癌症组织中miR-100的表达变化和靶点研究进展

周韶梅，盛 望，曾 毅，李泽琳

(北京工业大学生命科学与生物工程学院病毒药理室，北京100124)

1 miR-100简介

miR-100位于11q24.1，miR-99a位于21q11.1，两者的种子区序列完全相同，其余序列只一个碱基的差别，为同一家族。miR-100序列的种子区含有双GC对，在另一末端以TA结束，这种特点决定了它的靶点基因种类非常少，种子区的结合力强［1］。

2 对不同组织器官的研究

不同的组织器官，在胚胎生长、分化的过程中，逐渐形成自身独有的一套microRNA表达谱。在癌变过程中，microRNA的表达普会逐渐发生一些改变，但仍会保留来源组织的一些特征。所以不同组织来源的癌细胞会有它的特点microRNA表达谱。本综述以组织器官归类，对各研究组的报道进行分析。

2.1 食管癌

对101个术后组织样本和3个细胞系检测，在恶性组织中miR-100的表达量明显低于正常组织［2］。

2.2 口腔癌

在口腔龛位癌［3］和10例头、颈鳞状细胞癌组织样本中［4］，miR-100家族成员的表达量低调。

2.3 卵巢癌

10种人类挖空细胞卵巢癌细胞系中，miR-100表达量显著降低［5］。

2.4 子宫癌

在子宫内膜癌报道中，采用46例癌组织样本，31例非宫颈癌患者正常组织对照样本，48例癌症患者血液样本和14例非宫颈癌血液样本，发现miR-100、miR-99、miR-199b共表达性降低，癌组织与血浆中同步［6］。采用105个实验样本和20例对照样本。其中在实验样本中，20例感染人乳头瘤状病毒(HPV)的正常宫颈组织，43例宫颈内皮异常增生，42例宫颈癌组织。miR-100在宫颈异常增生和宫颈癌组织中均出现表达降低，认为与病程进展相关。将4个HPV感染的细胞系与HPV阴性细胞系比较，miR-100明显降低，但并未得到HPV的E6/E7会直接导致miR-100降低的实验结果［7］。

2.5 乳腺癌

检测12种细胞株，其中6种转移性较低乳腺癌的细胞株、4种高侵袭性的乳腺癌细胞系和2种非致瘤性、永生化的乳腺上皮细胞系，结果在恶性度较高的细胞株中miR-100明显升高，但未检测到因miR-100的变化而出现相应表达变化的靶点mRNA［8］。而有报道小鼠乳腺癌细胞株中miR-100的表达缺失［9］。

2.6 肾脏肿瘤

40位肾细胞癌患者术后组织检测miR-99a低表达［10］，但最近有报道miR-100的表达明显高于邻近正常组织，并且与肿瘤的进展、分期、转移成正比。高表达miR-100的患者，5年生存率明显降低［11］。

2.7 膀胱癌

126位患者的癌肿块相对于临近正常组织，miR-100表达量降低，与生存率正相关［12］。在64位膀胱癌患者的癌肿块和临近正常组织以及10个人的膀胱癌细胞株检测中，发现miR-100降低最为显著;不论侵润性与否都显著降低，有远处转移灶的明显低于原位非转移性的［13］。但有报道却是miR-99a，miR-100在非肌层侵润性的膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer:NMIBC)中降低，而在肌层侵润性的MIBC中表达增高［14］。

2.8 前列腺癌

49位原发性未转移患者的检测中miR-100低表达，明显低于良性前列腺肿瘤，与治愈率高度相关［15］。但有报道相比转移性的前列腺癌，在非转移性恶性度高的前列腺癌中，miR-100呈高表达状态［16］。使用 Kaplan-Meier曲线和 COX回归分析，发现高表达 miR-100的患者复发率是低表达的3 倍［17］。

