猪精液稀释保存技术要点

中国牧工商（集团）总公司 齐 岩

1 猪精液稀释的现状

17℃保存，每天混匀两次，保存2～3天。

2 猪精液稀释保存技术要点

2.1 关于稀释粉溶解

需准备：双蒸水（D.D.W.）、量筒、烧杯、磁力搅拌器、搅拌棒。

2.1.1 提前用量筒测量1升的双蒸水，注入烧杯。开始溶解前的双蒸水的温度是35℃～37℃左右。

2.1.2 一边将稀释粉缓慢地倒入，一边轻轻用搅拌器搅拌。为了避免包装上附着的垃圾混入，提前擦干净包装。

2.1.3 用搅拌器轻轻搅拌，直到完全溶解。溶解以后，测定稀释液的PH值，确认在6.6～7.0的范围内。如果溶解后的稀释液在溶解当日不使用的话，要放在冰箱里保存。

2.2 关于精液稀释

需准备：稀释液、自动分注器、一次性吸管、量筒、烧杯、热水池、精液瓶。

2.2.1 加热稀释液，使其与精液温度相同，实验室的室温保持在25℃。

2.2.2 计数原精液的浓度，计算稀释比例。

2.2.3 按稀释比例，将稀释液缓慢、分次倒入原精液中。

由于精子非常敏感，所以操作时一定要注意：

不要给稀释中的精子带来温度刺激；不要使用过冷、过热的容器；稀释容器最好放在发泡容器的盖子上。

2.2.4 轻轻加入与原精液等量的稀释液，慢慢地进行混合。

2.2.5 再加入与混合后的等量的稀释液，慢慢地进行混合。

2.2.6 反复操作至目标的量为止。

注意：精液不要直接放置在冰冷的桌面上；对于稀释精液来说，原精液的比率过大，可能会造成稀释液的性能降低；避免原精液量的比率占总量的20%以上。

2.3 关于稀释精液的保存

2.3.1 避免冷气直接接触到精子瓶。

2.3.2 如果没有放在泡沫容器中而直接放在冰箱里，精液的温度会急剧下降。

2.3.3 猪精液对温度冲击比较弱，如发生急剧的温度下降，精子的存活率和活力都会降低。

2.3.4 保存精液时，请一定将精液瓶放在泡沫箱中。

2.4 关于稀释精液活力的检测

2.4.1 轻轻地将精液瓶反转混合。

2.4.2 精子瓶打开之后，用移液器取1毫升的稀释精液至EP管中。

2.4.3 活力判定之前，在35℃～37℃的热水锅里最少加热10分钟。

注意：如加热不够的话，也许无法正确的判定；检测使用的载玻片需要预热。