乙肝病毒抗原抗体与HBV—DNA的临床研究

2014-03-21张业霞金玉怀

中国现代医生 2014年6期

张业霞　金玉怀

[摘要] 目的探讨前S1抗原、前S1抗体、前S2抗原、前S2抗体、HBV五项指标和DNA及肝功之间的相互关系及意义。方法对急性和慢性乙肝患者各30例的初诊及3个月、6个月血清中的HBV上述指标联合检测。结果在急性乙肝早期，前S1抗原、前S2抗原、HBsAg、HBeAg的检测与DNA检测高度一致，但在晚期DNA仍是最佳检测手段，其他单一指标的阳性率均低于DNA检测。在慢性乙肝的不同时期，前S1抗原与DNA检测高度一致，其余各项检测方法均未达到理想的效果。结论在急性乙肝早期，前S1抗原、前S2抗原、HBsAg、HBeAg的检测可作为DNA检测的替代方法，但在晚期仍要依靠DNA的检测，在慢性乙肝的不同时期，前S1抗原与DNA检测高度一致，在一定程度上可替代DNA，但为避免漏诊，需综合考虑多项指标。

[关键词] HBV-DNA；前S1抗原与抗体；前S2抗原与抗体

[中图分类号] R512.6+2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）06-0048-03

HBV感染呈全世界流行，我国是高发区，HBV感染者约有9300万，危害极大[1]。HBV传统方法的检测主要依靠HBV五项指标来判断感染情况，而近几年国内外对前S1抗原和抗体及前S2抗原和抗体的研究进展较快，目前认为前S1和前S2蛋白在HBV附着和入侵肝细胞的机制中起着重要作用，可作为HBV复制的标志物[2，3]。在乙肝检测的众多资料中，多项指标的联合检测报道并不多，尤其是缺乏这方面的纵向观察。本研究通过对HBV前S1抗原与抗体、前S2抗原与抗体、HBV五项指标及HBV-DNA和患者ALT的联合检测，对其结果进行分析比较，探讨前S1抗原和抗体、前S2抗原和抗体、HBV五项指标和DNA及肝功能在同一批患者中不同病期的发展变化及临床意义，这将对临床正确选择乙肝病毒的检测指标和判断患者病情具有重要参考价值。

1 材料与方法

1.1 材料

收集我市某医院2010～2011年传染科门诊及住院病房乙肝患者血清标本共60例（急性30例，慢性30例），其中，急性乙肝男18例，女12例，平均年龄38岁，慢性乙肝男16例，女14例，平均年龄41岁。分别检测其HBV-DNA、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、前S1抗原和抗体（PreS1Ag、PreS1Ab）、前S2抗原和抗体（PreS2Ag、PreS2Ab）和ALT，在此过程中记录每个患者的具体住址和联系方式，并依次跟踪检测两次，时间间隔为3个月，观察患者各项指标的变化；HBV-DNA核酸定量（PCR-荧光探针法）检测试剂盒购自达安基因股份有限公司（中山大学），HBV前S1、前S2抗原的诊断试剂盒购自北京贝尔生物工程有限公司，HBV前S1抗体的诊断试剂盒购自上海阿尔法生物技术有限公司，HBV前S2抗体的诊断试剂盒购自北京肝炎试剂研制中心，HBV五项指标的诊断试剂盒购自维坊三维生物工程有限公司。FaxStat 2100酶标分析仪购自美国倍肯公司；PCR仪由德国Roche公司提供。

1.2 方法

用ELISA法检测HBV五项指标、前S1及前S2的抗原和抗体；HBV-DNA采用聚合酶链反应技术（PCR）；用全自动生化分析仪检测患者肝功ALT，所有操作均严格按说明书进行。

1.3 统计学处理

采用SPSS13.0软件对上述检测结果进行统计分析，用配对χ2检验比较其阳性率，P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 急性乙肝检测结果

