血细胞分析仪常见的校准方法与质控

陈 琳

哈尔滨市红十字中心医院，黑龙江 哈尔滨 150000

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血细胞分析仪常见的校准方法与质控

陈 琳

哈尔滨市红十字中心医院，黑龙江 哈尔滨 150000

血细胞分析仪质量控制过程中，血细胞分析仪不是直接测定的装置，而是一个比较器，它需要仔细的校准及定期的质控。为了测定它要和另外的系统及方法进行比较，也就是需要用准确的校准物校正仪器，校准后需要用已定值或未定值的质控物进行室内质控，以保证仪器的顺利操作。

血细胞分析仪；校准；质控

在血细胞分析仪质量控制过程中，校准物和质控物是两种必不可少的物质。校准物仅用在仪器安装及有变动时校准仪器需要有准确定值，而质控物与临床化学中应用的质控物及质控方法基本相似。决不能用质控物代替校准物来校准仪器。

1 全血校准物校准仪器

血细胞分析仪校准的步骤及注意事项：有了正确定值的校准物，在校准过程中必须操作正规，才能保证不会超过仪器校准误差的允许限度。

使用前仪器内部各通道及测试室均经清洁剂处理30 min；校准前应检测仪器的背景计数，重复性（1份标本连续测定10次）、携带污染及质控物回收试验均合格，才可进行校准，否则需请维修人员进行检修［1］。在仪器上测定校准物。在测定校准物前，先测定两份正常的新鲜血；取分开的校准物一瓶，连续测定11次，第一份结果不用，以防止携带污染；如仪器无自动校准功能，则将2～11次各项结果填写在校准工作单上，并计算出均值，填写及计算均值需仔细认真，均值应比日常报告时保留的小数点后位数再多一位。将第二管未用的校准物轻轻混匀；将混匀后的校准物在仪器上重复测定11次，第一次结果去掉，求第2～11次标本结果的均值，再次与数值对照。

2 用新鲜全血作为校准物校准仪器

2.1 新鲜全血作为校准物的要求

新鲜血标本采取健康人血液，其红细胞平均体积应在86～96 fL，平均细胞Hb浓度应在330～345 mg／L，标本用EDTA二钾抗凝，最终浓度为1.5～2.2 mg／L，将标本放入容器中应保留等体积的空气，以保证较好的混匀及血液的氧合作用。标本用真空容器采集，如有肉眼可见溶血或微小凝块，则不能用作校准物。用新鲜血不稳定，所以定值后必须在数小时内使用。

2.2 新鲜血校准物定值

新鲜血校准物可用于希望自己校准血细胞分析仪的实验室。（1）Hb测定。按照ICSH（1987），0.5 ml血液用试剂稀释至100 ml容量瓶内，用分光光度计测量Hb浓度，偶然可能遇到标本混浊，可通过低蛋白结合力的滤膜进行过滤，平均孔径为0.20～0.25 μm，过滤的前0.5 ml抛弃不用；（2）细胞比容测定。使用ICSH（1988）推荐的微量细胞比容测定法进行测定，不需要校正残留血浆；（3）红细胞计数。红细胞计数应使用自动单通仪器，其设计为电子方法计数取代了一定稀释体积内的全部细胞，可用光散射法或小孔-阻抗法进行计数，以小孔-阻抗法，不带鞘流的方式应用最普遍，其他类型的计数器，其设计原理须适当修改［2］；（4）白细胞计数。仪器的原理及规格同红细胞计数。加规定体积的溶血剂到规定测定量的细胞第一稀释液内；（5）血小板计数。由于用富血小板血浆测定血小板产生较大偏差，故只能用全血测定，但任何血球计数仪在红细胞存在的情况下，都不可能吸取一定量的稀释血液到敏感区直接计数血小板。因此只能用一种仪器测定红细胞与血小板计数的比值。由于红细胞的数值是已知的，可以用比值间接算出血小板含量。红细胞与血小板计数比值的测定。

3 血细胞分析仪的质控

3.1 非定值质控物和质控法

不定值质控物的重复测定，可以确定重复性（精密度）误差，但不能判断测定结果的准确性，对精密度检测可评价技术和仪器是否稳定，同时可检测稀释误差和试剂的质量。

进行室内质控前要了解掌握自己室内测定的变异，最佳条件下的变异（OCV）是在某一实验室内最理想和最恒定的条件（即最佳条件）下，对同一质控物进行反复测定所得出的变异，该变异不是在同批内测定得出，而是分别在不同批内，不同日期测得的，因此它是批间差异而不是批内差异，但每次测定采用的都是最理想条件。测定本实验室常规条件下的变异，每天早晨工作前按常规条件，对质控物进行测定.即使用的吸管或稀释器、测试杯、稀释液、溶血剂、混匀条件或温度、检测人员与日常工作条件相同，每日一次连续20天，求出均值、SD及CV值，常规条件下的变异（RCV）反映该实验室日常工作条件下该项试验精密度的实际水平，因为在常规工作中很难保持最佳条件，所以在了解本室OCV后，测定本室的RCV是十分必要的。

［1］彭明婷，谷小林．不同方法校准血液分析仪结果比较［J］．中华检验医学杂志，2000，23（1）：35-37．

［2］顾可梁，陈军浩，谷俊侠．医学实验诊断学进展［M］．南京：东南大学出版社，2000：47-53．

R446.11

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1674-9316（2014）09-0117-02

10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.09.063