辽宁省淡水鱼中孔雀石绿残留量检测

崔松林

摘要 [目的]了解2013年辽宁省餐饮业淡水鱼中孔雀石绿残留状况，为监管部门提供科学的理论依据。[方法]采用多阶段分层随机抽样的方法在辽宁省5个城市中抽取淡水鱼180份。按照检测标准要求采用液相色谱-串联质谱法，以相应的氘代物为内标物进行测定。[结果]180批样品中有93批检测出孔雀石绿残留，检出率为51.6%。不同城市和不同品种间检出率存在显著差异。[结论]辽宁省淡水鱼中孔雀石绿残留情况比较严重。

关键词 淡水鱼；孔雀石绿；残留

中图分类号 S986.1 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）13-03916-02

Abstract [Objective] To investigate the residue of malachite green in freshwater fish in Liaoning Province and provide scientific data. [Method] 180 samples were collected by using stratified random sampling from 5 cities of Liaoning Province. LCMSMS method was used according to the inspection standard for the detection with the internal standard of deuterated malachite green. [Result] Chloramphenicol was found in 93 samples from 180 samples， the detection rate was 51.6%. There was significant difference of detection rate among cites and categories. [Conclusion] The situation of malachite green residue in freshwater fish is serious.

Key words Freshwater fish； Malachite green； Residue

食品安全问题已成为除人口、资源、环境以外的全球性第四大危机，受到全世界的广泛关注。我国是食品生产和消费大国，食品安全性不仅影响我国食品的对外出口贸易，而且关系到人们的饮食和身体健康。近年来，我国的食品安全问题屡屡曝光，凸显了我国在食品安全的监测和管理方面的不足。为了掌握我国的餐饮食品安全的现状，制定出适合我国国情的食品安全管理措施，根据国家食品药品监督管理局“关于印发2013年国家餐饮服务食品安全监督抽验计划的通知”（食药监办食[2013]1号）及辽宁省食品药品监督管理局“关于印发2013年餐饮服务食品安全监督抽验方案的通知”（辽食药监餐发[2013]58号）的要求，针对辽宁省餐饮食品产业状况、居民消费水平和习惯，进行了辽宁省自选品种食品安全调查与评价。

近年来，监管部门对淡水鱼的监测较为频繁，检测指标多为硝基呋喃类代谢物、食元性寄生虫、香港海鸥型菌等[1-3]，对于最近几年孔雀石绿残留的监测则较少涉及。

孔雀石绿是3个芳香胺的聚合物，具有潜在的致癌、致畸、致突变作用，其在水中主要代谢物为脂溶性的隐色孔雀石绿，且在鱼体内90%以上以隐色孔雀石绿形式存在，其毒性要比孔雀石绿还强。孔雀石绿进入人类或动物机体后，可以通过生物转化，还原代谢成脂溶性的无色孔雀石绿，具有高毒素、高残留和致癌、致畸、致突变作用，严重威胁人类身体健康。中华人民共和国农业部第235号公告已将其列为禁用物质，规定在淡水鱼中不得检出。笔者采用液相色谱-串联质谱方法对180批淡水鱼中孔雀石绿残留量进行了检测，以期为监督部门提供科学的理论依据。

1 材料与方法

1.1 样品来源及种类

此次调查采用多阶段分层随机抽样方式从沈阳、锦州、辽阳、葫芦岛4个城市，其中从沈阳抽取的样品占总样品的40%，其业态类型包括大型、中型和小型3种类型，以保证抽样具有代表性，能够真实反映该地区的淡水鱼中孔雀石绿残留情况。此次监测共抽取淡水鱼样品180份，分为15个品种。

1.2 检测方法

1.2.1

仪器与试药。API 4000 串联四极杆液质联用仪（美国AB公司），对照品孔雀石绿草酸盐（纯度为98.0%）、隐色孔雀石绿（纯度为94.0%）、内标氘代孔雀石绿（纯度为99.4%）和氘代隐色孔雀石绿（纯度为98.5%）均购自德国Dr.Ehrenstorfer公司。

