Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪检测体液标本性能评价研究

马 科，张娅娟，冯 博，左路广，詹明华

·质控与安全·

Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪检测体液标本性能评价研究

马 科，张娅娟，冯 博，左路广，詹明华

目的：评测Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪日常检测体液标本的能力。方法：在体液模式下检测脑脊液、胸水、腹水标本，对Sysmex XE-5000本底计数、精密度、携带污染率、线性等参数以及与手工计数法比对进行评价研究。结果：Sysmex XE-5000检测体液标本的本底计数符合厂商要求；精密度高（CV%＜20%）；携带污染率低于0．5%；线性良好（0．95＜a＜1．05，相关系数r＞0．99），与手工计数法有着良好的相关性（r＞0．90）。结论：Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪检测体液标本性能良好，适用于日常临床体液标本的检测。

全自动血细胞分析仪；体液检测；性能评价

0 引言

临床常规检测的体液主要有脑脊液、胸水、腹水、关节穿刺液等，对这些体液标本成分进行分析，会在患者健康状况评估、疾病诊断、治疗及预后、发病机制的研究等方面发挥重要的作用。如分类计数穿刺液中的白血胞可以帮助区分炎性或非炎性关节肿胀；计数脑脊液中的白细胞、红细胞可辅助诊断脑膜炎、脑出血、脑肿瘤；检测胸腹水鉴别其为渗出液还是漏出液可指导临床用药，辅助诊断肝硬化、肝癌等疾病[1-3]。综上，建立一套快速、准确检测体液标本的系统显得尤为重要。传统计数体液标本的金标准方法为在显微镜下手工计数，但此方法存在一些缺陷，主要有：（1）标本所含细胞数量过多时需稀释后计数，计数准确性降低，容易产生较大偏差。（2）检测费时，从标本送检到发出报告所需时间过长。（3）对操作人员的技术水平要求高，经验丰富与不丰富的检验人员所发报告差异较大。（4）不能24 h待检，对于急诊标本随时送检的要求不能满足[4]。随着流式细胞术的广泛应用，临床上开始尝试使用一些尿液或血液分析仪检测体液标本，使用的仪器主要有Advia 120、Advia 2120、Syemex uf-1000i、Syemex XE-2100、Syemex XE-5000、Mindray BC-6800、Abbott Cell-Dyn Sapphire等[5-6]，这些仪器可以弥补手工计数法检测体液的缺陷，具有检测准确、重复性好、检测速度快、费用低等优势。本研究使用Syemex XE-5000血细胞分析仪检测体液标本，评价其检测脑脊液、胸水、腹水的能力，同时与手工计数法做比对，探讨Syemex XE-5000日常检测体液标本的可行性。

1 材料与方法

1.1 标本来源

河北北方学院附属第一医院2013年8～10月住院及门诊患者体液标本，所有患者均知情同意，符合本院医学伦理委员会标准。标本容器为EDTA-K2抗凝管。

1.2 仪器与试剂

Sysmex XE-5000血细胞分析仪，原装配套试剂和校准品，e-CHECK（XE）高值、中值质控品；OLYMPUS CX-41双目显微镜；标准牛鲍计数板、BASO染液。

1.3 检测方法

1.3.1 Syemex XE-5000检测

仪器按要求进行日常保养及维护，检测前对仪器进行校准。实验期间每天采用e-CHECK高、中值质控物对仪器进行监测，确保仪器处于正常工作状态，且性能符合规定要求。所有标本检测前轻轻颠倒混匀6～8次，采用开盖方式测量。依据Sysmex XE-5000操作指南，应用体液模式进行本底计数、精密度、携带污染率、线性分析、比对实验。仪器采用DIFF通道使用半导体激光流式细胞术结合核酸荧光染色技术的原理计数白细胞总数，并将白细胞分为单核细胞（MN）和多核细胞（PMN）2类；红细胞计数采用鞘液电阻抗法[7-8]。

1.3.2 手工计数检测

采用标准牛鲍计数板，按照《全国临床检验操作规程（第三版）》中的体液检查方法进行细胞计数。由2名具有多年临床检验工作经验的检验人员分别计数细胞，取其平均值作为最终计数结果。将体液离心推片，经BASO染液染色，进行白细胞分类计数。

