浅谈实验室水质检测几项操作的注意事项

詹秀兰

【摘 要】本文基于实验室水质检测操作中四个常规测定参数—微生物、高锰酸盐指数、氨氮、总氮，在操作过程中对测定结果产生影响的注意事项进行分析。

【关键词】实验室；水质检测；参数

0.引言

水是生命之源、生产之要、生态之基。水质检测是我国进行水资源管理与保护的重要基础和手段，水质检测提供的水质信息十分重要。

1.实验室微生物、高锰酸盐指数、氨氮、总氮的测定

1.1微生物的检测

微生物检测是水质检测中一个不可忽视的部分，对于微生物检测的精确程度要求也越来越高。怎样提高微生物检测率，我认为可以从以下几个方面考虑。

1.1.1严格用具的清洗

保证检测用具的真正清洁、无菌是保证检测精度的第一步。因此必须保证用具（包括采样瓶、平皿、吸管等）清洗符合要求，因此不但清洗时要及时更换清洗液，使之达到一定浓度，而且用具清洗必须彻底，无残留。

1.1.2加强实验室无菌环境的控制，保持四壁光洁，严禁挂尘

大量细菌能够附着在空气中的粉尘中，浓度可以达到107个/L—108个/L，因此必须保持检测室、尤其是无菌室四壁及地面光洁，无菌室內还要尽量少放置物品，便于消毒杀菌。潮湿也是细菌滋生的一大因素。

1.1.3合理存放及使用培养基

大家使用的合成培养基，一般为粉末状，应置于5℃-25℃，避光、干燥保存，并在保质期内使用。若培养基粉末变黄、变粘，则很可能变质。已配制好的培养基应于4℃冰箱保存，并尽快使用。使用时，应将培养基均匀加热，使之熔化。若使用电炉加热，应避免热糊。待其冷却至60℃左右，方可进行接种。培养基以其基体均一，色泽光亮、透明为优质培养基。

1.1.4定期杀菌、标准接种

每次接种前，将无菌室紫外灯打开30min，打开洁净工作台20min后，方可工作。工作完毕后，再将紫外灯打开30min杀菌。经常用酒精或来苏尔进行器具灭菌。另外，微生物检测室尽量避免外来人员出入，减少空气流动，避免不洁空气的带入。在样品移至无菌室前，先将采样瓶体外壁连同盛装样品的容器一同用酒精棉擦拭，然后换上无菌工作服、拖鞋、手套、口罩等，再将其移至无菌室内。接种时，动作准确，迅速，不要让样品洒落，造成交叉污染。

1.2高锰酸盐指数的测定

1.2.1水浴加热时间必须严格控制

采用酸性高锰酸钾法测定高锰酸盐指数，测定只是规定时间内以高锰酸钾为氧化剂处理水样时所消耗的量，反应时间将直接影响测定的结果，因此对样品进行水浴加热时，一定要在水浴沸腾后将样品放入水浴锅中，水浴沸腾，开始计时，并严格控制时间为30min±2min，以提高数据的精密性。若水浴加热时间过长，样品测定值会增大、反之则减小。

1.2.2 KMnO4溶液的浓度必须准确标定

滴定时室温下反应慢，溶液加热至70℃-80℃，但温度不能高于90℃（酸性条件下，H2C2O4会部分分解）。滴定刚开始的时候，滴定反应速度较慢，当滴入的KMnO4与H2C2O4反应生成Mn2+而起到催化剂的作用后，反应速度才逐渐加快，因此高锰酸钾溶液标定时的滴定速度在开始时不宜太快，应等第一滴KMnO4红色褪去之后再滴入第二滴，否则所加入的KMnO4来不及反应即在酸性溶液中分解，从而影响高锰酸钾溶液标定的准确度。终点的判断，用KMnO4溶液滴定至溶液出现粉红色并维持0.5min～1.0min不褪色时，即认为达到滴定终点。

