河南郑州玉米田4种暗色丝孢真菌的鉴定

李跃等

摘要 [目的] 鉴定河南郑州周边地区玉米田的4种暗色丝孢真菌。[方法]从郑州市周边玉米田分时期采集典型土样24份。结果]分离鉴定出4种暗色丝孢菌，分别是腐质霉、穗状平脐蠕孢、黑细基格孢和葡萄穗霉，对其进行了详尽的形态描述，并讨论了他们与近似种的关系，所研究玻片标本与活菌种，均保存于河南农业大学菌物学标本室。[结论] 为该地区玉米病害的生物防治奠定基础。

关键词 土壤真菌；穗状平脐蠕孢；腐质霉；葡萄穗霉；黑细基格孢

中图分类号 S154.3 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2014）13-03884-03

Abstract [Objective] The aim was to study four kinds of dematiaceous hyphomycetes from maize farmland soil of Zhengzhou in Henan Province. [Method] 24 soil samples were collected from maize farmland soil of Zhengzhou in Henan Province.[Result] 4 species of soil dematiaceous hyphomycetes were found from 24 soil samples collected from maize farmland soil of Zhengzhou in Henan Province. They were Bipolaris specifera， Humicola fuscoatra， Stachybotrys chartrum， Ulocladium atrum， and they were described in detail. Specimens （dried cultures） and living cultures of all fungi studied have been deposited in the Herbarium of Henan Agricultural University： Fungi.[Conclusion] The study laid the foundation for strain resources of maize disease biological control.

Key words Soil fungi； Bipolaris specifera；Humicola fuscoatra； Stachybotrys chartrum； Ulocladium atrum

河南是玉米种植大省，地处中纬度地带，是我国的中原地区，地势西高东低，位于我国第二级地貌台阶和第三级地貌台阶的过渡地带，地表形态复杂多样，山地、丘陵、平原、盆地等地貌类型齐全。该地区气候位于北亚热带和暖温带地区的过渡带，我国划分亚热带和暖温带的地理分界线秦岭-淮河一线穿过境内的伏牛山脊和淮河干流，此线以南为亚热带湿润半湿润地区，此线北属于暖温带半湿润半干旱地区。日照充足，四季分明，气温温和，非常适合夏玉米的栽培，笔者从河南省郑州市周边的玉米田分不同时期，采集混合土样24份，从中分离鉴定出4种土壤暗色丝孢真菌，以期为这一地区玉米病害的生物防治奠定基础。

1 材料与方法

1.1 供试材料

2013年选择玉米苗期、大喇叭口期、抽雄期和收获后期分别在郑州周边玉米田采集共24份土壤表层土。

1.2 试验方法

采用稀释平板法处理土壤样品，单孢分离法分离纯化目的菌株。将自来水琼脂+小麦秸秆培养基（TWA+W）上长出的菌落置于体视镜下观察，用细长挑针挑取目的真菌单个孢子于PDA平板，于21～25 ℃生化培养箱内培养4～7 d后，挑取单菌落，获得纯菌种，无菌操作[1]。采用冷冻管保藏法和斜面保存法结合存放菌株。并制作干制培养物标本并保存。利用挑片法制作玻片标本。采用形态描述、绘图与显微摄影相结合的方式，全面记录菌株信息。

2 结果与分析

2.1 穗状平脐蠕孢

Bipolaris specifera （Bainier） Subram.， Hyphomycetes： 756， 1971. Brachycladium spiciferum Bainier， Bull.Soc.Mycol.Fr.24：81，1908.

PDA平板上，菌落绒毛状，平铺，边缘整齐，褐色，背面近黑色，产孢容易，但孢子有变形。TWA+W平板上，菌落绒毛状，灰褐色，扩展较快，25 ℃下，7 d直径4.5～6.0 cm，产孢量大。菌丝体大量埋生，少数表生。菌丝无色或淡褐色，具隔膜，多分枝，光滑，宽1.5～4.5 μm。分生孢子梗侧生或端生于菌丝，单生或簇生，直立，端部常随产孢屈膝状弯曲，光滑，2～5隔膜，长可达180 μm，宽3.5～6.5 μm。分生孢子顶侧生，椭圆形，直，一般3假隔膜，两端细胞常有一暗色区域，21～36 μm×10～13 μm，平均28 μm×11 μm。脐点平截，不明显（图1）。

