食物源蛋白高F值寡肽的制备及应用研究进展

韦荣编，黄 程，罗红宇，宋 茹,*

（1.浙江海洋学院海洋科学与技术学院，浙江 舟山 316022；2.浙江海洋学院食品与医药学院，浙江 舟山 316022）

食物源蛋白高F值寡肽的制备及应用研究进展

韦荣编1，黄 程2，罗红宇2，宋 茹2,*

（1.浙江海洋学院海洋科学与技术学院，浙江 舟山 316022；2.浙江海洋学院食品与医药学院，浙江 舟山 316022）

寡肽一般由3～9个氨基酸残基组成，高F值寡肽是指寡肽混合物中支链氨基酸（亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸）与芳香族氨基酸（苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸）的物质的量比值（F值）大于20的肽，研究表明高F值寡肽具有多种生理活性。本文综述了食物源蛋白高F值寡肽制备原料选择、主要制备工艺及其生理活性研究进展，并对其未来研究趋势进行展望。

食物源蛋白；高F值；寡肽；酶解；生理活性

高F值寡肽（F值＞20）是由3～9 个氨基酸残基所组成的小肽混合物，F值是指混合物中支链氨基酸（亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸，简称BCAA）与芳香族氨基酸（苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸，简称AAA）的物质的量比值，是为了纪念德国著名学者Fischer在20世纪70年代提出的“伪神经传递质假说”而命名的[1-2]。1976年Yamashita等[3]利用胃蛋白酶和链霉蛋白酶水解鱼蛋白和大豆分离蛋白制备低苯丙氨酸含量寡肽液的研究，被认为是高F值寡肽制备研究的最早报道。寡肽与游离氨基酸和蛋白质相比，具有渗透压低、抗原性低等优点，所以更容易被机体吸收利用[4-6]。近年来研究发现一些寡肽或肽类混合物常具有多种生物活性，如：美丽球花豆（Parkia speciosa）碱性蛋白酶水解液中分子质量小于10 ku的肽组分有抗氧化和降压作用[7]，从谷物的副干酪乳酸杆菌（Lactobacillus paracasei）Fn032发酵液中分离得到抗氧化和抑菌活性小肽等[8]。氨基酸种类和含量会影响肽或蛋白水解液的生物活性，一般疏水氨基酸和支链氨基酸残基含量高的肽往往具有较强的抗氧化和降压活性[7]，而有抑菌和抗肿瘤活性的肽常含有一些荷电氨基酸等等[9]。高F值寡肽是一类富含支链氨基酸的小肽混合物，且亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸具有较强的疏水作用，所以高F值寡肽应具有多种生物活性。实际上高F值寡肽的应用已从最初的保肝护肝、辅助肝性脑病及苯丙酮尿症治疗延伸到抗疲劳、抗衰老及其他生物活性领域，并且不断有新发现。所以，高F值寡肽研究将是活性肽热点研究领域之一，本文主要从食物源蛋白高F值寡肽的制备和应用对其研究进展进行了概述。

1 高1 F值寡肽制备原料

国外学者制备高F值寡肽选用的原料主要是一些植物性蛋白和乳源性蛋白，1991年Tanimoto等[10]利用玉米醇溶蛋白制备出一种无苦味的高F值寡肽产品，同年Adachi等[11]报道了一种酪蛋白高F值寡肽。随后，葵花籽分离蛋白[12]、芸薹蛋白[13]等被陆续报道用作制备高F值寡肽。虽然，国内对高F值寡肽的研究稍晚于国外，但对玉米蛋白高F值寡肽进行了系统深入研究[14-20]，而且用于制备高F值寡肽的原料更加多样化，如：刘静波等[21-22]以来源丰富的蛋清蛋白为原料进行高F值寡肽制备工艺研究；汪丹楣等[23]采用鲮鱼肉蛋白作为原料，并对胃蛋白酶水解鲮鱼蛋白制取高F寡肽第一步酶解工艺进行了系统研究和优化；周敏华等[24]以近江牡蛎为原料，开发出F值大于20的寡肽混合物，而且确定该寡肽分子质量范围为800～1 450 u。此外，一些食品加工副产物，如：魔芋飞粉[25]、米糟[26-27]、猪血蛋白[28]、贝肉蛋白[29-30]、金枪鱼碎肉等[31-32]也可用于制备高F值寡肽。除了上述的单一动植物蛋白外，制备高F值寡肽的原料也可用复配型蛋白，如：何慧等[33]将大豆蛋白和玉米蛋白混合，再用碱性蛋白酶水解得到高F值寡肽液。

