虎杖蒽醌提取物对小鼠免疫功能的影响

2014-01-22毕聪明梁军生肖银霞

饲料工业 2014年16期

■王珅毕聪明陈强梁军生肖银霞

(辽宁医学院，辽宁锦州 121000)

虎杖又名酸筒杆、酸桶芦、大接骨、斑庄根，产自于陕西南部、甘肃南部、华东、华中、华南等地。根状茎供药用，有活血、散瘀、通经、镇咳的功效，研究表明，虎杖蒽醌注射液对麻醉兔有明显降压作用，白藜芦醇对口饲过氧化玉米油所致大鼠肝损害有治疗作用；大黄素、7-乙酰基-2-甲氧基-6-甲基-8-羟基-1，4-萘醌具有抗菌活性；虎杖可降低实验性动物糖尿病的发生率和死亡率；虎杖煎剂对外伤出血有明显止血作用，内服对上消化道出血也有止血作用[1-3]。许多中药提取物均是一种稳定性、安全性和环保性良好的抗生素替代物，但其在畜禽饲料中的适宜用量和最佳使用时间尚未确定。本试验研究虎杖蒽醌提取物对小鼠免疫功能的影响，以期对饲料添加剂的研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验材料

虎杖提取物，由辽宁医学院畜牧兽医学院药理教研室提供，含量为67%。

1.1.2 试验动物及设计

采用完全随机分组试验设计[4-7]，选用80只昆明小鼠，日龄和体重相近，试验前基础日粮预饲1周，随机分为4个组，每组4个重复，每个重复5只小鼠，试验期为28 d。试验分组及饲料配方见表1及表2。

表1 试验分组

表2 基础日粮组成及营养水平（%）

1.1.3 基础日粮

参照美国NIH-41标准，并结合生产实践配制基础饲粮，由辽宁医学院实验动物中心提供，其组成及营养水平见表2。

1.2 饲养管理

试验在辽宁医学院畜牧兽医学院实验中心进行，在小鼠进笼前，对房舍进行全面刷洗，消毒，正试期小鼠自由采食，自动饮水器供水。

1.3 测定指标及方法

试验第28 d，小鼠断尾采血1 ml凝固后12 000 r/min离心1 min，分离血清，-20℃保存备用，用于测定血清免疫球蛋白含量。断颈处死小鼠，剥离脾脏、胸腺、胰腺去掉筋膜及脂肪组织，置电子天平称量，计算出各器官相对体重的比值即为免疫器官指数。

1.3.1 免疫器官指数测定

测定试验第28 d时小鼠的免疫器官指数，即胸腺指数、脾脏指数，计算公式如下：

胸腺指数=胸腺湿重（mg）/活体重（g）×10；

脾脏指数=脾脏湿重（mg）/活体重（g）×10。

1.3.2 血清免疫球蛋白IgG、IgE含量测定

IgG、IgE含量采用双抗体夹心ELISA法，完全按照试剂盒说明书操作。

1.4 数据处理

应用SPSS13.0统计软件中的One-way ANOVA进行单因素方差分析，LSD进行多重比较，P＜0.01为差异极显著，P＜0.05为差异显著，数据用“平均值±标准差”表示。

2 结果与分析

2.1 虎杖蒽醌提取物对免疫器官指数的影响(见表3)

表3 虎杖蒽醌提取物对小鼠免疫器官指数的影响

从表3可以看出，添加不同剂量的虎杖蒽醌提取物使脾脏指数、胸腺指数都有明显提高。与对照组相比较，试验Ⅳ组数值上升最高，脾脏指数和胸腺指数分别提高了23.66%和46.73%(P＜0.05)。结果显示，与对照组相比，三个虎杖蒽醌提取物添加组小鼠的胸腺指数、脾脏指数均差异显著(P＜0.05)；三个不同添加剂量组间比较无显著性差异(P＞0.05)，表明虎杖蒽醌提取物可以使脾脏指数和胸腺指数增加，但增加剂量对免疫效果没有明显影响。

2.2 虎杖蒽醌提取物对小鼠免疫球蛋白含量的影响（见表4）

表4 虎杖蒽醌提取物对小鼠免疫球蛋白含量的影响(ng/ml)

从表4可以看出，血清中IgG的含量随着饲料中虎杖蒽醌提取物的增加而升高，28 d试验Ⅲ组较对照组提高了41.72%，但试验Ⅲ组和试验Ⅳ组之间差异不显著（P＞0.05）；试验的第28 d血清中IgE含量试验Ⅲ组较对照组提高了62.46%，但试验Ⅲ组和试验Ⅳ组之间差异不显著（P＞0.05）。

3 讨论

本研究主要比较了不同添加剂量的虎杖蒽醌提取物对小鼠胸腺、脾脏指数的影响，以及对IgG和IgE含量的影响。胸腺及脾脏这两种器官在免疫学中占据极其重要的位置，免疫功能的强弱与这两个免疫器官的重量变化有着密切关系。胸腺为机体的重要免疫器官，主要介导细胞免疫反应，对T淋巴细胞的成熟至关重要，为周围淋巴器官正常发育及机体免疫所必需，能产生和分泌胸腺素和激素类物质以及能储存分泌免疫细胞和免疫分子等。脾脏是机体最大的免疫器官，占全身淋巴组织总量的25%，含有大量淋巴细胞和巨噬细胞，是T、B淋巴细胞居留增殖以及淋巴细胞接受抗原刺激、发生特异性免疫应答的场所。脾脏还产生免疫活性细胞而发挥免疫功能，是抗体生成的器官。