利用胚胎移植技术生产肉用种羊
2014-04-14张志宏王贵满都拉胡斌内蒙古自治区通辽市家畜繁育指导站
文│张志宏 王贵 满都拉 胡斌(内蒙古自治区通辽市家畜繁育指导站)
胚胎移植技术作为现代生物繁殖技术,在肉用种羊生产中得到较好应用,但各地区应用效果差异较大,需要不断总结学习,完善提高。其影响因素有同期发情技术、超数排卵技术、移植操作技术、环境、饲养管理、品种、年龄等。内蒙古通辽地区近几年开始尝试利用胚胎移植技术生产肉用种羊,2013年10月进行了德国美利奴、萨福克、杜泊3个品种98只供体羊胚胎移植。将本次同期发情、超数排卵处理方法及效果和移植妊娠率进行了详细记录和统计分析,为进一步提高胚胎移植效果提供依据。
一、移植技术各环节处理方法
1.同期发情与超数排卵。
(1)供体羊的同期发情和超数排卵。采取阴道内放置CIDR海绵栓法。供体羊的超数排卵采用FSH(促卵泡素)递减注射,并配合注射PMSG(孕马血清促性腺激素)。具体方法如下:在放栓第10天开始连续注射FSH5~6次,每次间隔12小时,每2次递减5IU。第1次注射FSH的同时注射PMSG。第5次注射FSH的同时撤栓,肌肉注射PG(氯前列烯醇)。12小时后即第6次注射FSH之前,对供体母羊进行试情,对发情的供体羊颈静脉注射LH(黄体生成激素);没有发情的供体羊进行第6次注射FSH,12小时后试情,发情的供体羊颈静脉注射LH。准确记录发情时间,一般2次试情即可全部发情。药物用量见表1。
(2)受体羊的同期发情。与供体羊同时处理,同样采取阴道内放置CIDR海绵栓法。具体方法如下:在放栓第10天肌注PMSG,过36小时取栓,同时注射PG,每间隔12小时试情1次。一般2次试情即可全部发情。根据试情结果即发情时间不同进行编号,与供体羊进行匹配。
表1 同期发情和超数排卵所用激素使用剂量
表2 2013年同期发情和超数排卵用药一览表
同期发情所用药物因厂家、批次不同,效果不一样。2013年同期发情和超数排卵药品来源见表2。
2.供体羊人工授精。采用手术子宫角输精方法。对试情发情的供体母羊,12小时后人工授精。
3.胚胎采集、检验。供体羊人工授精48小时后,采用手术输卵管冲胚,进行胚胎冲洗、检验。冲胚液为新西兰进口。
4.受体羊的确定。受体羊同期发情处理后,有明显发情反应,手术观察正常排卵并形成功能黄体为合格移植受体。
5.移植。采用手术输卵管移植法。从供体采集的胚胎,经检验合格,马上移植到与供体同期发情相匹配的受体母羊输卵管。
二、观察方法
同期发情观察采用试情法。妊娠观察,受体母羊移植后2个情期不发情为妊娠。
三、结果
1.同期发情。供体同期发情率见表3。由表3可知,3个品种同期发情率均达到90%以上。经显著性T检验,差异不显著(P>0.05)。(注:统计用SAS软件)
2.超数排卵。超数排卵数见表4。3个品种超数排卵可用胚胎平均数分别为:萨福克6.2枚;杜泊8.4枚;德国美利奴9.3枚。经显著性T检验,3个品种头均冲胚数、可用胚胎数差异不显著(P>0.05)。
3.妊娠率。妊娠率见表5。3个品种妊娠率在60%以上。经显著性T检验,3个品种妊娠率差异不显著(P>0.05)。
四、讨论分析
1.同期发情与超数排卵。同期发情与超数排卵是胚胎移植的关键技术,同期发情质量影响供体、受体生理状态一致性;超数排卵技术影响胚胎数量和质量。此次胚胎移植同期发情率90%以上,供体和受体同步差在10小时内,说明同期发情与超数排卵处理方法可行。
2.不同品种超数排卵可用胚胎数。3个品种超数排卵可用胚胎平均数差异不显著。但是德国美利奴、杜泊平均可用胚胎数高于萨福克,德国美利奴最高。说明德国美利奴、杜泊在通辽地区有较高的胚胎移植价值。
3.妊娠率。3个品种妊娠率均在60%以上,与国内平均水平接近。说明此次供体、受体体况较好;同期发情羊处理适当;移植操作技术趋于成熟。
4.关于超数排卵药物用量。超数排卵FSH(促卵泡素)用量决定超数排卵效果。此次遵循的原则是:一是体重增加,FSH用量增加。二是初产母羊比经产母羊对FSH敏感,用量稍减。此次超排,对于初产的母羊,基本用145~155IU,用量可能偏低,导致青年母羊超数排卵数量较小,适当加量可能会提高一些。
五、建议
一是供体羊超数排卵用药量严格按体重分组,再根据经产、初产和超数排卵史做适量调整。二是做好供体羊体重和超数排卵用药量详细记录,这是下次超数排卵用药量的最好参考。三是预防输卵管堵塞。手术操作手法要轻柔、熟练,减少对输卵管的损伤,同时做好消炎,防止输卵管堵塞,保证母羊正常繁殖年限。
表3 供体羊同期发情率
表4 超数排卵数统计
表5 三个品种移植妊娠率统计