高效液相色谱法检测 (S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐的纯度

郝玉红 朱力敏 薛韧婕 / 上海市计量测试技术研究院

高效液相色谱法检测 (S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐的纯度

郝玉红 朱力敏 薛韧婕 / 上海市计量测试技术研究院

用高效液相色谱法定量分析(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐的纯度。用Agilent 1100型高效液相色谱仪，色谱柱Xterra C18（5 µm，4.6 mm×250 mm），流动相为20%乙腈—80%，缓冲液: 1000 mL水+ 5.0 g庚烷磺酸钠；检测波长为210 nm，流量为0.7 mL·min-1，柱温30 ℃，对(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐纯度进行定量测定。相对标准偏差0.15%，标准回收率99.8%～100.2%，方法重复性好，定量准确度高。

高效液相色谱法；(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐

0 引言

(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐（简称ABAH），为白色或类白色固体粉末，主要用于抗癫痫、抗惊厥药物中间体。本文采用高效液相色谱法测定其含量，方法可靠，操作简单，灵敏度高，重现性好，为控制(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐的质量提供了切实可行的方法。

1 材料与方法

1.1 材料、仪器和试剂

材料：样品(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐由杭州瑞旭产品技术有限公司提供；

高效液相色谱仪：美国安捷伦科技有限公司Agilent 1100，配QuatPump (G1311A)四元梯度输液泵，VWD (G1314A)可变波长紫外检测器，自动进样器；

水为二次蒸馏水；乙腈为色谱纯；(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐标准品为进口品。

1.2 分析方法

1.2.1 色谱条件

色谱柱：Xterra C18，5 μm，4.6 mm×250 mm；柱温：30 ℃；流量：0.7 mL·min-1；进样量：20 μL；检测波长：210 nm；流动相：A：缓冲液: 1 000 mL水+ 5.0 g庚烷磺酸钠；B：乙腈。

1.2.2 标准溶液的制备

精密称取干燥至恒重的(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐标准品50 mg，置50 mL容量瓶中，加流动相配制成质量浓度为1 000 mg·L-1的标准溶液。取适量经针式过滤器过滤后，备用。

1.2.3 试样溶液的配制

与1.2.2同样方法配制试样。

1.2.4 测试步骤

按1.2.1所列色谱条件，待仪器稳定后，注入20 μL经1.2.2处理好的已知纯度的标准溶液，根据其已知浓度和测出的色谱峰面积，计算出校正因子，然后再按同样的方法进行试样溶液，进行试样纯度测定。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

使用紫外分光光度计，通过对样品溶液的波长扫描发现，(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐在波长210 nm处有特征峰，遂选检测波长为210 nm。

2.2 流动相的选择与方法优化

(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐具有很好的水溶性和较强的极性。初筛仪器条件时，以10%乙腈-90%缓冲液（1 000 mL水+ 5.0 g庚烷磺酸钠）的流动相比例进行试验，发现试样保留时间仅3.7 min（如图1所示），在液相柱上基本没有保留。为了更好地分离试样和杂质，重新调整流动相初始比例为20%乙腈，保留时间延长至5.7 min（如图2所示），在保证试样和杂质、溶剂分离度的前提下，峰型尖锐，对称性好。因此，确定以20%乙腈-80%缓冲液为流动相比例。

图1 10%乙腈为流动相的(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐的高效液相色谱图

图2 20%乙腈为流动相的(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐的高效液相色谱图

2.3 精密度试验

使用该分析方法对3个试样各进行5次测定，RSD在0.12%～0.18%之间，精密度高，重复性好。

2.4 回收率试验

取相同量的同一批(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐试样6份，分别加入精密称量的(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐标准品适量，进行测定，测得(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐回收率在99.8%～100.2%之间。

3 结语

采用C18柱，以20%乙腈-80%缓冲液（1 000 mL水+5.0 g庚烷磺酸钠）为流动相的比例，检测波长210 nm,流速0.7 mL·min-1，柱温30 ℃的色谱条件下，对(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐纯度进行测定。本方法简便、快速、结果可靠而且重复性好，可作为(S)-2-氨基丁酰胺盐酸盐常规检测方法。

[1] 于世林. 高效液相色谱方法及应用[M]. 北京: 化学工业出版社, 2000.

[2] 卢佩章, 张玉奎, 梁鑫淼. 高效液相色谱法及其专家系统[M]. 沈阳:辽宁科学技术出版社, 1992.

[3] 朱彭龄, 云自厚, 谢光华. 现代液相色谱[M]. 兰州: 兰州大学出版社, 1989.

Purity of （S）-2-Aminobutyramide hydrochloride by high performance liguid chromatograph

Hao Yuhong，Zhu Limin，Xue Renjie
（Shanghai Institute of Measurement and Testing Technology）

Purity analysis of (S)-2-Aminobutyramide hydrochloride was established by high performance liquid chromatography with Agilent 1100, Xterra C18（5 μm, 4.6 mm×250 mm）column, mobile phase was acetonitrile-water, detection wavelength was 210 nm, flow rate was 0.7 mL·min-1, column temperature was 30 ℃. The method showed repeatability and relative standard deviation was 0.15%, and the standard recoveries were 99.8%-100.2%. These quantitative results showed high accuracy.

high performance liguid chromatograph；(S)-2-Aminobutyramide hydrochloride；purity