肉种鸡支原体感染流行病学调查及双黄连防治效果的研究

2014-01-21潘树德李学俭曹冬伸张秋月

饲料工业 2014年21期

■ 潘树德李学俭曹冬伸张秋月张良

（1.沈阳工学院，辽宁抚顺 113112；2.沈阳农业大学，辽宁沈阳 110161）

双黄连是由金银花、连翘、黄芩三味中药按一定比例精制而提取制成的纯中药复方制剂。研究发现双黄连具有抗菌、抗病毒、抗真菌、消炎、解热、抗变态反应、抗心律失常，增强细胞免疫和体液免疫等药理作用，有清热解毒、疏风解表和增强肌体免疫功能的功效。

控制支原体病主要是通过药物控制和疫苗免疫两种方法。药物控制已经应用许多年，之所以结果不一致，可能与毒株致病力的差异和抗药性有关，故间歇用药和轮换用药很有必要。但必须认识到，目前无论哪一种抗菌素，都难以将存在于鸡群中的病原体根除。但随着抗生素的应用，耐药性支原体菌株不断产生，给治疗上带来很大困难。疫苗免疫目前国内尚无成功的疫苗上市，国外已有滑液囊支原体灭活苗和滑液囊支原体H株活疫苗用于生产，价格较高。

本试验使用平板凝集试验对肉种鸡饲养场进行了流行病学调查，并且检测中草药双黄连对鸡支原体阳性率的控制，探索双黄连对控制降低种鸡支原体病阳性率的影响效果。进一步评价中草药双黄连的临床意义，对评价中草药双黄连的多重功效，筛选最佳配方；对临床使用双黄连控制鸡支原体感染提供理论指导和实践依据。

1 试验一、肉种鸡支原体感染流行病学调查

1.1 材料与方法

1.1.1 试验动物及处理

2010年3月～2010年8月，对29家规模化肉种鸡饲养场进行了调查，并跟踪记录。随机对5 800只肉种鸡（均未免疫鸡支原体苗）直接采取血样，分离制成待检血清，并进行封存。而后用平板凝集试验检测支原体阳性率高低。

1.1.2 主要试剂及仪器

主要试剂：鸡支原体诊断抗原、鸡支原体阴性血清、阳性血清均购置于中国兽医药品监察所。

主要仪器：玻璃板、微量移液器、灭菌塑料吸头、离心机。

1.1.3 试验方法与步骤

将抽取血样制成鸡支原体待检血清：对29家规模饲养场每家随机抽取200只42日龄鸡只的血液，经离心、洗涤、悬浮、超声波裂解、染色制成。从冰箱中取出抗原，恢复至室温，使用前将抗原进行充分摇匀。将玻璃板分别标号为1、2、3、4，用移液器取25 μl抗原，分别滴在1、2、3、4号玻璃板；分别向1、2、3、4号玻璃板上滴25 μl待检血清、生理盐水，轻轻摇动玻璃板使其充分混合。室温下，放置2 min，观察结果。有明显凝集块，背景清亮者判为阳性，无凝集块出现判为阴性，介于二者之间的判为可疑，可重复测定1次。1.2 结果与分析

1.2.1 各规模饲养场肉种鸡支原体感染情况

先后抽样调查29家规模饲养场的肉种鸡5 800只，分为29组，每组200只肉种鸡，血清，对29组进行平板凝集试验，测出29组鸡毒支原体（MG）阳性感染率平均值33.38%，滑液支原体（MS）阳性感染率平均值50.69%（见表1），最高感染批次达100%。

表1 鸡支原体（霉形体）检测报告

1.2.2 肉种鸡支原体感染情况分析

鸡支原体病是由鸡支原体引起鸡的一类疾病总称。有鸡败血支原体(MG)引起的慢性呼吸道病和滑膜支原体(MS)引起的鸡传染性滑膜炎。近年来，随着鸡只饲养密度的增大，鸡支原体病发病率越来越高。支原体病在现代化肉种鸡场属常见疾病，也是最难以根除的，因为本病可以经种蛋垂直方式传播，也可通过水平传播，可以单发，也可并发或者继发，本病一年四季均可发生，因此本次调查采取一年时间不定期进行调查。经分析，饲养环境的差的饲养场，阳性感染率高，饲养环境优越的饲养场，阳性率较低。