Syemex XE-5000检测和手工计数检测均在标本留取后1 h内完成。

1.4 统计学分析

对实验数据应用IBM SPSS Statistics 19和Microsoft Excel 2007进行记录、统计分析。

2 实验过程

2.1 本底计数

用Sysmex XE-5000稀释液作为样本，在体液模式下连续测定3次，取3次测试结果中各项目最大值作为检测结果。仪器生产厂商制定的标准为：白细胞≤1×106/L，红细胞≤3×109/L。

2.2 精密度检测

取胸水、腹水中白细胞、红细胞数量高、中、低值不同的标本各1份，脑脊液低值标本1份。高值标本白细胞＞10 000×106/L，红细胞＞100×109/L；中值标本白细胞＞1 000×106/L，红细胞＞20×109/L；低值标本白细胞＜100×106/L，红细胞＜20×109/L。由于受脑脊液标本限制，满足高、中值要求的标本留取量不足2 mL，实验中脑脊液为低值标本。将标本轻轻颠倒混匀6～8次，在体液模式下连续测定11次，取后10次测定结果，记录数据计算白细胞、红细胞计数（高、中、低值）的均值、标准差和变异系数（CV%）。

2.3 携带污染率

取白细胞、红细胞高值标本（实验选用胸水）和白细胞、红细胞低值标本（实验选用脑脊液）各1份，混匀标本，在体液模式下连续测定3次胸水标本，依次记录为H1、H2、H3，再连续测定3次脑脊液标本，依次记录为L1、L2、L3，计算白细胞、红细胞携带污染率。携带污染率计算公式为：携带污染率（%）=|L1－L3|/（H3－L3）×100%。

2.4 线性分析

取新鲜高值标本1份，用Sysmex XE-5000稀释液按10%、20%、40%、60%、80%的比例稀释。将标本混匀，体液模式下对高值标本及每个稀释度标本连续测定3次，分别记录各浓度白细胞、红细胞数平均值。将平均值作为实测值，与稀释浓度理论值作比较，进行线性回归分析。

2.5 Sysmex XE-5000检测与手工计数检测比对

临床抽取33份体液标本，其中胸水15份，腹水8份，脑脊液10份。每份标本取2．0 mL，装入EDTAK2抗凝管，轻轻颠倒混匀6～8次，分成2份分别用Sysmex XE-5000和手工计数检测，检测在1 h内完成。Sysmex XE-5000检测记录白细胞、红细胞细胞总数和白细胞分类MN、PMN数值。手工计数法检测由2名具有多年临床检验工作经验的检验人员分别计数红细胞、白细胞总数，取其平均值作为最终计数结果。将标本离心推片，经BASO染液染色后进行白细胞分类计数。将Sysmex XE-5000和手工计数测得的白细胞、红细胞、MN和PMN数值进行线性回归分析及配对t检验分析。

3 结果

3.1 本底计数

仪器本底计数结果：白细胞=0×106/L、红细胞= 0×109/L，由结果可知Sysmex XE-5000血细胞分析仪本底计数符合Sysmex厂商制定的标准（白细胞≤1×106/L、红细胞≤3×109/L）。

3.2 精密度检测

结果显示，3种体液标本高、中、低值计算的CV%值均低于20%标准，见表1。

表1 白细胞、红细胞计数精密度检测结果

3.3 携带污染率

携带污染率检测结果见表2。结果显示，白细胞携带污染率为0．008%，红细胞携带污染率为0%，小于仪器设定的要求（携带污染率＜0．5%）。由此可知仪器携带污染率符合标准。

表2 携带污染率检测结果

3.4 线性分析

Sysmex XE-5000血细胞分析仪线性分析试验检测结果显示线性良好，如图1、2所示。

图1WBC线性分析

图2 RBC线性分析

3.5 Sysmex XE-5000与手工计数检测比对

运用线性回归、配对t检验方法从白细胞、红细胞计数，MN、PMN分类4个方面对Sysmex XE-5000与手工计数检测做比对分析，Sysmex XE-5000与手工计数检测具有良好的相关性（r＞0．90），2种方法检测标本无显著性差异（P＞0．05），如图3所示、见表3。

