生栀子与炒栀子中栀子苷含量比较

邵考珍，谭梅英，詹利之

(1.佛山市南海区第七人民医院，广东 佛山 528248；2.广东省第二中医院，广东 广州 510095；3.广州中医药大学 青蒿研究中心，广东 广州 510405)



生栀子与炒栀子中栀子苷含量比较

邵考珍1，谭梅英2，詹利之3

(1.佛山市南海区第七人民医院，广东 佛山 528248；2.广东省第二中医院，广东 广州 510095；3.广州中医药大学 青蒿研究中心，广东 广州 510405)

目的：研究炒制对栀子中栀子苷含量的影响。方法：采用高效液相色谱法对生栀子与炒栀子中栀子苷含量进行测定，以Agilent Zobax Eclipse XDB C18(4.6mm×250mm，5μm)为色谱柱，以乙腈-水(15∶85)为流动相，检测波长238nm，流速为1.0mL/min，柱温25℃。结果：炒栀子中栀子苷的含量较生栀子降低。结论：栀子的炒制符合中医临床用药标准。

生栀子；炒栀子；栀子苷

栀子[1]为茜草科植物栀子GardeniajasminoidesEllis的成熟果实，为临床常用中药。9-11月果实成熟呈红黄色，除去果梗和杂质，蒸至上气或置沸水中略烫，取出，干燥。其性苦，寒，归心、肺、三焦经,具有泻火除烦、清热利湿、凉血解毒等作用。用于热病心烦、血热吐衄、目赤肿痛、淋证涩痛、湿热黄疸、火毒疮疡及扭挫伤痛。栀子主要药材成分为环烯醚萜苷类、黄酮类、二萜色素类、有机酸及其酯类等[2]。现代药理研究表明，栀子苷[3-7]具有保肝利胆、抗肿瘤、降血糖、保护神经细胞等作用。本实验采用高效液相色谱法对栀子炮制前后栀子苷的含量进行了比较，研究炒制对栀子苷含量的影响，为临床合理用药提供实验参考。

1 仪器与试药

Agilent 1100高效液相色谱仪，DAD检测器；YF-113系列高速中药粉碎机(浙江瑞安市环球药械厂)，Raytek Raynger ST-20型红外测温枪(美国雷泰公司)，CCFG-160型电炒锅(广东湛江家用电器工业公司)。

栀子药材购于福建省药材公司(批号：20131204)，经鉴定为茜草科植物栀子GardeniajasminoidesEllis的干燥成熟果实，为正品；栀子苷对照品(110749-200613，中国食品药品检定研究所)；乙腈为色谱纯，水为高纯水。

2 栀子炒制

取栀子药材，在50℃烘箱中烘干。分别称取样品5份，每份50g，置炒锅中，调整火力并控制炒制时间，照清炒法(附录ⅡD)炒至黄褐色。

3 栀子苷含量测定

3.1 色谱条件

色谱柱：Agilent Zobax Eclipse XDB C18(4.6mm×250mm，5μm)，流动相∶乙腈-水(15∶85)；流速：1.0mL/min；柱温：25℃；检测波长：238nm。

3.2 对照品溶液制备

精密称取干燥恒重的栀子苷对照品适量，置于容量瓶中，加乙腈水溶液稀释，摇匀，即制成103.7μg/ mL的栀子苷对照品溶液。

3.3 供试品溶液制备

取栀子粉末(过四号筛)约0.1g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇25mL，称定重量，超声处理20min，放冷，再称定其重量，并用甲醇补足减失的重量，摇匀滤过。精密量取续滤液10mL，置于25mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

3.4 标准曲线制备

精密吸取“3.2”项下栀子苷对照品溶液(103.7μg/mL) 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL，分别置于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取栀子苷对照品溶液各10μL，注入液相色谱仪中，按照“3.1”项下的色谱条件进行测定。以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，进行线性回归，得回归方程Y=11.853X+9.7412(r=0.999 91)。结果表明，栀子苷进样量在10.37～62.22ng范围内与峰面积呈良好的线性关系。