1.3 小结

使用平板凝集试验对肉种鸡饲养场进行了流行病学调查，试验结果表明，29家规模饲养场的肉种鸡鸡毒支原体阳性感染率平均值33.38%，滑液支原体阳性感染率平均值50.69%，最高感染批次达100%，说明鸡群中的鸡毒支原体和滑液支原体的阳性感染率均较高。

2 试验二、双黄连对肉种鸡支原体阳性率的影响试验

本试验通过对肉种鸡使用双黄连粉剂，对比该药物对两组肉种鸡（对照组和试验组）支原体阳性率数据的影响，对肉种鸡从8日龄开始给药，分别检测在不同日龄及转群应急条件下，该药物对鸡支原体的控制，探索双黄连对控制降低种鸡支原体病阳性率的影响，从而判定该药物对控制鸡支原体病的作用效果。

2.1 试验材料

2.1.1 试验动物

8日龄肉种鸡（均未免鸡支原体苗），共80只，分两组，每组40只，由某牧业有限公司标准化肉种鸡饲养场提供。

2.1.2 药品及主要试剂

双黄连粉剂。待检血清（为翅下静脉采血，离心、分离血清，并标记，储存于2～8℃冰箱内待检）；鸡支原体平板凝集抗原、鸡支原体阴性血清、阳性血清均购置于中国兽医药品监察所。冰箱（BCD-230NJV型，苏州三星电子公司）；平板凝集用玻璃片；移液器；灭菌牙签；灭菌生理盐水。

2.1.3 试验方法

2.1.3.1 试验日期

本试验开始于2010年9月7日，最终于2011年4月11日结束。

2.1.3.2 饲养及免疫

免疫程序：3日龄新城疫弱毒苗滴眼；10日龄新城疫（禽流感二联灭活苗颈部皮下注射）；12日龄法氏囊苗滴口，17日龄再重复1次；56日龄新城疫弱毒苗滴眼。

2.1.3.3 饲料

预混料选用帝斯曼饲料配制相应全价料，按标准进行饲喂。

2.1.4 方法及步骤

2.1.4.1 试验动物分组

共分两组，分别为对照组和试验组，每组40只。对照组正常饲养，不给予双黄连药剂，采取自由采食及饮水；试验组按每天早晚100 g双黄连粉剂兑400 kg水给药，具体给药方案见表2，同时也采取自由采食及饮水。

表2 试验组给药方案

2.1.4.2 试验动物饲养观察

每天观察试验组和对照组的饲养效果，注意呼吸道症状、发病率、康复时间、康复率等具体变化。

2.1.4.3 试验步骤

对肉种鸡实施翅下静脉采血，并分离制作成待检血清。

通过平板凝集试验，对照组和试验组的试验动物分离制成的待检血清进行阴阳性对比，并记录具体阴阳性鸡只数。

通过计算得出两组鸡毒支原体和滑液支原体的阳性率，从而判定双黄连粉剂对控制鸡支原体病方面的实际效果。

根据以上判定标准，对实验两组肉种鸡血清做平板凝集试验，得出检测结果见表3。

2.2 结果与分析

由表3可以看出，没有给予双黄连粉剂的对照组肉种鸡在饲养过程中，鸡毒支原体、滑液支原体的阳性率在8～11日龄分别为45%和50%，转群期间12～65日龄分别为50%和60%，66～70日龄分别为50%和65%，106～111日龄分别为60%和80%，再次转群后的112～142日龄分别为70%和80%，由此看出对照组肉种鸡鸡毒支原体、滑液支原体的阳性率随日龄增加呈现上升的趋势。而给予双黄连粉剂的试验组肉种鸡鸡毒支原体、滑液支原体的阳性率8～11日龄分别为40%和45%，转群期间12～65日龄分别为30%和45%，66～70日龄分别为25%和40%，106～111日龄分别为10%和20%，再次转群后的112～142日龄分别为0%和15%。由此看出给予双黄连粉剂的试验组肉种鸡鸡毒支原体、滑液支原体的阳性率随日龄增加呈现下降的趋势。