从理论上来讲，所有食物源动植物蛋白均可用作高F值寡肽的制备原料，但是针对性地选择BCAA/AAA比值高的原料将会有助于简化寡肽液后续脱芳处理（高F值化）过程，也有助于减少高F值化过程中支链氨基酸的损耗，进而提高产品的得率。因此，在选择高F值寡肽制备原料时，最好先进行原料氨基酸组成分析来判定原料是否合适，例如：玉米蛋白支链氨基酸所占比例为23.79%，支链氨基酸/苯丙氨酸的比值高达4.80，这两项综合评价指标要远高于谷类作物中的稻谷、小麦、高粱和油料作物中的大豆、蚕豆、扁豆，所以玉米蛋白非常适合制备高F值寡肽[34]。

2 食物源蛋白高F值寡肽制备主要工艺

目前高F值寡肽的制备主要采用酶解法，蛋白质酶解法有反应条件温和，反应过程容易控制等优点[34]，高F值寡肽制备工艺流程如图1所示。

图1 高 1 F值寡肽制备工艺流程Fig.1 Schematic flowchart for preparation of high Fischer ratio oligopeptide

2.1 酶解

高F值寡肽的制备可以采用单酶水解和复合酶水解两种方法，单酶水解法目前仅见胰酶水解牡蛎蛋白和马氏珠母贝蛋白的研究，但单酶水解液需经过活性炭吸附和凝胶过滤分离两步纯化处理才能得到F值大于20的寡肽组分[24,29-30]。复合酶解法主要采用二步酶解，第一步酶解将原料蛋白中芳香族氨基酸构成的肽键切开，降解大分子蛋白为小分子肽类混合物，同时尽量将芳香族氨基酸残基暴露出来，常用蛋白酶有胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶等[23,31-32,35]；第二步酶解将肽链中已经暴露出来的芳香族氨基酸从C端或N端切掉，生成游离型芳香族氨基酸，以利于后续芳香族氨基酸去除（即高F值化），支链氨基酸大部分还保留在寡肽链上，常用酶有木瓜蛋白酶、羧肽酶、风味蛋白酶等，经过二步酶解法得到的蛋白酶解液一般经过一次脱芳化处理即可得到F值大于20寡肽，二步酶解法是目前高F值寡肽制备主要方法。

但是，不论是单酶法还是复合酶法，采用酶解法制备高F值寡肽除了选择适宜的蛋白酶外，水解条件的控制对寡肽液中肽及氨基酸组成也有重要影响。蛋白质的水解程度可以用水解度（degree of hydrolysis，DH）来判定，DH值小表示蛋白质还未充分水解，生成的小肽及游离氨基酸量少，而DH值过大则混合物可能主要由游离氨基酸组成[36]。食物源蛋白酶解制备高F值寡肽的酶解程度可用DH值或与DH值有关的指标来评价，其中国内学者对高F值寡肽的酶解条件优化进行了详细研究，如：王海波等[1]用玉米蛋白的碱性蛋白酶（第一步酶）水解液为出发底物，以水解液中氨基酸氮的含量为指标，优化得到木瓜蛋白酶（第二步酶）的水解条件为pH 6.5、酶添加量为4.5%、水解温度45 ℃、水解时间4 h。刘静波等[21]在蛋清F值寡肽制备酶解工艺中以DH为指标，分别优化出内切酶碱性蛋白酶的水解条件为pH 11、温度45 ℃、[E]/[S]为1.04%、水解时间5 h；外切用酶风味蛋白酶的水解条件为pH 7.5、水解温度60 ℃、[E]/[S]为3.3%、水解时间5 h。宋春丽等[37]采用碱性丝氨酸蛋白酶和蛋白酶II定向酶解大豆分离蛋白制备高F值大豆寡肽时，研究了维持碱性丝氨酸蛋白酶最适pH值时间对蛋白质回收率、蛋白质转化率、酸溶性氮得率、灰分含量和分子质量分布影响，确定了碱性丝氨酸酶解最适pH值时间维持30 min效果要好于3.5 h的效果。虽然国外对高F值寡肽酶解工艺条件优化研究较少，但是采用固定化蛋白酶制备高F值寡肽的研究要领先于国内，固定化酶可重复使用，有利于降低高F值寡肽的制备成本，Pedroche等[13,35]用活化的琼脂糖凝胶固定化胰蛋白酶、糜蛋白酶和羧肽酶为工具酶分别制备酪蛋白和芸薹蛋白高F值寡肽。

2.2 高F值化

酶解法制备的高F值寡肽混合液含有大量游离芳香族氨基酸和少量其他游离氨基酸，对寡肽液进行脱芳处理，即高F值化，才能提高寡肽的BCAA/AAA比值（F值＞20），目前常用的高F值化方法主要有吸附法和过滤分离法。

