肝癌和肝病患者血清甲胎蛋白异质体的检测及临床意义

戴亚新，张时良，裴 豪

（无锡市传染病医院 检验科，江苏 无锡214005）

原发性肝癌（（primary hepatic cancer，PHC））是我国常见恶性肿瘤之一，恶性度高、病情进展快，治疗棘手，疗效欠佳，死亡率高［1］，一旦发现往往已属中、晚期。因此早期诊断对提高患者生存率和生活质量极为重要。甲胎蛋白（AFP）被公认为临床肝癌诊断血清标志物，但有30%－40%的PHC患者AFP阴性。另外在一些良性肝病中也有不同程度的升高，特别是在高危人群如慢性肝炎和肝硬化患者中有20%－50%的AFP升高者。由于不能有效区分良性肝病和恶性肿瘤，使得很多患者无法得到及时诊断和治疗。AFP可分为LCA非结合型（AFPL1、AFP－L2）、LCA 结合型（AFP－L3），其中 AFPL1主要存在于良性肝病中，AFP－L2来自孕妇，AFP－L3为肝癌细胞所特有。本研究采用微量离心柱分离甲胎蛋白异质体（AFP－L3），应用化学发光法对本院78例包括肝癌、肝硬化和慢性肝炎的患者血清进行了检测，探索AFP－L3检测的临床意义，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2010年12月－2011年3月本院住院和门诊患者的病例资料，包括原发性肝癌患者27例（均经临床、B超、病理检查确诊），诊断符合1999年成都第四届全国肝癌学术会议修订的原发性肝癌诊断标准［2］，其中男25例，女2例（年龄30－80岁，平均56岁）；各类慢性肝病患者51例，包括肝硬化20例，慢性肝炎31例，诊断标准符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订的“病毒性肝炎防治方案”中病毒性肝炎诊断标准［3］，其中男36例，女15例（年龄21－77岁，平均54岁）。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 受检者均于空腹采集静脉血5 ml，3 000r／min离心分离血清，－20℃保存。

1.2.2 检测方法 AFP美国雅培公司产品，仪器为雅培I2000化学发光仪，具体步骤严格按产品说明书操作，以AFP＞25ng／ml作为AFP异常升高标准。AFP－L3检测试剂由北京热景生物技术有限公司提供，AFP－L3的分离采用微量离心柱法，离心柱内装有耦联了小扁豆凝集素（LCA）的琼脂糖，可以特异结合AFP－L3，当血清流过离心柱时，与LCA结合力强的甲胎蛋白异质体就结合于柱中，经过清洗洗去不结合的甲胎蛋白，再经过离心洗脱后获得AFP－L3，然后应用化学发光法（雅培I2000化学发光仪）检测 AFP－L3的含量，并计算 AFP－L3占AFP总量的百分比，以美国FDA批准AFP－L3%＞10%作为阳性判断标准，具体步骤严格按试剂盒说明书进行。

1.3 统计学处理 由SPSS15.0统计软件分析，检测数据用均值表示，组间比较采用F检验。异常率比较采用卡方检验。P＜0.05有统计学差异。

2 结果

2.1 肝癌及慢性肝炎、肝硬化组AFP、AFP－L3（%）检测结果 见表1。如表1所示肝癌组血清中AFP、AFP－L3（%）明显高于肝硬化组和慢性肝炎组（P＜0.01）。在慢性肝炎组和肝硬化组，AFP、AFP－L3（%）均无统计学差异（P＞0.05）。

表1 肝癌、肝硬化、慢性肝炎患者血清AFP、AFP－L3／AFP（±s）

表1 肝癌、肝硬化、慢性肝炎患者血清AFP、AFP－L3／AFP（±s）

注：与肝硬化组和慢性肝炎组比较＊＊P＜0.01；与慢性肝炎组比较＊P＞0.05。

组别 n AFP（ng／ml） AFP－L3／AFP（%）慢性肝炎组31 163±264 0.056±0.031肝硬化组 20 76±86＊ 0.070±0.054＊肝癌组 27 568±453＊＊ 0.530±0.577＊＊