第一次检测中，HBV-DNA、PreS1Ag、PreS2Ag、HBsAg及HBeAg的阳性率均为100%，几项指标完全一致。第二次检测中，PreS1Ag、PreS2Ag、HBsAg和HBeAg的阳性率分别是30.0%、36.7%、50.0%和13.3%，而此时DNA阳性率为93.3%，与DNA检测相比，均有显著差异。第三次检测中，DNA阳性率为30.0%，而后四项抗原其阳性率分别为3.3%、6.7%、23.3%和6.7%，此时PreS1Ag、PreS2Ag和HBeAg的阳性率与DNA阳性率之间差异亦有统计学意义。见表1、2。

2.2 慢性乙肝检测结果

慢性乙肝第一次检测中，DNA的阳性率为73.3%，PreS1Ag、PreS2Ag、HBsAg、HBeAg阳性率分别为90.0%、93.3%、100%、60.0%，PreS1Ag、HBeAg与DNA阳性率之间均无统计学差异；第二次检测结果中，DNA阳性率下降为63.3%，此时后四项抗原其阳性率分别下降为73.3%、63.3%、86.7%及33.3%，PreS1Ag、PreS2Ag与DNA阳性率之间均无统计学差异，但HBsAg、HBeAg与DNA阳性率之间有统计学差异；第三次检测中，DNA阳性率下降为40.0%，后四项抗原的阳性率亦均下降，其结果分别为33.3%、26.7%、76.7%和13.3%，PreS1Ag、PreS2Ag与DNA阳性率之间，无统计学差异，但是HBsAg、HBeAg与DNA阳性率之间，有统计学差异。见表3、4。

3 讨论

HBV是一种嗜肝DNA病毒，它在1970年由Dane在患者的血清中首次发现，并有三种存在形式：大球形颗粒、小球形颗粒和管形颗粒[4]。本研究通过对30例急性和30例慢性乙肝患者初诊及3个月和6个月血清标本中的HBV PreS1Ag与PreS1Ab、PreS2Ag与PreS2Ab、HBV五项指标及HBV-DNA和ALT进行联合检测，进而探讨这些指标在同一批患者不同发病过程中的变化及其临床参考价值。

在急性乙肝的共三次检测结果中，本研究做了大三阳和小三阳的合并阳性率与DNA阳性率的比较分析（表2）。结果显示，在第一次检测中，大三阳和小三阳的五项指标与DNA检测一致率为100%，但在第二次及第三次检测结果中，二者均有统计学差异。表明随着疾病的进展和病程的延长，DNA的检测要比大、小三阳的检测更有意义。这与临床结果报道一致，再次证实了DNA检测是判断病毒复制的金标准。endprint

慢性乙肝病期较长，患者临床症状轻重不等，可以反复发作，迁延不愈。有文献报道，认为PreS1Ag此项指标反映病毒复制更加敏感，是识别慢性乙肝患者发生前C区变异后抗HBe阳性但仍存在病毒复制特别有价值的指标，并对指导抗病毒治疗有重要的临床意义[11，12]。在本研究中，慢性乙肝患者的不同时期，PreS1Ag阳性率均与HBV-DNA检测结果无统计学差异，可一定程度上用于判断患者体内病毒复制情况，这与临床报道结果一致。但其余几项检测指标均未表现出非常突出的优势，而是呈现出一定的变化，因此对慢性乙肝患者需综合釆用多项检测指标以免漏诊，并能准确掌握患者病情。

综上所述，在急性乙肝早期，HBV-DNA的检测是判断病毒复制及患者传染性最可靠的依据，PreS1Ag、PreS2Ag、HBsAg、HBeAg在此阶段与DNA检测高度一致，因此在无条件开展DNA检测的基层医院可作为DNA检测的替代方法。在晚期阶段，HBV-DNA的检测仍然是阳性率最高的检测手段，但是HBV其他血清学检测指标，单一指标的阳性率均低于DNA检测，因此，为准确判断患者体内病毒复制和预后等情况，需多项指标综合考虑更为适宜。在慢性乙肝患者的不同时期，PreS1Ag与DNA检测高度一致，其余各项检测方法均未达到理想的效果，因此亦需全面釆用多项检测指标，从而避免漏诊的出现。

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（收稿日期：2013-11-18）endprint