2.2.1 吸附法

根据寡肽液中的支链氨基酸和芳香族氨基酸对吸附介质的吸附特性不同而分离，常用方法是活性炭吸附法，该方法成本低，非常适合工业化应用[14]。国内寡肽的高F值化处理主要采用活性炭吸附法，但是活性炭对氨基酸的吸附受氨基酸存在体系和氨基酸自身性质影响，而且不同的活性炭种类吸附氨基酸的特性也不同。郑惠娜等[29]研究发现活性炭对马氏珠母贝胰酶水解液中结合态芳香族氨基酸吸附作用强于游离态芳香族氨基酸，而且活性炭吸附作用促使水解液中小分子肽相对含量提高。赵谋明等[38]报道6 种不同活性炭对草鱼蛋白水解液中支链氨基酸吸附情况，发现AK-220型活性炭对游离型芳香族氨基酸的吸附力要明显优于对支链氨基酸的吸附能力，而且吸附量的多少与氨基酸分子质量大小相关，分子质量大的吸附量相对较大。所以，采用活性炭吸附芳香族氨基酸需要进行吸附条件的优选，以达到酶解液中芳香族氨基酸最大吸附和支链氨基酸最小损耗的目的，如：刘静波等[21]以OD220nm/OD280nm比值衡量寡肽液的F值，确定活性炭吸附蛋清蛋白寡肽液的最优条件为炭液比1∶10、pH值为7、搅拌时间3 h、搅拌温度50 ℃。

值得注意的是即使使用同一原料制备的寡肽液，因为酶解条件不同，所选用活性炭种类不同，以及吸附效果考查指标的不同，均可能导致寡肽液的活性炭吸附条件不一定相同，如：王梅等[39]在比较了18 种活性炭（包括颗粒及粉状活性炭）吸附玉米蛋白高F值寡肽混合物中的芳香族氨基酸能力基础上，筛选出适宜的活性炭种类，确定了活性炭与寡肽混合液比为1∶10、吸附温度45 ℃、寡肽液pH值为2.5或2.8时可有效吸附芳香族氨基酸。而韩继福等[40]以芳香族氨基酸的去除率和支链氨基酸的保留率为指标，同样研究活性炭吸附玉米蛋白寡肽液，得到的最优吸附温度为35 ℃，寡肽液pH 6.0时吸附效果最好。另外，笔者在金枪鱼碎肉高F值寡肽制备中发现寡肽液经活性炭吸附后不仅F值提高，而且对金枪鱼碎肉高F值寡肽的脱色和脱苦也有非常好的效果[31-32]。

2.2.2 过滤分离法

依据高F值寡肽混合液中肽类和游离氨基酸分子质量不同，采用不同截留分子质量的过滤分离法（超滤、凝胶过滤）将寡肽液分成不同级分，结合氨基酸分析计算F值，再判定哪个级分属于高F值寡肽。国外学者常采用该方法完成寡肽液的高F值化，如：Pedroche等[35]用分级范围为100～1 800 u的Bio-gel P2凝胶分离酪蛋白寡肽液，得到一个苯丙氨酸和色氨酸总量低于1.4%，F值为30.6的级分。另外，采用分段式过滤分离法可大大提高寡肽的F值，如：Bautista等[12]先用糜蛋白酶水解葵花球蛋白，切开苯丙氨酸和色氨酸参与形成的肽键，然后用截留分子质量为3 ku超滤膜去掉水解液中分子质量大于3 ku组分，分子质量小于3 ku的滤过液经羧肽酶水解后用Sephadex G-15凝胶分离，结果得到分子质量为750～3 500 u的SFPH-Ⅱ组分，经分析该组分主要由小肽和游离氨基酸组成，F值高达74.8。

3 食物源蛋白高F值寡肽的应用

3.1 保肝、护肝及肝性脑病的辅助治疗

正常人血液的BCAA/AAA比值在3.5～4.0，因为肝病病人芳香族氨基酸在肝脏中代谢分解能力降低，结果在血液中大量积累导致BCAA/AAA比值低于2.5。对于肝功能衰竭病人，过量的胰岛素促使血液中大量支链氨基酸进入肌肉中代谢，结果血液中的BCAA/AAA比值降至1.0以下[41]。将高F值寡肽用于肝病患者的辅助营养治疗最早报道于1976年，虽然关于肝性脑病的发病机理目前还未完全阐明，但是提出的“氨基酸代谢失衡”学说和“假性神经递质”学说均与支链氨基酸和芳香族氨基酸的代谢有关[3,34]。肝病、肝性脑病病人可以通过口服或者静滴高F值制品方式平衡血浆中的氨基酸组成，达到改善血液中F值过低的病态模式[41]。谷文英[34]报道用10%玉米黄粉高F值寡肽液（F＞20）防治大鼠肝硬化（腹腔注射CCl4诱导），而且治疗效果要略高于一种市售高F值氨基酸。王梅等[39]也报道高F值寡肽混合物喂食CCl4诱导的肝损伤大鼠，经2 周治疗后大鼠的常规血指标和血清各酶的酶活性与对照组相近，恢复正常，而肝病组的各项指标都大幅度高出对照组。在研究高支链氨基酸对慢性肝病早期阶段影响研究中，Kuwahata等[42]发现高支链氨基酸喂食组实验动物的结缔组织生长因子mRNA水平、肝细胞内细胞色素C的含量和凋亡Bax蛋白表达水平均显著低于酪蛋白对照组，认为高支链氨基酸可以通过减轻肝纤维化方式延缓CCl4诱导的慢性肝损伤。Muto等[43]在一项跟踪调查646名失代偿期肝硬化患者食用支链氨基酸2 年食疗效果时发现：失代偿期肝硬化患者通过食疗方式每天摄入包括支链氨基酸在内1.0～1.4 g蛋白质和104.5～146.3 kJ/kg能量可以有效降低失代偿期肝硬化进一步发展为肝癌、食管曲张静脉破裂及肝功能衰竭的几率，显著提高该类患者血清白蛋白浓度，大大地提高了受试患者的生活质量。

