β—catenin和E—cadherin在胸腺肿瘤中的表达及意义

陈旭 徐林浩 张天强

【摘 要】目的：研究β-catenin和E-cadherin在胸腺肿瘤中的表达及意义。方法：采用免疫组化pv6000法对87例胸腺瘤中β-catenin和E-cadherin的表达，分析其在胸腺肿瘤中的意义。结果：β-catenin在胸腺瘤A 型、AB型、B1型、B2型 、B3型 、C型中的表达分别为33.3%、25%、29.4%、23.5%、33.3%、37.5%，之间的差异不具有统计学意义（P>0.05）。E-cadherin在胸腺瘤中A 型、AB型、B1型、B2型 、B3型 、C型中的表达分别44.4%、37.5%、41.2%、47.1%、58.3%、31.25%，差异不具有统计学意义（P>0.05），说明两者与胸腺瘤WHO分性无关。两者的表达与远处转移有关（P<0.05）及胸腺瘤Masaoka分析有关。相关性分析显示两者之间具有正相关（r=0.403，p<0.05）。结论：β-catenin及E-caherin与胸腺肿瘤的侵袭性转移有关，且两者在胸腺瘤的侵袭过程中可能有协同作用，临床上检测E-caherin及β-catenin可能区别胸腺肿瘤的侵袭性。

【关键词】β-catenin；E-cadherin；胸腺腫瘤；免疫组化学

【中图分类号】R737.71 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）04-2047-02

Signifucance of β-cateninand E-cadherin in Thymic Epithelial Tumor

Chen xu ，，Xu Lin-haoΔ Zhang Tian-Qiang

（Department of Thoracic Surgery，Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College，Qingdao 266003，China）

【ABSTRACT】Objective：To investigate the expression and significance of E-cadherin and β-catenin in thymic epithelial tumor.Methods：We immunohistochemically investigated the signifucance of β-cateninand E-cadherin in Thymic Epithelial Tumor in 87 patitents.Results： β - catenin expression in thymoma in type A， AB， B1， B2， B3， C were 33.3%， 25%， 29.4%， 25%， 33.3%， 37.5%， the difference between have no statistical significance （P > 0.05）. E - cadherin thymoma in type A， AB， B1， B2， B3， C type of expression， respectively， 44.4%， 37.5%， 41.2%， 47.1%， 58.3%， 47.1%， no statistically significant difference （P > 0.05）， and both have nothing to do with thymoma WHO separability. The expression of both associated with distant metastasis （P < 0.05） and thymoma Masaoka analysis. Correlation analysis showed that has a positive correlation （p < 0.05） between .Conclusion：β - catenin and E - caherin associated with thymic tumor invasive， and both in the process of invasive thymoma may have synergy， clinical detection of E - caherin and beta - catenin may Identify the thymic tumor invasive.

【Key words】β-catenin，E-cadherin，Thymic carcinoma；Immunohistochemistry

胸腺肿瘤是纵膈肿瘤中最常见的类型，占前纵膈肿瘤的50%，目前其发生、侵袭和转移的机制尚不清楚。β-catenin是Wnt通路中重要的调节因子，其在细胞中的异常积聚，可以存进肿瘤的发生及转移 [1]。E-cadherin是钙粘素家族中的一员，介导细胞间粘附作用重要的细胞因子，其低表达和不表达可促进肿瘤细胞的侵袭和转移[2]。本研究采用免疫组织化学方法检测β-catenin蛋白及E-cadherin蛋白在胸腺肿瘤中的表达，分析其在胸腺肿瘤中的表达及意义。

1 材料及方法

1.1 材料

收集青岛大学医学院附属医院胸外科2003-2010年间手术切除的胸腺肿瘤石蜡标本87例，其中男性48例，女性39例，年龄20-82岁。按WHO（2004）标准分型[3]：A型9例，AB型16例，B1型17例，B2型17例，B3型12例，C型16例。按临床Masaoka分型[4]：I型50例，II型 26，III-IV型11例。

1.2 试剂与方法

采用免疫组织化学pv6000法，鼠抗人β-catenin单克隆抗体、鼠抗人E-cadherin单克隆抗体和6000通用免疫组织化学试剂盒及DAB染色液均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。根据免疫组化PV6000法严格操作实验步骤。磷酸盐缓冲液（PBS）代替一抗作阴性对照。

1.2.2结果判定

高倍镜下观察细胞着色情况及着色部位。β-catenin主要定位于细胞膜，细胞中及细胞核中出现棕黄色颗粒为异常表达，E-cadherin正常表达于细胞膜。随机选择10个高倍视野（×400），每个视野随机计数100个细胞。阳性细胞数≥25%为阳性，不表达或阳性细胞数<25%为阴性[5]

