基因TCF7L2多态性与中国妊娠期糖尿病相关性的研究

刘晓慧李福平张焕灵

1.蛇口人民医院产科，广东深圳518067；2.深圳市妇幼保健院内科，广东深圳518028

基因TCF7L2多态性与中国妊娠期糖尿病相关性的研究

刘晓慧1李福平2张焕灵1

1.蛇口人民医院产科，广东深圳518067；2.深圳市妇幼保健院内科，广东深圳518028

目的探索基因TCF7L2rs11196218与中国汉族妇女妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法依据美国糖尿病学会2004年颁布的GDM标准进行诊断,将2009年6月—2012年6月收取的289例患者排除糖耐量异常以及I型糖尿病、胰腺炎及胰腺手术者，随机分为对照组145例，病例组144例。且经rs11196218的单核苷酸多态性（SNPs），对等位基因在二组间频率分布进行统计学处理。结果发现两组之间对照组剖腹产69（47.9%），非剖腹产75（52.1%），病例组剖腹产94（66.7%），非剖腹产47（33.3%），病例组剖腹产比率高于对照组，差异具有统计学意义。且两组间rs11196218位点基因的基因频率AA、GG、GA，对照组分别为5(3.5%)、86(59.7%)、53(36.8%)，病例组分别为9(6.3%)、77(53.5%)、58(40.2%），差异不明显，无统计学意义。而两组间等位基因A及G分布频率分别为对照组31.5（21.9%）、112.5(78.1%)，病例组38(26.4%)、106(73.6%)，差异无显著统计学意义。结论未发现rs11196218与中国汉人GDM发病相关联。高龄和双胎妊娠是中国汉人妇女GDM的发病因素，合并GDM患者剖腹产率升高。

妊娠期糖尿病；单核苷酸多态性；rs11196218

妊娠期糖尿病（GDM）在全球发病率逐步升高。国内外的研究表明GDM与2型糖尿病（T2DM）有相似发病机理。转录因子7类似物2（Transcription factor 7 like2,TCF7L2）基因位于人类10号染色体q25.3区,其rs7903146多态性是至今人类发现与T2DM相关性最显著的。但Ng[1]等人发现rs7903146点位在香港汉族人群中突变率很低。以往研究表明，很多单核苷酸多态性（SNPs）是外国人种某些疾病的遗传基础，但在中国汉人中研究结果不同。TCF7L2的另一点位rs11196218在课题申请时仅有Ng等报道与汉人T2DM相关[1]。有必要在汉人GDM中开展调查研究。该研究选取2009年6月—2012年6月在该院产科住院的孕产妇为研究对象，现将结果总结如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

研究对象为2009年6月—2012年6月在该院产科住院的孕产妇。于孕24～28周行75 g口服葡萄糖耐量试验（OGTT）,依据美国糖尿病学会2004年颁布的GDM标准进行诊断。研究对象均为同期住院分娩孕产妇,排除糖耐量异常以及I型糖尿病，胰腺炎及胰腺手术者，其中病例组144例，年龄22～45岁，平均（31.88±4.21）岁，新生儿体重1740～4900 g,平均体重(3366.88±529.36)g;对照组为145例，年龄18～41岁，平均（28.78±4.23）岁，新生儿体重1050～4750 g，平均体重（3265.07±510.92）g，两组患者的一般资料如年龄、新生儿体重等差异不明显，无统计学意义（P＞0.05）。该研究获医院伦理学委员会批准，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 研究方法

收集病例组和对照组的静脉血，用酚氯仿法提取全血基因组DNA，采用美国sequenom公司MassARRAY时间飞行质谱技术，先通过PCR扩增，SAP酶处理，延伸引物单碱基，树脂除盐纯化。芯片点样，质谱仪检测等实验步骤，最终使用Typer.4软件分析实验数据，获得分型结果。标本准确率为99.66%。引物序列如下。见表1。

表1 引物序列

1.3 统计方法

2 结果

2.1 研究对象的临床特点

2.1.1 产妇年龄比较病例组144例,最小年龄22岁，最大年龄45岁,平均年龄（31.88±4.21）岁;对照组145例，最小年龄18岁，最大年龄41岁，平均年龄（28.78±4.23）岁；两组年龄差异有统计学意义（t=6.248，P=0.0001）。

2.1.2 新生儿体重比较病例组141例，最大体重4900 g，最小体重1740 g，平均体重（3366.88±529.36）g；对照组144例，最大体重4750 g，最小体重1050 g，平均体重（3265.07±510.92）g；两组婴儿体重差异无统计学意义（t=1.652，P=0.100）。

2．1.3两组间不同产式比较病例组剖腹产比率高于对照组，差异具有统计学意义（χ2=10.230，P=0.001），见表2。

表2 两组间不同产式比较[n(%)]