乙腈、冰醋酸（Sigma公司）均为色谱纯；水为Millipore 超纯水，其他试剂均为分析纯。

1.2.2

色谱及质谱条件。Waters C18柱（规格为150 mm×3.2 mm，粒径为5 μm ）；流动相为乙腈-5 mmol/L醋酸铵溶液（用冰醋酸调节pH至3.5）（15∶85）；流速为0.5 ml/min；进样量为20 μl。

离子源为电喷雾离子化（ESI）源；离子源温度为400 ℃；检测方式为正离子检测方式；离子源喷射电压为5 500 V；气帘气（CUR）为20 psi；雾化气（GS1）为50 psi；辅助气（GS2）为50 psi；碰撞气（CAD）为6 psi；入口电压（EP）均为10 V；扫描方式为多反应监测（MRM）。

1.2.3

溶液制备。

（1）标准品溶液的制备。称取孔雀石绿、隐色孔雀石绿、d5-孔雀石绿和d5-隐色孔雀石绿标准品适量，以乙腈稀释制成 0.1、0.2、0.4、0.8和2.0 ng/ml浓度的标准溶液（内标浓度1.0 ng/ml）。

（2）样品溶液的制备。将鱼去头、鳞、刺后捣碎，称取乙捣碎的样品5.00 g，置于50 ml离心管中，加入50 μl内标溶液（500 μg/L），精密加入25 ml乙腈， 10 000 r/min匀浆提取30 s，加中性氧化铝3 g，涡旋2 min，3 500 r/min离心10 min。取上清液3 ml，加入正己烷1 ml，涡旋2 min，3 500 r/min离心10 min，弃去正己烷层，取乙腈层用0.2 μm滤膜滤过后，作为供试品溶液。

1.2.4

测定方法。取标准品溶液及样品溶液各20 μl，注入液质联用仪。采用标准曲线法计算孔雀石绿含量。该方法的检出限为0.5 μg/kg，线性范围为0.5～10.0 μg/kg，孔雀石绿和隐色孔雀石绿回收率分别为102.5%和98.9%。

1.3 数据处理

采用SPSS统计软件对试验数据进行统计与分析，孔雀石绿残留量大于检出限0.5 μg/kg判定为阳性。检出率的比较采用χ2检验分析，P<0.05表示有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 孔雀石绿残留量

孔雀石绿在防治水产品疾病时具有效果较好、价格低廉的特点，曾在我国水产养殖上广泛使用，因此容易存在禁用不彻底的问题。在此次调查研究中，孔雀石绿残留的检出率在不同品种间差异显著，中华鲟鱼、鳟鱼、桂鱼、鲈鱼、鳗鱼和鳝鱼明显高于其他种类鱼的含量，推测原因可能是这几种鱼的价格较贵，如果没有及时卖出，淡水鱼可能会生寄生虫，为避免死亡，在水中加入了超量的孔雀石绿。各城市间的差异可能是因为各地的宣传及监管力度不同所致。

兽药和违禁药物监测问题目前已经成为广受关注的热点问题[4-6]。兽药和违禁药物监控是一项长期而艰巨的工作，需要政府和管理部门的高度重视和广大民众的支持，并采取有效的控制措施。

参考文献

[1] 陈剑刚，白艳玲，梁素丹，等.固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物[J].中国食品卫生杂志，2013，25（4）：338-343.

[2] 张小萍，蒋守富，洪国宝，等.上海市市售食品食源性寄生虫污染状况调查[J].中国血吸虫病防治杂志，2013，24（4）：404-409.

[3] 张淑红， 韩艳青， 申玉学，等.河北省淡水鱼香港海鸥型菌分布及耐药性研究[J].实用预防医学，2010，17（11）：2137-2139.

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[6] 魏博娟，钱卓真，吴成业. 高效液相色谱-串联质谱法快速测定水产品中喹诺酮药物残留[J].中国食品卫生杂志，2011，23（3）：249-254.