3.2 治疗苯丙酮尿症

苯丙酮尿症（phenylketonuria，PKU）是一种遗传性氨基酸代谢缺陷症，通常在新生儿筛查中发现，由于患儿肝内缺少苯丙氨酸羧化酶，导致正常摄入的苯丙氨酸不能在肝内代谢为酪氨酸，只能在肾脏中转化生成对神经系统有损伤的苯酮酸和苯乙酸，结果会严重影响儿童的智力[44-45]。低苯丙氨酸含量食疗法是目前治疗PKU症最有效的方法，王志新等[46]对确诊为经典型PKU的19例患儿进行8～16个月低苯丙氨酸饮食治疗，结果发现经饮食治疗患儿智商IQ值由治疗前的44.8上升到61.6。李晓雯等[47]根据PKU症患儿的年龄及体质量制定低苯丙氨酸食谱，测定18例PKU患儿按照该食谱食疗6个月后血苯丙氨酸含量均较食疗前显著降低，而其他必需氨基酸浓度较食疗前则是明显提高，且患儿体格发育状况良好。对于年龄稍大PKU症儿童、青少年和成人完全采用低苯丙氨酸食疗法还是有一定困难的，van Calcar等[48]报道乳清к-蛋白营养丰富，而且苯丙氨酸含量低，非常适合PKU症患者食用，可以开发乳清к-蛋白医疗食品和饮料来丰富PKU症患者食物种类。PKU症患者也要考虑其他必需氨基酸患的摄入量，才能满足身体营养需要，Pimentel等[49]通过分析专门给PKU症患者设计的16 种食物的蛋白质含量和氨基酸种类，寻找苯丙氨酸含量与食物蛋白及其他氨基酸之间是否存在某种关系。结果发现16 种食物中蒸米饭和土豆的苯丙氨酸含量最高，而且蛋白质含量与一些特定氨基酸，如：组氨酸、亮氨酸、异亮氨酸和苯丙氨酸之间有高度线性相关性（r＞0.914 0)，提出可以通过测定蛋白含量方式来预测食物中这4种氨基酸的含量。虽然苯丙氨酸与酪氨酸无明显的相关性，但与亮氨酸（r=0.984 2）、甲硫氨酸（r=0.981 1）、异亮氨酸（r=0.946 4）、脯氨酸（r=0.943 4）、组氨酸（r=0.927 5）和甘氨酸（r=0.913 2）之间均表现出良好的线性关系。

3.3 抗疲劳、耐缺氧作用

高F值寡肽中的支链氨基酸缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸是唯一在肝外组织氧化代谢的必需氨基酸，主要氧化部位在肌肉，这些支链氨基酸分解产生ATP的效率高于其他氨基酸[50]。所以，高F值寡肽是快速生能型肽，通过体外补给高F值寡肽可直接向肌肉组织提供能量，快速缓解疲劳。王海波等[1]用F值21.7的玉米寡肽灌胃实验大鼠，测试大鼠在负重（按体质量的3%）条件下游泳至衰竭时间要显著高于对照组。此外，还发现饮用富含支链氨基酸饮料的小鼠体质量增加显著，运动能力增强，耐热、抗疲劳和耐缺氧能力均明显地提高。王梅等[51]用玉米黄粉蛋白高F值寡肽喂食大鼠7 d后，按照大鼠体质量的10%进行负游泳至衰竭实验，结果喂食高F值寡肽组大鼠的游泳至衰竭时间平均为（101±14.4）s，而对照组（喂食标准饲料）的游泳至衰竭时间只有（75±3.7）s，说明玉米黄粉高F值寡肽具有非常明显的抗疲劳作用。金宏等[52]给实验大鼠补充5%高支链氨基酸（BCAA）饲料，结果发现补充BCAA可明显提高大鼠游泳存活率，抑制游泳运动后大鼠的血乳酸浓度、LDH活力、骨骼肌LPO的升高幅度，抑制骨骼肌LDH活力和膜流动性下降的趋势，并且BCAA还可增加15N-Gly在骨骼肌蛋白质中的滞留时间，得出BCAA是通过改善运动后骨骼肌线粒体功能，从而改善运动性疲劳，提高了大鼠的运动耐力。张铁华等[53]用添加玉米蛋白粉高F值寡肽（F值21.7）的酸乳灌胃小鼠，结果实验组小鼠的缺氧存活时间、小鼠游泳时间、肝糖原含量均较对照组显著提高，而血乳酸含量则是趋于游泳前水平。Monteiro等[54]通过研究支链氨基酸对大鼠孕前和孕后的耐力衰竭时间和乳汁分泌影响，得出喂食支链氨基酸对孕期大鼠可以起到强身健体作用。在一项由12名男性志愿者参加的肌肉运动损伤实验研究中，Howatson等[55]报道志愿者在进行肌肉损伤运动实验前和实验后口服高支链氨基酸可以减少肌肉疲劳和损伤程度，并且能够加速损伤肌肉的恢复。3.4 抗氧化、防衰老作用

