血沉、HLA-B27基因、C反应蛋白测定对强直性脊柱炎的诊断价值

韦蓉梅 董丽平 吴红慧 徐燕群

广东省广州市正骨医院检验科，广东广州 510045

强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）是以骶髂、外周关节和肌腱附着点出现慢性炎症为特征的一种进行性疾病，其发病隐匿，一旦发病，病情逆转较难，早期的诊断可为治疗及预后争取时间。 许多文献表明，血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）等参与了人体的炎性反应，对关节炎的发生、发展意义重要。还有研究认为血沉（ESR）、C 反应蛋白（ C-reactive protein， CRP）比血清VEGF 能更准确反映疾病活动性[1-5]，另外，AS 的发病与HLA-B27 密切相关[6]。因此本研究通过测定对照组与早期AS 患者血清中ESR、HLA-B27、CRP 水平的变化，并通过受试者工作曲线（ROC 曲线）的分析，探讨参与AS 的临床及其对AS 的诊断意义。 现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010 年2 月～2012 年2 月来广东省广州市正骨医院（以下简称“我院”）门诊和病房接受治疗的AS 患者60 例（AS 组），均符合AS 的分类标准[7]，其中男31 例，女29 例，年龄19～63 岁，平均（38.2±4.7）岁，病程2～7 年。 另选择同期来我院进行健康体检者30 例（对照组），其中男18 例，女12 例，年龄18～60 岁，平均（36.2±7.2）岁。 两组在性别、 年龄等基本资料上比较， 差异无统计学意义 （P >0.05），具有可比性。

1.2 测定方法

采集两组对象静脉血各2 mL， 分别置于空白真空管和血常规抗凝管中。 备用。

1.2.1 ESR 测定 3000 r/min 离心10 min，吸去血清，取上清液。 应用Westergren 法检测（正常范围男0～15 mm/1 h，女0～20 mm/1 h）。

1.2.2 CRP 检测 3000 r/min 离心10 min，吸去血清，取上清液。 采用免疫浊度分析法检测（正常范围≤10 mg/L）。 ESR和CRP 测定试剂均由美国贝克曼公司提供，仪器为Beckman-Coulter Immage。

1.2.3 HLA-B27 检测 6 h 内行荧光抗体染色。 抗凝全血（25 μL）与荧光抗体（15 μL）彻底混合后放置暗处孵育30 min，室温，然后加入溶血素（1∶10 稀释）2 mL 迅速混匀，再置暗处孵育10 min， 室温，2000 r/min 离心5 min， 吸去上清，加入pH 7.2 磷酸盐缓冲液（PBS）2 mL 洗涤。 HLA-B27直标单克隆抗体以及溶血素均由美国Becton-Dickinson（BD）公司提供，仪器为FCSCalibur 流式细胞仪（BD）公司。

1.3 病情活动评价

采用Cowling 法[8]，共分3 个水平，活动、可疑活动、静止。 活动：前4 周内腰痛或晨僵加重，需增加非甾体抗炎药（ NSAIDs）用量；或足跟痛、足底腿炎并骶髂关节压痛；可疑活动：持续、稳定疼痛或晨僵，需坚持NSAIDs 治疗；静止：极少症状或无症状，需少量服药或不用药。

表1 两组患者基本资料比较

1.4 纳入标准

对照组： 无异常临床表现和影像学表现。 AS 组：X 线片提示双侧Ⅱ～Ⅲ级或单侧Ⅲ～Ⅳ级骶髂关节炎，并伴以下任一项临床表现：①腰背痛、晨僵超过3 个月，但休息无缓解；②在前后和侧屈方向上腰椎活动受限；③胸廓活动度小于同年龄、同性别的健康人。