3 结论与讨论

穗状平脐蠕孢分布非常广泛，但在热带和亚热带地区更为常见，植物材料以及空气和土壤中都有分布[2-7]。1989年文景芝等[8]自狗牙根和双穗雀麦上最早分离出该真菌[8]。该种的分生孢子形态与澳大利亚平脐蠕孢B. australiensis （M.B. Ellis）Tsuda & Ueyama特别近似。

腐殖霉为该属内广布种，存在多种生境的土壤中，如山毛榉林、云杉林、热带混交林、草地、可耕地、果园、稻田、沙漠、沙地和黏土以及盐湖等生境中[9-10]，60 cm以上的土层内均可能分离到此菌，而以中性土壤中较多。在原作者的描述中，除全壁芽生的分生孢子外，还可产生内壁芽生分生孢子。笔者所有分离物均只产生前一种孢子。该种是属的模式种，孢子薄壁，光滑，有间生孢子。

葡萄穗霉为属内分布最广泛的种，生于多种植物的残体上，广泛分布于针叶林和阔叶林内、丛林、苗圃、高山草地、耕地、柑橘和香蕉种植园内、沙丘、沙漠、盐湖、苔原、污水浸泡后的土壤、堆肥等[11-12]。在土壤中主要存在于表层，表层20 cm以上最多，土壤的酸碱度并不影响其数量。另外也存在于大麦、燕麦的根部以及小麦、玉米、香蕉、紫花苜蓿、落花生等多种植物的根际。此菌可促进土壤固结，是一种重要的纤维素分解真菌，可造成木材的软腐；所产生的毒素可致人或马的穗霉菌中毒病。戴芳澜（1979）在《中国真菌总汇》中以Stachybotrys atra Corda的名称收录该种，系由多位作者分离自土壤、粪和玻璃纸等基质上，包括陈庆涛（1965，1974）2次从西藏分离到该种。孔华忠（1997）和陈伟群等（2000）分别从河北小五台山和广东西沙群岛分离到此菌；刘会梅（2004）从土壤分离到该种，笔者也多次从西藏的土壤中分离到[12]，表明此菌确系我国土壤中的广布种[13-14]。该种最初被描述为分生孢子双胞，Bisby（1943）认真研究标本和培养物后，订正了属和种的概念，描述为产生单细胞的瓶梗分生孢子。他发现此种在人工培养条件下形态变异幅度大，另有10多个种的分生孢子都与该种在同一变幅范围内，将它们都看作是S. atra Corda的同物异名。Hughes（1958）重新检查了S. atra Corda的模式材料，认为它与S. chartrum （Ehrenb.） S. Hughes是同一个种，根据国际植物命名法规13条款的优先律原则，该种的正确名称应该为S. chartrum （Ehrenb.） S. Hughes。

黑细基格孢的一个最显著特征是产生大量球形或近球形的分生孢子，且具有十字状隔膜。Simmons （1998）将该属内明显产生球形、近球形或阔倒卵形分生孢子的种划为U. atrum组，通过纯培养该组内多个分离物发现，仅依靠其成熟孢子的特征来进行种的区分，结果不可靠，这些分离物在1～3 d时的形态特征分化明显，并讨论了其发育早期形态特征在种的区分方面的重要性，在此基础上发表了2个新种：U. multiforme E.G. Simmons和U. dauci E.G. Simmons。描述U. atrum早期培养特征为“分生孢子阔椭圆形，光滑，3～4横隔膜和多纵或斜隔膜，30～32 μm×15～20 μm”，研究过程中，笔者也严格按Simmons（1998）的方法将该组内的多个分离物进行了培养，发现其早期同样产生大量颜色较淡的球形或近球形的分生孢子，而未出现Simmons所描述的上述典型特征，由于该属内的分生孢子形态受环境影响较大，可能由于试验地理位置不同，以及其他细微因素影响，所以结果不同，但由于分离物具有典型U. atrum的特征，将之定为该种。该种广泛分布于木头，多种植物的叶子、茎、叶和种子，土壤中也有分布[15]。笔者从多处土壤中都分离到该种，其在土壤中存在较广泛。

参考文献

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