1.3氨氮的测定（HJ535-2009）

1.3.1对检测用水的要求

氨氮的测定通常采用纳氏试剂比色法，实验过程对水的要求很高，应严格控制实验用水的质量，最好采用进行二次加工得到无氨水，或者采用复合树脂交换柱制得的新鲜去离子水。在实际操作中，一般控制试剂空白吸光度不超0.030（光程l0mm比色皿），这样可大大减少因为无氨水的质量控制不好而产生的测定误差。另外纳氏试剂在配制时应注意，按方法（HJ535-2009）配制时配制的溶液要静置过夜，将上层清液移入聚乙烯瓶中密封保存，然后放入冰箱中低温冷藏，以防颜色逐渐加深。

1.3.2实验室环境的影响

氨氮的测定应选择在无氨气的环境中进行，不应有扬尘，按盐类化合物，所使用的试剂、玻璃器皿等实验用品要单独存放，因为玻璃器皿极易吸附空气中的氨，因而造成测定的偏差。而且玻璃器皿的洗涤应避免采用重铬酸钾洗液，因为此洗液易附着在容器上，具有强烈的氧化性，影响氨氮的测定。玻璃器皿在必要时可用（1+9）的盐酸浸泡，且清洗、凉干后在空气中存放时间不宜太长即可用来进行样品的分析测定。

1.3.3反应条件的影响

（1）PH值的影响。

由氨氮显色反应原理可知，显色溶液的浓度影响反应平衡，对显色效果有明显影响。实验表明：水样pH值<6，反应灵敏度较低，吸光度值随pH值的减小而降低；pH值在6～8时，吸光度值较高；pH值>10时，出现大量的红棕色沉淀。因此，水样保存时如果加入了浓硫酸，在测定前要用碱中和至pH值为6～8，此外，为保证测定结果的准确性，水样与标准溶液的pH值应尽量一致，以免造成误差。

（2）温度的影响。

温度会影响纳氏试剂与氨氮的反应速度，并影响溶液的显色效果。实验表明，反应温度为25℃时，显色最安全；20℃时吸光度无明显改变，但显色不完全；当温度达到30℃时，溶液褪色，吸光度出现明显偏低现象。因此，实验显色温度应控制在20℃～25℃，以保证实验分析结果的可靠性。

（3）反应时间的影响。

反应时间小于l0min，溶液显色不完全；l0min～30min颜色较稳定；30min～45min颜色有加深趋势；45min～90min颜色逐渐减褪。因而，用纳氏试剂光度法测定水中氨氮时，显色时间应控制在l0min～30min，以尽快的速度进行比色，达到分析的精密度和准确度。

1.3.4总氮的测定（GB/T11894-1989）

总氮是指水体中所有含氮化合物中的氮含量，反映水体富营养化程度的重要指标之一。通常采用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法（ GB/T11894-1989） 测定。此法测定总氮虽然看似简单，但是此方法要求空白值的吸光度不得超过0.030，并不是很容易做到。所以有很多细节方而的问题需要注意。

（1）玻璃器皿的清洁。

在总氮的高温消解过程中，玻璃器皿壁上难以清洗的有机物和其他物质会混入介质中而造成空白值偏大或者平行性较差，所以所有玻璃器皿最好用盐酸（1+9）或者硫酸（l+35）浸泡，清洗后再用无氨水冲洗数次，比色时用的石英比色皿也要用盐酸（1+9）清洁干净。

（2）消解温度、压力和时间的控制。

消解时应严格按照分析方法规定的消解的温度为120℃～124℃，（此时锅内压力1.1kg/cm2～1.4kg/cm2）控制。消解时，（GB11894-1989）中要求达到规定的温度和压力后开始计时，笔者的经验是直接打开放气阀加热一段时间，充分排出蒸气灭菌器内的冷空气、放出热蒸气后再关闭放气阀消解，并且将消解温度控制在123℃，消解三十分钟后，自然降压至与外界相同时再打开放气阀放气，然后打开锅盖。其目的是为了保证总消解时间足够长，过硫酸钾分解完全，这样测定结果更为理想。

2.结语

实验室水质检测结果的质量决定于检测过程完成的质量，过程存在质量缺陷，将导致检测结果不准确、不正确和不合理，因此，实验室操作要在细节上下功夫，尽量避免误差。 [科]

【参考文献】

[1]生活饮用水卫生标准、生活饮用水标准检验方法（GB/T5750.1-5750.13-2006）.