4 讨论

图3 Sysmex XE-5000与手工计数检测WBC、MN、PMN、RBC比对结果

表3 Sysmex XE-5000与手工计数检测体液均值比较

对患者胸水、腹水、脑脊液等体液标本进行准确计数分类，在疾病诊断、治疗及预后评估方面具有重要意义。目前，国内多数临床实验室依然采用手工显微镜计数体液细胞，但由于计数精密度不高、易产生较大误差，且操作繁琐、费时费力，不能满足临床要求。因此，用自动化仪器替代传统的手工显微镜计数法符合现代临床检验工作的需要。本研究采用Sysmex XE-5000血细胞分析仪对体液标本进行检测，实验结果证实Sysmex XE-5000对体液标本检测的本底计数、精密度、携带污染率和线性分析均在允许范围内，同时与手工计数法有着良好的相关性。相对于其他血细胞、尿液分析仪，Sysmex XE-5000计数体液细胞具有以下优势：（1）除了血液模式外，专门具有体液模式。（2）通过DIFF通道计数白细胞，结果更加准确。（3）白细胞计数不包含间皮细胞、巨噬细胞和肿瘤细胞。间皮细胞、巨噬细胞在胸腹水中含量较高，血细胞分析仪容易错误计数成为白细胞。Sysmex XE-5000研究项目中可提供体液高荧光细胞计数及比率等参数，高荧光细胞与肿瘤细胞密切相关[9-10]，便于开展科研工作。（4）多数血细胞计数仪有检测50×106/L白细胞低值限制[11-12]，对于细胞含量低的体液标本，Sysmex XE-5000体液模式计数更加准确。

5 结语

Sysmex XE-5000血细胞分析仪操作简便、速度快、精密度高，且可避免因操作人员不同而导致的差异，可提高检测效率，所需检测标本量小，只需150 μL的体液标本，在日常工作中可以替代传统手工计数法检测体液标本。但对于脑脊液等特殊标本，多数标本的白细胞数值通常小于50×106/L。从精密度实验中可知，检测胸水、腹水、脑脊液低值标本CV%虽在要求范围内，但已接近（CV=20%）上限；而脑脊液白细胞的参考值范围为成人0～10×106/L，儿童0～15× 106/L，因此对于白细胞＜20×106/L的体液标本[13]，Sysmex XE-5000并不能完全替代手工计数法检测体液标本，应增加检测次数取其测量平均值作为检测结果，以减少测量误差。

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（收稿：2014-02-20 修回：2014-06-12）

Evaluation of Sysmex XE-5000 fully automated hematological analyzer for body fluids

MA Ke,ZHANG Ya-juan,FENG Bo,ZUO Lu-guang,ZHAN Ming-hua
（The First Affiliated Hospital of Hebei North University,Zhangjiakou 075000,Hebei Province,China）

ObjectiveTo evaluate the function of Sysmex XE-5000 fully automated hematological analyzer in testing body fluids．MethodsUsing the BF mode to measure cerebrospinal fluid,pleural fluid and peritoneal fluid,blank test, precision,carryover,linearity and comparison were analyzed and the performance of Sysmex XE-5000 was evaluated．ResultsThe analyzer had the blank test coincident with the requirements of the instrument manufacturer,high precision (CV%＜20%),carryover lower than 0．5%,high linearity(0．95＜a＜1．05,and the correlation coefficient r＞0．99),and test results highly consistent with those by manual operation(r＞0．90)．ConclusionSysmex XE-5000 fully automated hematological analyzer can be widely used in clinical detection．[Chinese Medical Equipment Journal，2014，35（9）：90-93]

fully automated hematological analyzer;body fluid detection;performance evaluation

R318．6；TH776

A

1003-8868（2014）09-0090-04

10．7687/J．ISSN1003-8868．2014．09．090

河北省高等学校科学技术研究青年基金项目（Q2012141）

马 科（1977—），男，主管检验师，主要从事临床检验方面的研究工作，E-mail：mkzyj@sohu．com。

075000河北张家口，河北北方学院附属第一医院（马 科，张娅娟，冯 博，左路广，詹明华）