皮内着色技术在昆白小鼠背部皮肤染色效果的研究

刘磊　邱明宁　谭国斌等

[摘要]目的：将皮内着色技术应用到脱毛后的昆白小鼠，研究脱发的美容方法，从全新的角度对男性脱发进行美容。方法：将昆白鼠去除背部毛发后，用文身机刺针进行皮内着色，并将着色染料进行分级。结果：皮内着色后的小鼠无不良反应，着色效果佳，持久时间长，未见明显褪色，部分针刺点有局部晕色现象，可以通过调节进针深度而改善。结论：皮内着色无论是持续时间还是美观效果角度，比现有手段都更有优势，值得进一步研究，以得到更安全的着色剂，并进行临床试验。

[关键词]皮内着色；染色；小鼠

[中图分类号]TS974.1 [文献标识码]A [文章编号]1008-6455（2014）18-1534-04

Abstract：Objective Intradermal coloring technology was applied to research on methods of hair loss in a new angle. Methods Erase the hair on the back of chosen mouse and classified the ink to dye the skin with needles. Results No adverse reaction was found and the effect was good and lasting. To avoid the demitint，the depth of inserting of needle was adjusted which improved the effect. Conclusion The duration and effect of intradermal coloring technology had more advantages than the existing methods.It worth further study to find more secure colorants and then conducting clinical trials.

Key words：intradermal coloring；dye；mouse

目前，我国至少有1.3亿男性脱发患者，并呈年轻化趋势发展。调查显示，面对严峻的“头顶危机”，去医院接受正规治疗的不足三成，有47%的患者深陷治疗误区。皮内着色技术是一种简单、新颖、并能够有效解决脱发问题的新方法，以“曲线救国”的方法对脱发患者进行美容整形，从而达到美观的目的。作为一种新型、有效解决脱发的美容疗法，若能投入市场将获得巨大的社会效益和经济效益，具有良好的应用前景，值得研究与开发。

1 国内外研究现状

人体脱发的发生是一个复杂的、多诱因的、逐步的病理变化过程，其病因既有内在的遗传因素，又有外在的环境因素，比如雄激素问题，社会、生活压力问题等。在我国，男性脱发问题日趋严重，而且目前呈现出年轻化的趋势[1]。为了解决男性脱发问题，多家医疗整形机构实施开展了植发治疗，取得了一定的疗效，但存在手术失败及再次脱发的的风险，且治疗费用昂贵[2-3]；也有研究显示，毛囊干细胞移植技术也有应用于治疗脱发的前景，但将其应用到临床上，还需要一个长期的探索过程。所以本研究另辟蹊径，将皮内着色技术应用到脱发后整形美容的研究领域。

目前，国内外用于脱发治疗的手段，主要有以下几种：①药物治疗脱发，目前临床上使用最多的治疗药物是非那雄胺，非那雄胺为甾类化合物，是5-α还原酶抑制剂。在治疗良性前列腺肥大过程中发现患有AGA患者在光秃的头皮上长出众多的头发，此药有效率60%左右，且需持续服药，否则会继续脱发。该药物的主要副作用是性欲减退，动物实验中还发现非那雄胺有致畸作用[4-5]。②植发治疗脱发，毛囊单位移植技术治疗雄性脱发方法：取后枕部健康梭形皮瓣，在7倍显微镜下按照毛囊自然的生长规律加工分离成含1～4个毛囊的毛囊单位，在受区打孔移植。但植发后的效果不可能和正常的头发一模一样，其后遗症主要在于头部可能会留有瘢痕。有的患者长出来的头发数量不到术前承诺的一半，费用也相对较高，几千元到几万元不等[6-8]。③毛囊干细胞移植，研究发现，从成年实验鼠毛囊中分离出的干细胞，在被植入裸鼠皮肤后能再生出新的毛囊和毛发。日本东京理科大学的科学家利用干细胞培育出有色毛囊而后植入一只裸鼠背部，最后成功让这只裸鼠长出毛发。目前，此技术尚需多项临床研究试验后才可以应用于临床，且费用较高[9]。其他还包括中医治疗[10]、紫外光治疗[11]等。

2 材料和方法

2.1 材料：8周龄雄性昆白小鼠50只，购自广东医学院动物中心，饲养于广东医学院动物中心。文身机购买自网景科技发展有限公司，同时配备染色剂以及各种型号刺针。彩色标准图谱购买自新华书店，由台湾艺术出版社出版，可以显示标准CMYK颜色调配。病理切片由广东医学院附属医院病理科协助完成。