1.3 统计学方法

应用SPSS17.0统计软件，β-catenin及E-cadherin的表达与临床病理指标的关系采用X2 ，两者之间的关系采用相关分析。

2 结果

2.1 β-catenin及E-cadherin在胸腺肿瘤中的表达

β-catenin阳性表达产物主要表达于胸腺瘤的细胞膜上，少数表达于细胞浆和细胞核，呈棕黄色颗粒。在胸腺瘤A 型、AB型、B1型、B2型 、B3型 、C型中的表达分别为33.3%、25%、29.4%、23.5%、33.3%、37.5%，之间的差异不具有统计学意义（x2=1.074，P>0.05）。E-cadherin在胸腺瘤中A 型、AB型、B1型、B2型 、B3型 、C型中的表达分别44.4%、37.5%、41.2%、47.1%、58.3%、31.25%，差异不具有统计学意义（x2=2.394，P>0.05）。

2.2 β-catenin及E-cadherin的相关性研究

E-cadherin及β-cadherin的Spearman相关性分析显示E-cadherin阳性标本37例中β-catenin有19例阳性，E-cadherin阴性标本50例中，β-catenin7例阳性，两者之间正相关（r=0.403，P<0.05）。

2.3 β-cadherin及E-cadherin与临床病理指标之间的关系

β-catenin及E-cadherin阳性表达与患者的年龄、性别及有无合并肌无力无关（P>0.05），与Masaoka分型和肿瘤远处转移相关（P<0.05），见表2.4.

3讨论。

肿瘤的发生被证明是多种因素共同作用的结果，肿瘤的侵袭和转移是影响患者生命及术后生存的重要因素。目前Wnt信号传导通路和上皮-间质转化（EMT）是目前肿瘤研究的热点。多种研究表明在乳腺癌，结肠癌，胰腺癌等肿瘤发生发展过程中伴有Wnt信号传导通路改变和肿瘤细胞EMT现象。胸腺瘤是生物学行为十分复杂的肿瘤，单纯从临床及组织学检查难以辨别其良恶性，目前认为30-40%的胸腺瘤是具有侵袭性的。

β连接素（β-catenin）是细胞内广泛存在的包浆蛋白，其基因定位于3q21.3.目前认为，β-catenin是一种多功能蛋白，在Wnt信号传导通路中发挥核心作用，参与肿瘤的形成，又能与E-cadherin结合，参与上皮内转化的过程。在正常细胞中，β-catenin与axin、APC等蛋白形成复合物，存进β-catenin的降解，所以，在正常细胞中β-catenin的含量极少[6]。当Wnt信号传导异常，β-catenin降解被抑制，使β-catenin在细胞中异常积聚，存进肿瘤的发生。β-catenin中含有与E-cadherin蛋白相結合的区域，形成E-cadherin/catenin复合体，该复合体能E-cadheerin发挥作用的重要条件，维持细胞间的粘附，β-catenin在细胞中的异常表达，可以促进肿瘤细胞发生EMT现象 [7]。研究表明，在肝癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌等多种肿瘤的侵袭和转移过程中，伴有β-catenin在肿瘤细胞质和细胞核中的异常积聚[8]。本实验研究发现，β-catenin在胸腺瘤组织学分型表达中无差异，且与胸腺瘤组织Masaoka分期和远处转移有关，可以认为，β-catenin与胸腺瘤的侵袭及远处转移有关。

上皮性钙粘蛋白（E-cadherin）是钙粘附蛋白超家族的重要一员，其低表达或不表达被认为EMT过程的标志。EMT即上皮间质转化是指上皮细胞失去正常的粘附功能，获得侵袭及转移能力的过程。多种研究表示，E-cadherin是一种重要的细胞转移抑制基因[9]，乳腺癌中，E-cadherin的表达在有转移的肿瘤与无转移的肿瘤中的表达具有显著性差异性 [10-11]。本实验研究发现，在WHO组织学分型中，E-cadherin表达无差异性，与Masaoka分期具有关，说明E-cadherin与组织学分型无关，而与胸腺瘤的侵袭性相关和远处转移有关，这与 Yang[12]、Yoshino等[13]研究发现结果相似。可以认为E-cadherin在胸腺瘤的侵袭及转移过程中具有重要意义。Spearman相关性分析显示在胸腺瘤中，E-cadherin与β-catenin的表达正相关（r=，P<0.05），认为β-catenin蛋白的表达异常可以引起E-cadherin的低表达或不表达，从而促进肿瘤的侵袭及转移。

综上所述，在胸腺瘤的侵袭过程中可能存在Wnt信号传导通路的异常及EMT现象，其可能为胸腺瘤的研究提供新的思路。并能为判断胸腺瘤的侵袭性提供新的思路。

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[13] Yoshino I，Kase S，Yano Y，et al.Expression status of E-cadherin and alpha-，beta-，and gamma-catenins in thymoma[J].Ann yhorac surg .2002，73（3）：933-937

Δ通訊作者：

徐林浩，硕士研究生导师