1.5 排除标准

①X 线平片及CT 示骶髂关节Ⅱ级或以下者； ②其他风湿免疫系统疾病及甲状旁腺功能亢进、 骶髂关节结核、肿瘤等。

1.6 统计学方法

应用SPSS 18.0 软件进行统计学分析， 计量资料数据以均数±标准差（s）表示，采用t 检验。 计数资料以率表示，独立配对的二分类资料比较采用χ2检验，有序的多分类资料用秩和检验。 相关性分析采用直线相关分析，多因素分析采用Logistic 相关分析。 以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者基本资料比较

经统计， 两组在性别、 年龄方面比较无明显差异，AS组疾病活动情况、ESR、CRP 水平、HLA-B27 阳性率及X线片改变比率均高于对照组，差异有高度统计学意义（P ＜0.01）。提示，ESR、CRP 水平、HLA-B27 及X 线片改变可能影响AS 的发生。 具体见表1。

2.2 AS 与各相关指标的单因素分析

单因素分析表明，ESR、CRP 水平、HLA-B27 是影响AS 的发生重要危险因素，三者均参与AS 的发生（P ＜0.05）。具体见表2。

表2 AS 与各相关指标的单因素分析

2.3 AS 与各相关指标的多因素Logistic 相关分析及ROC曲线验证

结果显示，ESR、CRP 水平与AS 的发生密切相关，尽管HLA-B27 具有高度的敏感性和特异性， 但检测阳性并不能作为AS 的确诊指标， 也不能作其筛选指标。 提示，ESR、CRP 水平可用来诊断AS，HLA-B27 只能增加诊断的可能性，不能用来确诊或判断预后。 具体见表3、4。

表3 各相关指标多因素Logistic 分析

表4 各相关指标ROC 曲线

3 讨论

AS 好发于中青年（20～30 岁），属遗传性免疫系统疾病的一种，AS 早期病理改变为骶髂关节炎，其炎变部位主要是软骨下关节囊、纤维软骨、纤维环等，其中骶髂关节炎与关节旁骨髓炎为可作为其诊断的早期的主要特点[9-11]，并结合根据其病理变化与X 线表现， 但漏诊及误诊比例较大。由于AS 治愈率较低，给患者带来极大痛苦。 因此，有效可靠的诊断对于患者的预后至关重要。 本研究通过测定患者及健康人血清中ESR、HLA-B27、CRP 水平的变化，探讨其对AS 的诊断价值，结果表明，ESR、CRP 水平与AS 的发生密切相关。

急性炎症时，血中急性反应时相物质增多明显，导致ESR 上升加快。 ESR 对于疾病的诊断特异性虽然不高，但ESR 增快可间接反映炎症或组织损伤的存在，且其升高程度与组织损伤程度呈现明显的正相关，是检测疾病活动性的参考指标[12-13]。 本研究也结果显示，ESR 在AS 组较对照组增大（P ＜0.01），且与AS 多因素分析相关性明显（P =0.008）。CRP 是第一个被发现的存在于急性期的反应蛋白，是炎症组织损伤的标志物。 CRP 的生理应激作用较为明显，可结合补体C1q，参与经典途径过程来激活补体，清除免疫复合物的。 通过结合Fcγ 受体介导吞噬细胞清除免疫复合物及凋亡的细胞碎片，刺激单核细胞表面的细胞因子及其他免疫调节，当有炎症存在时，CRP 升高显著[14-15]。 本结果也显示，AS 组CRP 水平高于对照组（P ＜0.01），动态监测CRP 临床价值较大。但CRP 在AS 反应中的作用机制及在病理生理过程中的作用有待进一步探究。 另外，本研究显示，尽管HLA-B27 具有高度的敏感性和特异性，但检测其阳性并不能作为AS 的确诊指标， 也不能作其筛选指标。 在AS 实验诊断方面，HLA-B27 抗原尚不能作为早期诊断AS 的指标，也不能预见患者的预后，只能增加诊断的可能性，更不能替代骶髂关节炎的存在与否来诊断AS。

综上所述，检测血清ESR、CRP 水平水平，对判断AS病情活动性及预后均有一定的参考价值，通过降低强直性脊柱炎的炎性反应，可能有助于改善AS 患者病情，从而改善其临床表现。

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