据和以前检测储存的数据做比较，必须有大量的数据积累做参考。常规的血清学群体监测需要各养殖企业建立自己的基准线，也就是所谓的“baseline values”。我们必须认识到“baseline values”是鸡场特异性的，它受饲养品种、日龄、免疫程序、疫苗类型及其他的环境因素的影响。但是一旦建立了属于自己的基线，就会快速的监测免疫程序是否合理，整个鸡群有无潜在的安全隐患。如果检测的滴度值远高于正常的抗体滴度，则存在野毒感染的可能性；如果检测的滴度值低于预期的疫苗免疫应答滴度，就表明免疫程序不合理或者疫苗的质量有问题。

如何建立各养殖企业自己的基准线呢？以BioChek公司的IB检测试剂盒为例，不同类型疫苗产生抗体的平均抗体效价是在一定范围内的，低于这个范围存在免疫的失败可能，需要与疫苗生产商或试剂生产商讨论；如果高于这个范围则存在野毒感染的可能性，如表1所示。

以上仅仅是举例说明不同类型的疫苗对抗体基准线的影响，在现场养殖工作中，需要综合考虑各种因素，建立各养殖企业自己的基准线。首先要与“标准的阴性对照做比较”，即根据各养殖企业自己的免疫程序，统计几批健康鸡群不同时期采集的抗体滴度，合理评估制定出正常的抗体滴度范围。表2为山东省某公司种鸡不同周龄正常的抗体滴度及可疑野毒感染范围。

根据以上统计结果，若IB ELISA抗体滴度异常升高3000～4000，则存在野毒感染的可能。

通过建立各养殖企业自己的基准线，能够快速地监测传染性支气管炎疫情，及时采取防控措施。根据疫情统计，2周龄内及开产前感染野毒的几率较高，这两个时间段内感染对鸡群的危害最严重，由此造成的经济损失也最大。所以针对传支的发病周龄，各养殖企业必须落实好生物安全控制措施，制定出合理的免疫程序，按照既定计划进行采血检测抗体水平，使抗体水平符合公司的抗体基准线范围，达到免疫保护作用。笔者根据现场管理经验，建议采取以下防控措施：

空舍期落实好各种消毒措施，养殖场需要一个真正的隔离时间，这是最基础有效的工作，也是防止IB野毒的入侵前提。

雏鸡的早期感染是引发肾脏病变和输卵管发育抑制造成假母鸡的重要原因，所以防止早期感染是防制IB的重要措施。建议将首免放在1日龄，可使用毒力较弱的H120或Ma5，最好的免疫方式是滴鼻或点眼。因喷雾免疫操作简便，父母代的批量较大，目前父母代养殖场采取群体免疫方式较多。

IB血清型多，临床症状复杂，定性困难，免疫效果不理想。在尚不能确定本地主要流行株的地区，建议多种血清型的疫苗交叉免疫程序，利用相互之间抗原决定簇的交叉保护来预防变异株。

不要忽视消化道的免疫，因为该部位局部免疫力差使越来越多的变异株从肠道分离出来，毒力强、死亡率高。

弱毒苗免疫之后要用灭活苗加强免疫，使机体产生较高的循环抗体保护肾脏和卵巢。

蛋鸡和种鸡开产后也要重视IB的免疫，常采用Clone30-Ma5喷雾免疫。

免疫前后应避免一切应激反应，供应充足饮水，并在饮水中添加电解多维素或肾肿解毒药。

避免同场多批次鸡群的问题，若确实难以避免，尽量将免疫程序调整为同步进行。