当生物体内自由基产生量大于清除量时，多余的自由基会攻击体内细胞和脏器，加速生物体的衰老进程，并且还易诱发与自由基有关的各种疾病产生[56]。高F值寡肽中疏水性氨基酸：缬氨酸、亮氨酸和异亮氨基酸相对含量高，不仅游离态的缬氨酸、亮氨酸和异亮氨基酸具有清除自由基作用，而且肽段中疏水性氨基酸有助于在肽段的羧基端形成疏水性尾部，提高肽在脂类中的溶解度，进而提高抗氧化能力[56-57]。郑惠娜等[58]通过体外抗氧化模型证实马氏珠母贝高F值寡肽对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基均具有一定的清除能力，其中10 mg/mL的马氏珠母贝高F值寡肽对上述3种自由基的清除率分别为60.8%、50.8%、44.2%。而在高F值寡肽抗衰老研究中，王世巍等[59]通过给小鼠灌胃不同浓度蛋清高F值寡肽液，测定灌胃30 d和90 d后小鼠皮肤中羟脯氨酸含量的变化，结果发现蛋清高F值寡肽可以明显提高小鼠皮肤中羟脯氨酸含量，其中以浓度为10%的蛋清高F值寡肽效果最佳。Ichikawa等[60]用大鼠肝硬化模型（CCl4诱导）研究高支链氨基酸对肝抗氧化基因的激活修复作用，分析与肝DNA氧化损伤修复有关的一种关键酶8羟-基鸟嘌呤DNA糖苷酶1（OGG1）表达水平，结果发现该修复酶的mRNA表达水平在高支链氨基酸动物组要显著高于对照组，而且在肝中央静脉附近OGG1阳性细胞量要明显增多，说明高支链氨基酸对肝内抗氧化基因有激活作用。

3.5 其他生物活性

据文献报道高F值寡肽（或高支链氨基酸混合液）还有降低神经生长因子损伤[61]、修复空间记忆和提高大脑神经营养因子[62]等生物活性。

4 结 语

综上所述，国内学者对食物源蛋白高F值寡肽的制备工艺研究较全面，在寡肽液的高F值化处理中投入较多精力研究活性炭脱芳条件，并积极探索高F值寡肽在抗疲劳、抗氧化等方面的生物活性。相比较而言，国外学者则对高F值寡肽用于不同病态人群的保肝、护肝和肝性脑病辅助治疗方面进行了长期跟踪调查，而国内在此方面的报道还稍显不足。因为高F值寡肽的氨基酸组成特点，决定该寡肽混合物是一类有多重活性的生物肽，笔者将高F值寡肽研究发展趋势概括为以下三方面：

4.1 制备原料多样化

不断开发来源丰富、价格低的食物源蛋白或蛋白加工副产物，特别是支链氨基酸总量高的食源性蛋白用于高F值寡肽生产。可结合我国各地食物源蛋白资源特点，建立高F值寡肽制备原料信息库，根据各原料的氨基酸组成特点选择合适的制备原料。

4.2 吸收机制

在高F值寡肽液如何被小肠吸收利用的研究中，虽然郑惠娜等[63]以马氏珠母贝高F值寡肽为测试肽，采用人结肠癌细胞Caco-2单层细胞模型模拟人体外肠道吸收，研究发现该寡肽液在Caco-2单层细胞中的转运存在外排泵作用，而且部分寡肽在转运过程中能够被细胞中存在的代谢酶所代谢。但是，高F值寡肽被人体吸收后，通过何种途径实现体内其他生物活性，如：抗氧化、抗衰老等等还有待于进一步深入研究。

4.3 理化特性和食品功能性

食物源蛋白高F值寡肽可以作为一种功效成分添加到食品中，不仅能够用于肝病病人的食疗，而且还可以发挥其他生物活性作用。因此，高F值寡肽的理化特性和食品功能性均需要进行系统分析，揭示高F值寡肽与其他食品成分之间是否存在相互作用，为高F值寡肽保健食品的开发奠定基础。

[1] 王海波, 李文亮, 张铁华, 等. 酶法制备玉米高F值寡肽及其抗疲劳功能评价[J]. 现代食品科技, 2006, 22(4): 37-38; 32.