2.2 肝癌及慢性肝炎、肝硬化组AFP、AFP－L3（%）异常率 见表2。以AFP－L3（%）＞10%，AFP＞25 ng／ml作为异常升高标准，如表2所示肝癌组AFPL3（%）异常率明显高于肝硬化组和慢性肝炎组（P＜0.01）。AFP＞25ng／ml作为异常升高标准，肝癌、慢性肝炎、肝硬化组间AFP异常率无统计学差异（P＞0.05）。

表2 肝癌及慢性肝炎、肝硬化患者血清AFP、AFP－L3（%）阳性率比较

2.3 AFP、AFP－L3%的灵敏度、特异度比较 诊断肝细胞癌的灵敏度和特异度AFP分别为78%和43%；AFP－L3%分别为70% 和 90%。AFP－L3（%）、AFP联合检测诊断肝细胞癌灵敏度达89%（24／27）。

3 讨论

肝病患者极易演化为PHC，因此对PHC的早期诊断的重要性不言而喻。目前临床肝癌早期诊断的血清学检测指标主要依赖于AFP，但是其相对的灵敏度和特异性往往给临床带来困惑。本研究显示肝癌患者血清中AFP含量虽然明显高于肝硬化和肝炎患者，但肝硬化和肝炎患者的AFP也有不同程度的升高。甚至在部分良性肝病中还是存在较高的假阳性，实验资料显示，以 AFP＞25ng／ml作为异常升高标准，其灵敏度78%、特异性仅为43%。因此单纯依赖AFP来鉴别诊断良恶性肝病存在局限性。

文献报道甲胎蛋白异质体AFP－L3为肝癌细胞所特有，与肝癌发生密切相关，是作为鉴别良恶性肝病鉴别的指标［4，5］。我们研究发现，肝癌组 AFP－L3（%）明显高于肝硬化组和慢性肝炎组（P＜0.01），而在慢性肝炎组和肝硬化组中，AFP－L3（%）均无统计学差异（P＞0.05）。以 AFP－L3（%）≥10%为阳性判断指标，肝癌患者血清AFP－L3（%）的灵敏度为70%，特异度高达90%。联合检测诊断灵敏度达89%。以AFP－L3%为诊断指标时，肝癌和慢性肝炎可以得到有效区分。AFP－L3%所得的百分比含量与血清AFP浓度无关。针对AFP低浓度的肝癌患者，加用AFP－L3的检测，则可弥补诊断的不足。

本研究中，在临床诊断B超诊断中均为阴性，AFP－L3%为阳性的5例患者，在后期进一步进行CT影像学检查，其中2例确诊肝癌。因此认为良性肝病患者中 AFP－L3（%）异常升高（＞10%）者，AFP－L3%的阳性结果起到了重要的预警作用。目前，还没有一种指标能诊断全部PHC，因此在血清标志物检测的同时还必须结合临床及影像学检查，综合判断，以免漏诊。

［1］汤 钊.现代肿瘤学［M］.第2版，上海：上海医科大学出版社，2001.553.

［2］中国抗癌协会肝癌专业委员会.原发性肝癌诊断标准［J］.中华肝脏病杂志，2000，8（3）：135.

［3］中华医学会.病毒性肝炎防治方案［J］.中华肝脏病杂志，2000，8：324.

［4］Yamashita F，Tanaka M，Satomura S，et al.Prognosticsignificance of LensculinarisagglutininA2reactivealpha2fetoproteininsmallhepatoc ellularcarcinoma［J］.Gastroenterology，1996，111：996.

［5］青柳璺.肿瘤标志物的临床诊断意义及展望－甲胎蛋白（AFP）L3组分［J］.日本医学介绍，2005，26：49.