2.2方法：将60只雄性昆白小鼠背部毛发去除，随机分成5组并进行编号。根据CMYK色阶原理显示，黑色至灰色的过渡是由C、M、Y、K的百分比决定，根据实验需要，将染料用超纯水稀释，稀释后将其涂于A4纸，对照色阶图谱，C、M、Y各自取0%，K分别取30%、60%、80%、100%，进一步调试染料，每组10只成年雄性昆明鼠，对照组用超纯水代替染色剂。利用纹身机进行皮内着色，对照组用超纯水。通过预实验已初步确定进针深度约为500μm。继续饲养实验动物，从着色结束日算起，于第5个月再次去毛，观察有无褪色、晕色等情况，进行拍照对比，制成浓度图谱及时间对照图谱。于皮内着色观察期结束当日，颈椎脱臼法杀死小鼠，随机抽取每个实验组及对照组昆明鼠1只，切取着色处皮肤，制成冰冻切片，用HE染色法染色，观察炎症反应及有无其他变化。

3 结果

3.1 染色剂调试：将染料用超纯水稀释，并与彩色标准色谱对比，分别得到C、M、Y各自取0%，K分别取30%、60%、80%、100%的染色剂浓度，用于昆明鼠的皮内着色，用超纯水作为对照组，做出效果图后，针对不同毛发颜色及浓密程度的个体患者做相应美容治疗（如图1）。

3.2 去毛后当天将昆明鼠皮内着色效果：图2A为去毛后的昆明鼠，尚未进行皮内着色，去毛过程出现部分皮肤损伤，后期着色过程中避开了损伤部位；图2B为C、M、Y各自取0%，K取100%染色剂着色后效果；图2C为C、M、Y各自取0%，K取80%染色剂着色后效果；图2D为C、M、Y各自取0%，K取60%染色剂着色后效果；图2E为C、M、Y各自取0%，K取30%染色剂着色后效果；图2F为部分着色部位出现晕色，晕色可能由于进针过深，或者刺入血管导致，后期进过调整进针深度后有所改善。

3.3 饲养5个月后皮内着色效果及组织变化：继续饲养昆明鼠5个月，再次脱毛后观察，未见明显褪色，饲养过程中昆明鼠未见明显不适，成长顺利。图3A为C、M、Y各自取0%，K取100%染色剂着色后效果；图3B为C、M、Y各自取0%，K取80%染色剂着色后效果；图3C为C、M、Y各自取0%，K取60%染色剂着色后效果；图3D为C、M、Y各自取0%，K取30%染色剂着色后效果。图3E为切取着色部位皮肤后进行HE染色的结果，可以看出，着色大部分位于真皮层，染色剂附着于胶原纤维结缔组织，由于操作原因，小部分着色仅位于表皮。图3F为对照组，根据HE染色所见，实验组着色部位未见明显炎症细胞聚集，未见其他异常。

4 讨论

皮内着色技术是一种简单、新颖、有效解决脱发问题的新方法，以“曲线救国”的方法对脱发患者进行美容整形，从而达到改善美观的目的。从研究结果可以看出，不同浓度染色剂，针刺皮内着色的程度不同，着色点的直径也有差别，浓度高的染色剂，皮内着色较深，对应着色点的直径较大，而浓度较低的染色剂正好相反。这样的梯度设计，可以满足不同秃发个体的美容需求，因为不同的个体，其头发的色泽、直径等不完全相同，即便理为光头，在头皮处显示的效果也是不同的，针对不同个体，可以选择对应的染色剂浓度进行皮内着色，达到自然匹配的效果。根据人类（个体化）头发分布情况，将不同颜色深度的染色剂用针刺的方法植入人头顶皮内，利用“障眼法”达到秃发美容效果，为难治性脱发患者，头顶脱发、隐藏头皮瘢痕的人，因脱发而只能维持光头发型的人带来希望，带来幸福，让其重新拥有美观、自信的人生。作为一种新型、有效解决脱发的美容疗法，若能投入市场将获得巨大的社会效益和经济效益，具有良好的应用前景，完全值得研究与开发。

皮内着色技术类似于皮内注射、文身技术，相对安全可靠。我们前期研究结果表明其无论是持续效果还是美容效果，与现有的脱发治疗技术相比，都有一定的优越性。而国内尚无通过皮内着色的方法进行秃发美容的研究的报道，且本研究使用的皮内着色技术具备操作简便、性价比高、持续时间长等无可忽略的优势，根据不同的脱发程度进行不同的处理，针对性的达到脱发美容的目的，以满足不同群体的爱美之心。将皮内着色方法应用于脱发美容的研究具有良好的前景。笔者将对此技术进行进一步的研究，寻找更适合用于针刺头皮着色的染料，追求美容效果更突出，安全系数更高。运用不同粗细纹身针进行皮内着色和控制刺入皮肤的深浅，对比效果，制成效果图谱，选择最佳的条件。长期观察着色皮肤，记录着色有无褪色、晕色以及有无副作用出现。头皮内针刺着色的美容效果除了与针刺染料有关，还涉及到头发分布、头发粗细及头发生长的方向，为了使头皮着色的美容效果达到最大化，我们将招募志愿者，进行头发分布、粗细、发色和生长方向的相关研究。反复试验后得出可靠的结论，并适时在志愿者身上试验，推广应用到实际中，同时提出有待深入研究的问题和进一步发展方向。

[参考文献]

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[收稿日期]2014-06-20 [修回日期]2014-07-19

编辑/何志斌