烟草根茎提取物对辣椒茶黄螨的杀螨活性研究

2014-01-11张红琳

长江蔬菜 2014年6期

关键词：根茎丙酮平行

张红琳

（重庆市北碚区农业委员会，400715）

烟草根茎提取物对辣椒茶黄螨的杀螨活性研究

张红琳

（重庆市北碚区农业委员会，400715）

以石油醚、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水5种溶剂对烟草根茎的平行提取物及顺序提取物为材料，研究其对辣椒茶黄螨的触杀毒力。试验结果表明，在不同溶剂的平行提取物及顺序提取物中，分别以乙醇提取物对辣椒茶黄螨的致死率最高，48 h校正死亡率分别为89.56%和81.77%，分别显著高于其他溶剂处理；乙醇平行提取物及顺序提取物对辣椒茶黄螨的致死中浓度分别为0.935 7和1.100 8 mg/mL，显著高于对照哒螨酮的0.133 6 mg/mL，乙醇提取物对辣椒茶黄螨的毒杀效果较哒螨酮差。

烟草根茎；辣椒茶黄螨；杀螨活性

。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试烟草根茎平行提取物：称取5份上述粉末，每份100 g，分别装入5个10 L的烧瓶，以6∶1的比例依次分别向5个磨口瓶中加入600 mL的水、丙酮、无水乙醇、乙酸乙酯和石油醚，密闭，每日振摇3次，于25℃浸渍1周。过滤，将水浸液加热浓缩为浸膏状，丙酮、无水乙醇、乙酸乙酯和石油醚浸提液旋转蒸发为浸膏状，获得5种溶剂的植物平行提取物浸膏，4℃存放于冰箱内备用。

供试烟草根茎顺序提取物：称取100 g烟草根茎粉末，先用600 mL石油醚30～60℃冷浸1周，过滤，残渣备用，滤液浓缩挥发后获得石油醚提取物浸膏，4℃存放于冰箱内备用；过滤后的残渣再以600 mL乙醇冷浸1周，过滤，将滤液浓缩定容获得乙醇顺序提取物浸膏；残渣再按序用丙酮、乙醇和水重复上述操作，分别获得丙酮、乙醇和水的顺序提取物浸膏。

称取上述平行提取物与顺序提取物浸膏少量，加入3%的吐温-80，以蒸馏水稀释配制成5 mg/mL溶液，对供试对象进行生物测定。

1.2 试验方法

①茶黄螨的生物测定参照FAO推荐的测定螨类抗药性的标准方法——玻片浸渍法[14]进行并改进。将载玻片一端贴上双面胶带，将供试螨背部粘于双面胶带上，每玻片40头，于温度（26±1）℃、RH 60%～80%的环境下放置4 h，用解剖镜检查，剔除死亡和不活泼的个体，记载活螨数。而后，将带螨的玻片一端浸入相应浓度的药液中，浸渍5 s后取出，用滤纸吸除螨体及其周围多余药液，同饲养条件下放置3 d，每24 h检查一次。用毛笔轻触螨体5次，以螨足均不动者为死亡，试验重复3次。以清水加相应量吐温-80的溶液为对照。进行毒力测定时，每种药液按预试梯度配制5个浓度，每个浓度重复3次，计算致死中浓度。

②数据处理采用校正死亡率来评判各提取物对茶黄螨的生物活性，计算方法如下：校正死亡率（%）=[（处理组死亡率-对照组死亡率）/（1-对照组死亡率）]×100%。校正死亡率经反正弦转化后，进行方差分析，比较各处理结果间的差异。由SPSS 14.0软件完成One-Way ANOVA之Duncan's检验和试验数据的方差分析[15]。

2 结果与分析

2.1 烟草根茎平行提取物对辣椒茶黄螨的室内触杀毒力

从表1看出，水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和石油醚粗提物对辣椒茶黄螨的48 h校正死亡率分别为57.35%、89.56%、76.03%、58.38%和40.87%。其中，乙醇平行提取物对辣椒茶黄螨的杀螨活性最强。