[2] 董清平, 方俊, 田云, 等. 高F值寡肽研究进展[J]. 现代生物医学进展, 2009, 9(2): 368-370.

[3] YAMASHITA M, ARAI S, FUJIMAKI M. A low-phenylalanine, high-tyrosine plastein as an acceptable dietetic food. Method of preparation by use of enzymatic protein hydrolysis and resynthesis [J]. Journal of Food Science, 1976, 41(5): 1029-1032.

[4] 吕建敏, 储小军, 何光华, 等. 乳清小肽及添加乳清小肽婴儿配方奶粉免疫功能评价[J]. 中国食品学报, 2012, 12(11): 136-141.

[5] 姜柯君, 王际英, 张利民, 等. 饲料中添加小肽对星斑川鲽幼鱼生长性能、体组成及血清生化指标的影响[J]. 动物营养学报, 2013, 25(1): 222-230.

[6] ZIEGLER F, OLLIVIER J M, CYNOBER L, et al. Efficiency of enteral nitrogen support in surgical patients: small peptides vs. non degraded proteins[J]. Gut, 1990, 31(11): 1277-1283.

[7] SIOW H L, GAN C Y. Extraction of antioxidative and antihypertensive bioactive peptides from Parkia speciosa seeds[J]. Food Chemistry, 2013, 141(4): 3435-3442.

[8] AMADOU I, LE Guowei, AMZA T, et al. Purification and characterization of foxtail millet-derived peptides with antioxidant and antimicrobial activities[J]. Food Research International, 2013, 51(1): 422-428.

[9] HOSKIN D W, RAMAMOORTHY A. Studies on anticancer activities of antimicrobial peptides[J]. Biochimica et Biophysica Acta, 2008, 1778(2): 357-375.

[10] TANIMOTO S, TANABE S, WATANABE M, et al. Enzymatic modification of zein to produce a non-bitter peptide fraction with a very high Fischer ratio for patients with hepatic encephalopathy[J]. Agricultural and Biological Chemistry, 1991, 55(4): 1119-1123.

[11] ADACHI S, KIMURA Y, MURAKAMI K, et al. Separation of peptide groups with definite characteristics from enzymatic protein hydrolysate[J]. Agricultural and Biological Chemistry, 1991, 55(4): 925-932.

[12] BAUTISTA J, CORPAS R, CREMADES O, et al. Sunflower protein hydrolysates for dietary treatment of patients with liver failure[J]. Journal of the American Oil Chemists’ Society, 2000, 77(2): 121-126.

[13] PEDROCHE J, DEL MAR YUST M, LQARI H, et al. Production of Brassica carinata protein hydrolyzates with a high Fischer’s ratio using immobilized proteases[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2006, 54(20): 7621-7627.

[14] 王梅, 谷文英, 沈蓓英. 活性碳色谱法分离制备高F值寡肽混合物[J].无锡轻工大学学报, 1998, 17(4): 41-45.

[15] 郭冬生, 彭小兰. 玉米蛋白粉的深加工与高F值寡肽的利用[J]. 畜牧兽医杂志, 2009, 28(2): 41-43.

[16] 林莉. 玉米蛋白酶解制备高F值低聚肽及应用研究[D]. 哈尔滨: 东北农业大学, 2003.

[17] 陈芳. 玉米黄粉酶法制备高F值低聚肽的研究[D]. 重庆: 西南农业大学, 2003.

[18] 任建波. 玉米高F值寡肽混合物的制备[D]. 长春: 中国人民解放军军需大学, 2003.

[19] 郑喜群, 李里特, 吴红艳, 等. 利用米曲霉羧肽酶由玉米蛋白粉制备高F值寡肽[J]. 食品科学, 2004, 25(增刊1): 43-46.

[20] 张铁华, 王海波, 李文亮, 等. 玉米高F值寡肽生理功能及研究状况[J].食品研究与开发, 2006, 27(6): 136-138.

[21] 刘静波, 赵法利, 刘瑜, 等. 外切蛋白酶作用蛋清蛋白制备高F值寡肽的外切效果研究[J]. 食品科学, 2006, 27(11): 192-194.

[22] 刘静波, 林松毅, 张铁华, 等. 蛋清高F值寡肽可控酶解条件的筛选[J].沈阳农业大学学报, 2007, 38(2): 174-177.

[23] 汪丹媚, 魏东, 郭祀远, 等. 高效酶解鲮鱼蛋白制备高F值寡肽的研究工:胃蛋白酶酶解条件优化[J]. 天然产物研究与开发, 2006, 18(6): 98-102.

[24] 周敏华, 章超桦, 曾少葵, 等. 酶解牡蛎肉制备高F值寡肽的研究[J].现代食品科技, 2009, 25(7): 751-755.

[25] 赵珊珊, 干信. 酶解魔芋飞粉制备高F值寡肽最佳工艺条件的研究[J].生物技术, 2006, 16(3): 67-69.

