阿托伐他汀对老年大鼠心肌过氧化氢、丙二醛及谷胱甘肽过氧化物酶水平的影响

韩 磊 ，叶 平 ，李鸣皋

近年来，他汀类药物的作用越来越为广大学者所重视。大量的研究证实，除调脂作用外，他汀类药物还具有抑制炎性反应、改善心室重构、保护血管内皮等多种保护作用［1-4］。然而，有关他汀类药物与衰老及氧化应激方面的研究少见报道。本研究以老年大鼠为研究对象，观察老年大鼠心肌过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等氧化应激与衰老相关指标的变化及阿托伐他汀干预对上述指标的影响，进而为研究衰老的病理生理机制和干预手段提供实验数据。

1 材料与方法

1.1 动物 10月龄 Wistar大鼠90只［体质量(586.67±39.40)g］、3月龄 Wistar大鼠30只［体质量(245.83±11.38)g］(北京维通利华公司)，雌雄各半。

1.2 试药、试剂与仪器 阿托伐他汀(大连辉瑞制药有限公司，批号:73837005)，H2O2、MDA、GSH-Px检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)，台式高速离心机(Sigma公司)，高速冷冻离心机(Heraeus Labofuge 400)，水浴锅(北京长风仪器仪表公司)，721A型分光光度计(上海光学仪器厂)。

1.3 方法

1.3.1 动物模型建立与分组:将90只10月龄Wistar大鼠饲养至20月龄后，随机分成老年对照组、高剂量阿托伐他汀组(高剂量组)和低剂量阿托伐他汀组(低剂量组)，每组30只。将30只3月龄Wistar大鼠作为青年对照组，正常饲养，不做任何处理。

1.3.2 处理方法:高、低剂量组分别给予阿托伐他汀10 mg/(kg·d)和1 mg/(kg·d)灌胃，老年对照组大鼠给予等体积的0．9%氯化钠溶液灌胃，共4个月。

1.4 心肌H2O2、MDA及GSH-Px含量的测定 常规麻醉大鼠，留取大鼠心肌标本。采用H2O2、MDA及GSH-Px检测试剂盒，严格按说明书操作测定各组大鼠心肌H2O2、MDA及GSH-Px含量。

1.5 统计学方法 应用SPSS 13．0软件进行统计学处理。计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用单因素方差分析，α=0．05为检验水准。

2 结果

老年对照组心肌H2O2、MDA含量显著高于青年对照组(P＜0．01)，GSH-Px活性显著低于青年对照组(P＜0．01);高、低剂量组心肌H2O2、MDA含量均显著低于老年对照组(P＜0.05，P＜0.01)，GSHPx活性显著高于老年对照组(P＜0．01);高、低剂量组H2O2、MDA含量均显著高于青年对照组(P＜0．05，P ＜0．01)，而 GSH-Px活性显著低于青年对照组(P＜0．01)。与低剂量组比较，高剂量组上述3种指标变化更为显著(P ＜0．05，P ＜0．01)。见表1。

表1 各组大鼠心肌过氧化氢、丙二醛及谷胱甘肽过氧化物酶水平变化情况(±s)

表1 各组大鼠心肌过氧化氢、丙二醛及谷胱甘肽过氧化物酶水平变化情况(±s)

注:青年对照组:3月龄Wister大鼠不做任何处理，老年对照组、高剂量组、低剂量组:20月龄Wister大鼠分别予0．9%氯化钠溶液及阿托伐他汀10 mg/(kg·d)、1 mg/(kg·d)灌胃;*为灌胃4个月存活大鼠数;与青年对照组比较，a P＜0.05，b P ＜0．01;与老年对照组比较，c P ＜0．05，d P ＜0．01;与低剂量组比较，e P ＜0．05，f P ＜0．01

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3 讨论

随着老龄化社会的来临，衰老及与衰老相关疾病导致的健康问题日益凸显，衰老的病理生理机制及其干预措施也日益成为广大医务工作者关注的热点。目前在衰老发生机制方面有多种学说［5］，主流的学说主要有衰老基因学说、复制性衰老理论与端粒酶学说、线粒体自由基学说、DNA损伤理论学说等，其中线粒体自由基学说具有较重要的地位。根据线粒体自由基学说［6-9］，代谢中产生的大量自由基如超氧阴离子(O2－)、过氧化脂质等是导致机体衰老的重要原因;过量表达的自由基会导致细胞膜与线粒体等细胞重要结构的损伤，还可引起蛋白质与酶的活性发生变化;当这种损伤超过了机体的承受能力时，就可引起细胞分化状态的改变和丧失，最终导致与加速衰老的发生。

H2O2、MDA、GSH-Px等作为反映机体衰老与氧化应激水平的指标，已为研究者所公认。既往研究证实，MDA、H2O2在生物体内的含量随年龄的增长而增高，GSH-Px活性降低［10-13］。上述指标在研究中亦常用于评价抗氧化及抗衰老干预措施的效果［14-16］。因此，本研究选择上述指标作为反映老年大鼠心脏氧化应激水平和衰老状态及评价阿托伐他汀干预效果的指标。