2.9 胰腺癌

17例胰腺导管腺癌和11例导管内乳头状黏液瘤，15例癌旁无肿瘤赘生的正常组织，相对于良性赘生物，miR-100高表达于癌瘤组织中［18］。

2.10 肝癌

与周围非癌组织比较，15位患者的癌组织中，miR-100明显降低。对134个病例分析，降低的miR-100与病理等级、TNM分期、淋巴扩散、肿瘤复发等密切相关［19］。

2.11 肺癌

在非小细胞性肺癌中，miR-100表达降低。对110例患者的研究，临床生存率和病理恶化程度与miR-100 的表达降低成正比［20］。

2.12 血液病

106位急性髓系白血病患儿和20位正常儿童的骨髓单核细胞miR-100检测中，患儿的miR-100明显升高。高表达miR-100的患儿与高复发率，短存活期显著相关［21］。

3 miR-100的作用靶点和作用方式

目前检测到并验证的miR-100的靶点有:哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)［2，6，13，22］、polo 样激酶1(PLK1)［2，7，20，23］、胰岛素样生长因子 2(IGF2)［9］、成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)［24］，以1-25双羟基维生素D3依赖的作用方式抑制转录因子E2F3和PLK1［15］。观察到miR-100对细胞产生的生物学上的作用有:抑制细胞增殖，促进调亡，使肿瘤细胞停留于G1期［13］，miR-99a也使肿瘤细胞停留于 G1期［10］，使癌细胞停留于 G2/M 期［7，20］，但也有报道未检测到对细胞周期有调节作用［2］。在膀胱癌的实验中，发现FGFR3在缺氧诱导因子HIF-1α的帮助下使缺氧的癌细胞保持活力。缺氧使miR-100表达降低，导致FGFR3增加，故而肿瘤细胞得以增殖、血管形成。反推之miR-100可以降低肿瘤细胞对缺氧的耐受力［24］。但最近有报道miR-100同时又是致癌基因，通过抑制SMARCA5、BAZ2A和THAP2，致使对细胞周期的控制削弱，基因的不稳定性增加，致使肿瘤的复发率增高［22］，抑制SWI/SNF蛋白的表达，促进肿瘤复发［17］。

急性髓系白血病中［25］，miR-100的靶点是RBSP3的mRNA。RBSP3抑制细胞增殖，促使细胞进入分化。高表达的miR-100促进早幼粒细胞增殖而抑制其向粒细胞和单核细胞系的分化，同时miR-100调节G1/S的转化，阻止进入S期，通过抑制RBSP3阻断终末分化。

4 对应用miR-100的看法

在疾病诊断中的应用:多个研究组得出与生存率相关的结果，反映了疾病的病理分期、进展和转移，可做为预后诊断的参考指标［6，10－12，15］。但也有报道降低的miR-100虽与生存率的降低相关，但与肿瘤的TNM分期(国际通用的肿瘤分期系统)不相关［2］。同样存在相反看法，认为 miR-100增高，生存期短［17］。体内实验发现，miR-100抑制皮下和膀胱通道的肿瘤形成［13］。有报道与临床血清AFP含量和肿瘤的大小不相关［19］。

miR-100通过抑制mTOR增加了癌细胞对放射治疗的敏感性，增强癌细胞对RAD001(mTOR的抑制剂)的敏感度［5］。miR-100通过抑制 PLK1使肺腺癌细胞重建对Docetaxel(抗肿瘤药物多西他赛)的敏感性［23］。

5 总结

对实体瘤的报道，多数显示miR-100表达降低，人为调高miR-100的表达可以对肿瘤细胞起到抑制作用。但也有报道在肿瘤细胞中miR-100表达升高，且与肿瘤的复发正相关。在急性髓系白血病和胰腺癌中，目前对miR-100的报道都为表达量增高。miR-100表达量的多少与病理分期和病情进展的关系，不同研究组之间也存在着分歧。目前已被证实的miR-100的靶点有数种，对肿瘤细胞分别起到抑制增值、导致细胞周期停滞、促进调亡，增加癌细胞对放化疗的敏感性等作用。

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