3.5 精密度试验

精密吸取同一对照品溶液10μL，连续进样6次，按照“3.1”项下的测定条件进行测定，结果RSD=0.32%。

3.6 稳定性试验

精密吸取同一供试品溶液10μL，于0、2、4、8、12、24h时间间隔进样分析，测定其色谱峰面积，结果RSD=1.08%。

3.7 重复性试验

精密称取同一样品粉末6份，每份0.1g，精密称定，按照供试品溶液的制备方法制备，进样分析，结果RSD=1.87%。

3.8 加样回收率试验

取已知含量的生栀子粉末6份，每份约0.05g，精密称定，精密加入栀子苷对照品溶液适量，按照供试品溶液的制备方法处理，测定其含量，计算栀子苷的平均回收率=98.1%，RSD=1.9%，结果见表1。

表1 栀子苷加样回收率试验结果

3.9 样品含量测定

取不同炮制品粉末0.1g，精密称定，按照“3.3”项下制备供试品溶液，分别精密吸取10μL进样，测定结果计算平均值。结果生栀子中栀子苷平均含量为3.3%，炒栀子中栀子苷平均含量为2.3%。见图1。

图1 栀子含量测定HPLC色谱

4 结论

栀子中栀子苷的提取方法包括了回流提取法、超声提取法和索氏提取法等，其中以甲醇为溶剂超声处理提取样品的方法较好。提取时间达20min时，栀子苷基本能够提取完全。流动相系统选择比较了甲醇-水、乙腈-水等，其中以乙腈-水(15∶85)分离效果较好，栀子苷能够在较短的时间内出峰，而且色谱峰的分离度较好。

本文采用高效液相色谱法测定了生栀子和炒栀子中栀子苷的含量，方法简便准确，重复性好，作为栀子中栀子苷含量测定的方法稳定可控。

从含量测定结果可以看出，栀子炒制后栀子苷的含量降低，生栀子(3.3%)大于炒栀子(2.3%)，说明栀子苷受热不稳定。传统认为栀子炒制后可以缓和寒性，以免苦寒伤胃，与实验结果相一致。

[1] 国家药典委员会．中华人民共和国药典[S]．一部．北京：中国医药科技出版社，2010：231-232．

[2] 孟祥东，李红伟，李颜，等．栀子化学成分及其药理作用研究进展[J]．中国新药杂志，2011，20(11)：959．

[3] 孙旭群，赵新民，杨旭．栀子苷利胆作用实验研究[J]．安徽中医学院学报，2004，24(5)：33．

[4] 张立明，何开泽，任治军，等．栀子中京尼平苷对CCl4急性小鼠肝损伤保护作用的生化机理研究[J]．应用与环境微生物学报，2005，11(6)：669．

[5] WANG G F，WU S Y，XU W．Geniposide inhibits high glucose-induced cell adhesion through the NF-kB signaling pathway in human umbilical vein endothelial cells[J]．Acta Pharmacol Sin，2010，31(8)：953．

[6] 李伟华，朱陵群，王硕仁，等．黄芩苷栀子苷对神经细胞缺氧缺糖．再灌注损伤的保护作用[J]．中国药学杂志，2004，39(5)：31．

[7] CAO H L，FENG Q，XU W，et a1．Genipin induced apoptosis associated with activation of the c-Jun NH2-terminal kinase and p53 protein in HeLa cells[J]．Biol Pham Bull，2010，33(8)：1343．

(责任编辑：李岚春)

Comparison of Geniposide in Gardeniae Fructus Processing

Shao Kaozhen1，Tan Meiying2，Zhan Lizhi3

(1.Nanhai District of Foshan City Seventh People's Hospital，Guangdong Foshan 528248；2.Guangdong Second Traditional Chinese Medicine Hospital,Guangdong Guangzhou 510095；3.Research Center of Guangzhou University of Chinese Medicine of Artemisia Annua，Guangdong Guangzhou 510405)

Objective:To analysis the content change of geniposide in Gardeniae Fructus processed.Methods:A HPLC method was developed. The chromatographic conditions are as follow: Agilent Zobax Eclipse XDB C18 (4.6 mm×250 mm, 5μm), acetonitrile-water (15:85) as mobile phase, detection wavelength at 238nm, the flow was 1.0ml/min, column temperature was 25℃.Results:The content of geniposide was lower after processing.Conclusion:Processing of gardeniae fructus conforms to Chinese Clinical Medicine.

Crude Gardeniae Fructus; Stir-baked Gardeniae Fructus;Geniposide

2014-03-24

邵考珍(1975-)，女 ，广东省佛山市南海区第七人民医院主管中药师， 研究方向为中药材的HPLC指纹图谱。

R284.1

A

1673-2197(2014)12-0015-02