本研究结果表明，老年对照组心肌 H2O2及MDA含量较青年对照组显著增高，GSH-Px活性显著降低。这一结果提示，一方面，24月龄Wistar大鼠心脏出现了显著的衰老性改变;另一方面，也提示老年大鼠心脏氧化应激水平较青年大鼠有了显著提高，再次验证了脂质过氧化在衰老发生、发展过程中起着重要的作用。

近年来，关于他汀类药物在心血管保护作用方面的研究较多，但既往研究多集中于他汀类药物在病理情况下的作用，而有关他汀类药物长期干预在生理衰老情况下尤其是在心脏老化方面的研究则少有报道。本研究结果显示，经过4个月的阿托伐他汀干预后，老年大鼠心肌H2O2、MDA含量显著升高，GSH-Px活性显著降低，提示阿托伐他汀可以显著抑制心脏的衰老性改变;同时也提示，阿托伐他汀对抗大鼠心脏衰老性改变的作用可能与其对心脏脂质过氧化水平的抑制有关。既往研究也显示，阿托伐他汀的长期干预可显著增强大鼠心肌过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、一氧化氮合酶等抗氧化酶的活性，也从另一个侧面提示其抗衰老作用可能与其增强抗氧化酶活性、抑制脂质过氧化水平有关。此外，本研究结果显示，高、低剂量组MDA、H2O2、GSH-Px水平较青年对照组仍有显著差异，表明尽管阿托伐他汀干预可显著抑制老年大鼠心肌的脂质过氧化水平，但仍未达到青年对照组水平。提示，阿托伐他汀干预并不能完全逆转老年大鼠心肌过氧化水平，通过药物干预只能延缓心脏衰老性改变，并不能完全逆转这一生理趋势。目前，关于阿托伐他汀抗衰老及抗氧化作用的具体机制尚不清楚，还需进一步研究。

［1］ Delgado Montero A，Zamorano J L．Atorvastatin calcium plus amlodipine for the treatment of hypertension［J］．Expert Opin Pharmacother，2012，13(18):2673-2685．

［2］ Kotlęga D，Ciecwiez S，Turowska Kowalska J，et al．Pathogenetic justification of statin use in ischaemic stroke prevention according to inflammatory theory in development of atherosclerosis［J］．Neurol Neurochir Pol，2012，46(2):176-183．

［3］ 李晓涛，张惠军，郭喜朝，等．阿托伐他汀对冠心病患者血清脂联素和瘦素的影响［J］．首都医科大学学报，2012，33(1):126-127．

［4］ Padhy B M，Yadav R，Gupta Y K．Hypolipidaemic and anti-inflammatory effects of fixed dose combination of atorvastatin plusezetimibe in Indian patients with dyslipidaemia［J］．Singapore Med J，2013，54(2):90-95．

［5］ 王福龙，王甄真，陈雁．衰老的分子机制与干预研究的最新进展［J］．中国细胞生物学学报，2012，34(8):739-748．

［6］ Schon E A，Przedborski S．Mitochondria:the next(neurode)generation［J］．Neuron，2011，70(6):1033-1053．

［7］ Harman D．Aging:a theory based on free radical and radiation chemistry［J］．JGerontol，1956，11(3):298-300．

［8］ Ashok B T，Ali R．The aging paradox:free radical theory of aging［J］．Exp Gerontol，1999，34(3):293-303．

［9］ Johnson F B，Sinclair D A，Guarente L．Molecular biology of aging［J］．Cell，1999，96(2):291-302．

［10］刘灵芝．丹红注射液对自然衰老大鼠心脏、大脑组织SOD、MDA及GSH-Px的影响［J］．中国实用神经疾病杂志，2012，15(17):73-74．

［11］张书伟，张莉蓉．两头毛水提物对衰老小鼠心、肝及肾组织中MDA、GSH和SOD含量的影响［J］．郑州大学学报(医学版)，2011，46(5):735-736．

［12］魏晓东，邓连瑞，张惠丹，等．灵芝多糖抗H2O2诱导的HDF细胞衰老及其机制的研究［J］．中国老年学杂志，2009，29(11):1347-1349．

［13］黄俊杰，王彩冰，黄丽娟，等．maFGF对慢性衰老大鼠肝组织ATP酶、SOD活力及丙二醛和羟自由基水平的影响［J］．重庆医学，2011，40(34):3469-3471．

［14］宫铁红，付淑华，牛嗣云，等．衰老大鼠睾丸组织SOD、MDA和血清睾酮含量的变化［J］．承德医学院学报，2012，29(1):14-16．

［15］邓彩霞，蓝贤俊，农文田，等．川芎对衰老小鼠脑组织SOD和MDA及羟自由基的影响［J］．医学理论与实践，2012，25(5):499-500．

［16］栾增强，曹文富，黄和贤，等．延衰合剂对D-半乳糖衰老小鼠血清SOD、MDA、IL-2和睾酮的影响［J］．中国药房，2011，22(7):589-591．