[26] 赵丰丽, 麻维华. 米糟蛋白酶解制备高F值寡肽的研究[J]. 中国酿造, 2009, 28(3): 96-99.

[27] 华从伶. 米糟蛋白的提取及制备高F值寡肽的研究[D]. 南京: 南京财经大学, 2011.

[28] 卢向阳, 方俊. 高F值猪血寡肽的制备方法: 中国, CN101791039B[P]. 2011-04-20.

[29] 郑惠娜, 章超桦, 吉宏武, 等. 马氏珠母贝高F值寡肽初步分离纯化及氨基酸组成分析[J]. 食品与发酵工业, 2011, 37(6): 47-50.

[30] ZHEN Huina, ZHANG Chaohua, CAO Wenhong, et al. Preparation and characterisation of the pearl oyster (Pinctada martensii) meat protein hydrolysates with a high Fischer ratio[J]. International Journal of Food Science & Technology, 2009, 44(6): 1183-1191.

[31] 罗红宇, 杜帅, 郑斌, 等. 双酶分步水解金枪鱼 (Eleotridae) 碎肉制备高F值酶解液的工艺研究[J]. 海洋与湖沼, 2013, 44(4): 906-912.

[32] 杜帅, 宋茹, 郑斌, 等. 风味蛋白酶水解金枪鱼(Eleotridae)碎肉蛋白的动力学模型研究[J]. 海洋与湖沼, 2013, 44(4): 1073-1077.

[33] 何慧, 谢笔钧, 杨卓, 等. 大豆蛋白和玉米蛋白酶解肽及其活性研究[J].粮油食品科技, 2002, 10(1): 14-16.

[34] 谷文英. 肝性脑病防治肽: 高F值低聚肽的研究[J]. 中国食品添加剂, 2000(2): 69-73.

[35] PEDROCHE J, YUST M M, LQARI H, et al. Production and characterization of casein hydrolysates with a high amino acid Fischer’s ratio using immobilized proteases[J]. International Dairy Journal, 2004, 14(6): 527-533.

[36] ZHANG Youwei, ZHANG Hui, WANG Li, et al. Influence of the degree of hydrolysis (DH) on antioxidant properties and radicalscavenging activities of peanut peptides prepared from fermented peanut meal[J]. European Food Research and Technology, 2011, 232(6): 941-950.

[37] 宋春丽, 迟玉杰, 孙波, 等. 定向双酶切制备高F值大豆寡肽工艺技术参数的研究[J]. 食品科学, 2007, 28(6): 110-113.

[38] 赵谋明, 任娇艳, 崔春, 等. 活性炭静态吸附草鱼蛋白水解物中氨基酸特性的研究[J]. 食品与机械, 2005, 21(6): 13-16.

[39] 王梅, 谷文英. 高F值寡肽混合物对四氯化碳损伤大鼠血液生化指标的影响[J]. 无锡轻工大学学报, 2000, 19(2): 154-156.

[40] 韩继福, 任建波, 王海波, 等. 活性炭吸附芳香族氨基酸制备高F值寡肽混合物的研究[J]. 安徽农业大学学报, 2005, 32(1): 77-80.

[41] 秦环龙. 肝功能不全时氨基酸代谢变化与支链氨基酸的治疗作用[J].肠外与肠内营养, 2004, 1(4): 249-252.

[42] KUWAHATA M, KUBOTA H, KANOUCHI H, et al. Supplementation with branched-chain amino acids attenuates hepatic apoptosis in rats with chronic liver disease[J]. Nutrition Research, 2012, 32(7): 522-529.

[43] MUTO Y, SATO S, WATANABE A, et al. Effects of oral branchedchain amino acid granules on event-free survival in patients with liver cirrhosis[J]. Clinical Gastroenterology and Hepatology, 2005, 3(7): 705-713.

[44] 顾学范. 苯丙酮尿症防治现状及进展[J]. 实用儿科临床杂志, 2000, 15(5): 297-299.

[45] BÉLANGER-QUINTANA A, BURLINA A, HARDING C O, et al. Up to date knowledge on different treatment strategies for phenylketonuria[J]. Molecular Genetics and Metabolism, 2011, 104: S19-S25.

[46] 王志新, 周忠蜀, 俞唯明. 苯丙酮尿症患儿治疗前后脑白质病变的观察[J]. 中国当代儿科杂志, 2006, 8(1): 13-16.

[47] 李晓雯, 喻唯民, 王琳, 等. 苯丙酮尿症患儿饮食治疗前后血清氨基酸测定结果分析[J]. 中国妇幼保健, 2007, 22(18): 2512-2513.

[48] van CALCAR S C, NEY D M. Food products made with glycomacropeptide, a low-phenylalanine whey protein, provide a new alternative to amino acid-based medical foods for nutrition management of phenylketonuria[J]. Journal of the Academy of Nutrition and Dietetics, 2012, 112(8): 1201-1210.