2.2 烟草根茎顺序提取物对辣椒茶黄螨的室内触杀毒力

从表1、2看出，相同处理时间下，烟草根茎平行提取物对辣椒茶黄螨的致死活性高于顺序提取物。在烟草根茎不同溶剂平行提取物中，乙醇和丙酮提取物对茶黄螨的致死活性较好，处理48 h校正死亡率分别为89.56%和76.03%；顺序提取物中，乙醇和丙酮提取物对茶黄螨的致死活性较好，处理48 h校正死亡率分别为81.77%和73.27%，与同组其他溶剂的提取物间存在显著差异，且乙醇顺序提取物对茶黄螨的致死活性显著高于丙酮顺序提取物。

表1 5 mg/mL烟草根茎平行提取物对辣椒茶黄螨的室内生物活性

表2 5 mg/mL烟草根茎顺序提取物对辣椒茶黄螨的室内生物活性

2.3 烟草根茎乙醇平行、顺序提取物与哒螨酮对辣椒茶黄螨的毒力回归直线

处理48 h后的5 mg/mL乙醇平行提取物、顺序提取物对茶黄螨具有明显的致死作用。为了进一步明确平行提取物与顺序提取物间的毒力差异情况，需要做进一步的毒力测定，以致死中浓度来比较2种溶剂提取物的毒力差异，并以15%哒螨酮乳油3 000倍液为对照，结果如表 3所示。

表3 丙酮、乙醇烟草根茎平行提取物与哒螨酮对茶黄螨的毒力回归测定（48 h）

从表3看出，2种提取物中，对辣椒茶黄螨毒力较强的是乙醇平行提取物，其LC50为0.935 7 mg/mL，其致死中浓度大于对照哒螨酮的0.133 6 mg/mL，故其对辣椒茶黄螨的毒杀效果低于哒螨酮。

3 讨论与结论

烟草根茎化学成分丰富，主要为烟碱、酚类、有机酸类、醛酮类、萜烯类及酯醇类等重要物质，其中，酚类物质具有40余种，占有较大比例，主要包括苯酚、间甲苯酚、对甲苯酚、邻甲苯酚、苯二酚、间苯二酚、儿茶酚等，而某些酚类物质特有的化学结构如消螨酚（Dinex）等多具有较强的杀螨活性。据相似相容原理，醇类对酚的溶解性相对较高，同时，乙醇极性大，对生物碱类也有较好的溶解性，其提取物中含有大量生物碱及酚类物质，正好阐释了乙醇提取物杀螨活性较的原因。

烟草、除虫菊、毒鱼藤合称为“三大植物性农药”，将烟草根茎作为植物源杀螨药物的开发，至今鲜有报导；而将烟草根茎作为植物源杀螨药物，除了具有原料易得、浸提工艺简单等优点外，还具有低毒、高效、无残留、不易产生抗性等优点，加之烟草种植广泛，将其根茎作为植物源农药进行开发具有很大的潜力市场和资源。

对烟草根茎不同溶剂提取物的生物活性测定结果表明，烟草根茎杀螨活性物质主要存在乙醇提取物中，以乙醇平行提取物的效果较为显著；另从表1、2还可以看出，在乙醇之外的溶剂提取物仍然具有一定的杀螨活性，证实了烟草根茎中含对茶黄螨具有杀螨生物活性的物质不止一种，且极性大小不同。

烟草根茎中成分较为复杂，对辣椒茶黄螨具杀螨活性的物质含量相对过低，虽然乙醇平行提取物杀螨活性较好，但还是低于药物哒螨酮活性。只有更深层次地将活性成分结构化合物进行分离、鉴定，才能充分证实杀螨活性物质归属，更有利于在下一步对烟草根茎中有效成分作为植物源活性杀螨剂的开发中奠定基础理论。

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Taking petroleum ether(30℃-60℃),ethyl acetate,acetone,ethanol and water as solvent respectively,the paper studied the acaricidal activity of extracts from tobacco root and stem againstLatus.The results showed that,among the five solvents,ethanol parallel extract and sequential extract had highest lethallty rates againstLatus respectively,and their corrected death rates were 89.56%and 81.77%in 48 hours,which were significantly higher than that of other solvents treatments respectively.The median lethal concentrations (LC50)of ethanol parallel extract and sequential extract were 0.935 7 mg/mL and 1.100 8 mg/mL,which were significantly higher than that of control treatment pyridaben (0.133 6 mg/mL),so the ethanol extracts had worse acaricidal effect againstLatus than pyridaben.

Tobacco root and stem;Latus;Acaricidal activity