2.2 Hardy-Weinberg平衡检验

经分析rs11196218的基因型在病例组和对照组的分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）。

2.3 两组间位点差异情况比较

rs11196218位点基因型频率和等位基因频率比较，见表3、4。

表3 两组间位点差异情况比较

表4 等位基因分布频率比较

2.4 与国内报道结果的比较

见表5。

3 结语

rs11196218基因型和等位基因分布频率在GDM组和对照组无统计学显著的差别，表明未发现rs11196218与中国汉人GDM发病相关联。我们与张春[4]等报道的rs11196218的基因型频率和等位基因频率不相同。高龄和双胎妊娠是中国汉人妇女GDM的发病因素，合并GDM患者剖腹产率升高。

4 讨论

上述研究中除回园敕等和该研究的病例组为GDM外均为T2DM。Syeda Sadia Najam[3],等研究发现rs11196218的单核苷酸多态性与T2DM显著性相关联，其他研究均未发现该SNPs与T2DM或GDM有显著的相关性。由以上结果可知，对照组和病例组采用GDM和非GDM方式相比较，对照组剖腹产69（47.9%），非剖腹产75（52.1%），病例组剖腹产94（66.7%），非剖腹产47（33.3%），病例组剖腹产比率高于对照组，差异具有统计学意义。且两组间rs11196218位点基因的基因频率AA、GG、GA，对照组分别为5(3.5%)、86(59.7%)、53(36.8%)，病例组分别为9(6.3%)、77(53.5%)、58(40.2%），差异不明显，无统计学意义。而两组间等位基因A及G分布频率分别为对照组31.5（21.9%）、112.5(78.1)，病例组38 (26.4%)、106(73.6%)，差异无显著统计学意义。以上结果均与花巍，窦昊颖，黄海超，等[7]在关于细胞周期素依赖性激酶5调节亚单位相关蛋白1类似物1基因多态性与2型糖尿病相关性的研究进展中的相关数据相一致，具有临床意义。且国内外已有的研究表明T2DM与GDM有着相似的发病机理。

表5 与国内报道结果比较

与其他学者报道的差异如何解释?有人从该SNPs对研究的所有人群(包括病例组和对照组)某些影响糖代谢的生理特征如早相胰岛素分泌量进行定量研究。巳知GDM和T2DM一样是受多基因遗传影响的[7-9],假定G纯合子可使早相胰岛素分泌量产生一定量减少,但由于其对疾病发生贡献量很小，且影响疾病的其他基因均正常或同时携带有抑制糖尿病的遗传基因，各种基因相互作用，从整体水平上不会发生GDM[10]。也就会出现有国人报道对致糖尿病的某一生理特征有影响，该研究发现在整体水平上等位基因在两组间分布无显著差别的情况。由于条件限制该研究标本量小，也应扩大标本量来得出更可靠结论。

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Study on the correlation between gestational diabetes mellitus andChinese gene TCF7L2 polymorphism

LIU Xiaohui1LI Fuping2ZHANG Huanling1
1.Obstetric Shekou people's Hospita，Shenzhen 518067，China；2.Shenzhen City Maternal and Child Health Hospital Department of Internal Medicine，Guangdong 518028，China

ObjectiveExploration of gestational diabetes gene TCF7L2rs11196218 and China women of Han(GDM)relationship.MethodsOn the basis of diagnosis American Diabetes Association issued in 2004 by the GDM standard,will be charged 289 patients excluded IGT and type I diabetes,pancreatitis and pancreatic operation,were randomly divided into control group of 145 cases,144 cases.And the single nucleotide polymorphism of rs11196218(SNPs),allele frequency distribution in the two groups were statistically.ResultsFound between the 2 groups control group,caesarean section 69(47.9%),noncaesarean section 75(52.1%) cases of caesarean section,94(66.7%),non caesarean section 47(33.3%)cases,the rate of cesarean section was higher than the control group,with significant difference.And the gene frequency of AA,GG,GA between the two groups of rs11196218 genes,the control group were 5(3.5%),86(59.7%),53(36.8%),the case group were 9(6.3%),77(53.5%),58(40.2%),the difference was not significant,no statistical significance.And between the two groups of A and G allele distributionfrequencies were 31.5 in the control group 21.9%,112.5(78.1%),38(26.4%)cases,106(73.6%),no significant difference statistically significant.ConclusionNo rs11196218 is associated with the pathogenesis of GDM China Han found.The elderly and twin pregnancy were factors in China Han women in GDM patients with GDM,increased cesarean section rate.

Gestational diabetes mellitus;Single nucleotide polymorphism;rs11196218

R473.74

A

1672-5654（2014）12（c）-0007-03

2014-09-11）

刘晓慧，女，50岁，主任医师，本科，蛇口人民医院产科主任，研究方向：高危妊娠。