[49] PIMENTEL F B, ALVES R C, COSTA A S G, et al. Phenylketonuria: protein content and amino acids profile of dishes for phenylketonuric patients. the relevance of phenylalanine[J]. Food Chemistry, 2014, 149: 144-150.

[50] HOLECEK M. Relation between glutamine, branched-chain amino acids, and protein metabolism[J]. Nutrition, 2002, 18(2): 130-133.

[51] 王梅, 谷文英. 高F值寡肽混合物的制备及抗疲劳与抗缺氧作用[J].粮油食品科技, 1999, 7(3): 6-7.

[52] 金宏, 许志勤, 王先远, 等. 支链氨基酸提高大鼠游泳耐力作用探讨[J].营养学报, 2001, 23(1): 48-51.

[53] 张铁华, 殷涌光, 陈玉江, 等. 高F值寡肽酸乳饮料的开发与功能评价研究[J]. 食品研究与开发, 2007, 23(3): 38-42.

[54] MONTEIRO G A, AOKI M S, SANTOS C B, et al. Effects of branched-chain amino acid (BCAA) supplementation on endurance exercise performance of pregnant rats[J]. Science & Sports, 2009, 24(2): 102-107.

[55] HOWATSON G, HOAD M, GOODALL S, et al. Exercise-induced muscle damage is reduced in resistance-trained males by branched chain amino acids: a randomized, double-blind, placebo controlled study[J/OL]. Journal of the International Society of Sports Nutrition, 2012, 9: 20.

doi: 10.1186/1550-2783-9-20

[56] CHEN Huaming, MURAMOTO K, YAMAUCHI F, et al. Antioxidant activity of designed peptides based on the antioxidative peptide isolated from digests of a soybean protein[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1996, 44: 2619-2623.

[57] SONG Ru, WEI Rongbian, ZHANG Bin, et al. Antioxidant and antiproliferative activities of heated sterilized pepsin hydrolysate derived from half-fin anchovy (Setipinna taty)[J]. Marine Drugs, 2011, 9(6): 1142-1156.

[58] 郑惠娜, 章超桦, 吉宏武, 等. 马氏珠母贝高F值寡肽体外抗氧化研究[J]. 食品与机械, 2010, 20(6): 63-66.

[59] 王世巍, 刘静波, 王莹, 等. 蛋清高F值寡肽对受试小鼠皮肤中羟脯氨酸含量影响的研究[J]. 食品科学, 2008, 29(11): 612-615.

[60] ICHIKAWA K, OKABAYASHI T, SHIMA Y, et al. Branched-chain amino acid-enriched nutrients stimulate antioxidant DNA repair in a rat model of liver injury induced by carbon tetrachloride[J]. Molecular Biology Reports, 2012, 39: 10803-10810.

[61] SCAINI G, MELLO-SANTOS L M, FURLANETTO C B, et al. Acute and chronic administration of the branched-chain amino acids decreases nerve growth factor in rat hippocampus[J]. Molecular Neurobiology, 2013, 48: 581-589.

[62] SCAINI G, COMIM C M, OLIVEIRA G M T, et al. Chronic administration of branched-chain amino acids impairs spatial memory and increases brain-derived neurotrophic factor in a rat model[J]. Journal of Inherited Metabolic Disease, 2013, 36(5): 721-730.

[63] 郑惠娜, 章超桦, 吉宏武, 等. 马氏珠母贝高F值寡肽在Caco-2细胞中吸收的初步研究[J]. 食品与生物技术学报, 2011, 30(4): 613-617.

Progress in Preparation and Application of High Fischer Ratio Oligopeptides Derived from Food Protein Source

WEI Rong-bian1, HUANG Cheng2, LUO Hong-yu2, SONG Ru2,*
(1. College of Marine Science and Technology, Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316022, China; 2. College of Food Science and Pharmacy, Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316022, China)

Oligopeptide is usually composed of 3 to 9 amino acids. High Fischer ratio oligopeptide is one kind of peptide mixture with a molar ratio of branched-chain amino acids (Leu, Ile and Val) to aromatic amino acids (Phe, Trp and Tyr) higher than 20. High Fischer ratio oligopeptides have been reported to have multi-physiological functions. This paper reviews recent advances in raw material selection, preparation and physiological functions of high Fischer ratio oligopeptides derived from food protein source. Meanwhile, potential future research directions are discussed.

food protein source; high Fischer ratio; oligopeptides; enzymatic hydrolysis; physiological activities

TS202.1

A

1002-6630（2014）15-0289-06

10.7506/spkx1002-6630-201415058

2013-10-09

公益性行业（农业）科研专项（201305013）；国家自然科学基金青年科学基金项目（31301568）；

浙江海洋学院科研启动经费资助项目

韦荣编（1974—），男，讲师，博士，研究方向为海洋生物资源综合利用。E-mail：apwapw@126.com

*通信作者：宋茹（1976—），女，副教授，博士，研究方向为水产品加工与贮藏、食品化学与营养支持。E-mail：rusong@zjou.edu.cn