P53蛋白鉴别水肿性流产及葡萄胎的应用

胡桂明，任景丽，王宪远

(郑州大学第二附属医院病理科 河南郑州 450014)

葡萄胎(Hydatidiform mole，HM)是较常见的异常妊娠，在世界范围内的发生率为1:(500～1 000)次妊娠［1］，又分为完全性葡萄胎(Complete hydatidiform，CHM)和部分性葡萄胎(Partial hydatidiform，PHM)，CHM和PHM可以由免疫组化标记P57蛋白得到很好的鉴别［2］，但水肿性流产(Hydropic abortus，HA)与两者的鉴别还是一个难点，有研究报道P53蛋白对两者鉴别有一定价值［1］。本实验中应用P53蛋白分别对正常绒毛、水肿性流产、部分性葡萄胎和完全性葡萄胎标记，分析其临床意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 临床资料:收集郑州大学第二附属医院2010年5月至2012年5月临床和病理形态确诊的正常胎盘绒毛、水肿性流产、部分性葡萄胎和完全性葡萄胎病例各20例。

1.1.2 方法与试剂:应用免疫组化SP法检测突变型P53蛋白在正常胎盘绒毛、水肿性流产、部分性葡萄胎和完全性葡萄胎中的表达水平，操作严格按照试剂盒说明书进行，已知阳性切片做阳性对照，鼠抗人P53克隆抗体购买自Gene Tech公司。

1.2 免疫组化结果判定 免疫组化结果由两位病理医师交叉判定，P53的免疫组化结果判断参照陈云新等［3］报道的方法，P53的阳性表达主要定位于细胞滋养细胞的胞核，其胞核呈明确的棕黄色判定为阳性;在切片的不同部分选取5个高倍视野，每个视野计数100个细胞，计算阳性细胞占所有细胞的比例，阳性细胞数平均＜10%为阴性，≥10%为阳性。

1.3 统计学处理 运用FISH确切概率法及t检验进行数据分析，P＜0.05，差异有统计学意义。

2 结果

2.1 正常胎盘绒毛及HA、HM组织病理学特点 正常胎盘绒毛组织未见明显水肿，滋养细胞无明显增生;HA可见绒毛间质轻度水肿，滋养细胞无明显增生;PHM的绒毛间质水肿，可见中央水池形成及滋养细胞包涵体，绒毛周围滋养细胞局灶性增生，绒毛间质有或无血管，血管腔中可见胎儿的有核红细胞;CHM可见绒毛间质明显水肿，中央水池形成，滋养细胞增生明显，绒毛间质中血管消失。

2.2 P53蛋白在正常绒毛、HA和HM中表达水平正常绒毛中P53蛋白呈阴性表达，HA中仅有2例P53蛋白呈阳性表达，但阳性细胞数＜5%，按照免疫组化结果标准判定为阴性;PHM中P53蛋白在20例均为阳性表达，每例阳性细胞数在50%以上，CHM中P53蛋白在20例中也均为阳性表达，每例阳性细胞数高达80%以上;P53蛋白在各组病例中的阳性率，PHM较HA明显增加，CHM较PHM明显增加，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 P53蛋白在正常绒毛、HA、CHM、PHM中表达水平(n，%)

3 讨论

葡萄胎的发生由基因遗传引起，完全性葡萄胎有一个雄性遗传的补体，其所有遗传的物质是父亲衍化的，即由“空卵”单精受精引起，随后单倍体精子的补体复制导致一个双倍体基因型;而部分性葡萄胎通常是三倍体，由两个精子与一个卵子发育形成，导致2:1的父系与母体染色体比。目前，完全性葡萄胎与部分性葡萄胎的鉴别用P57蛋白标记，能够很好的区分开来，但是，随着超声影像学的发展，早期葡萄胎的发现使其与水肿性流产从显微镜下很难区分开来，诊断不明确直接影响患者的治疗和心理康复，已有学者用P53蛋白实验性用于两者的鉴别诊断，并得出一定数据［3-4］，在本实验中，用 P53蛋白标记正常胎盘绒毛、水肿性流产、部分性葡萄胎和完全性葡萄胎，进一步观察其表达水平，分析其意义。

P53基因位于17号染色体断臂，其编码产物为相对分子质量为53 kU的核结合蛋白，野生型P53蛋白是细胞生长的负调节因子，被认为是抗癌基因，当P53基因突变形成突变型P53时，就具有了致癌作用［5］。康安静等［6］的研究表明，突变型P53在正常绒毛中不表达，但在绒癌的表达中高达88.9%，说明P53蛋白在葡萄胎的发生发展中可能起到一定的作用。在本实验中，正常绒毛中P53蛋白呈阴性表达，水肿性流产中仅有少数病例P53蛋白呈阳性表达，但阳性细胞数＜5%，按照免疫组化结果标准判定为阴性;部分性葡萄胎中P53蛋白的阳性细胞数为50%以上，完全性葡萄胎中P53蛋白的阳性细胞数高达80%以上，本组结果与陈云新［3］相似，说明P53蛋白在鉴别水肿性流产和葡萄胎时能够起到一定的辅助作用。

P53蛋白在鉴别水肿性流产和葡萄胎的具体机制还尚不明确，需更多实验来进一步证实。同时，水肿性流产和葡萄胎的鉴别还需要更多的研究人员重视，以期待能找出更为理想的鉴别标准，使病理诊断更为准确。

［1］Sebire N J，Fisher R A，Rees H C.Histopathological diagnsis of partial and complete hydatidiform mole in the first trimester of pregnancy［J］.Pediatr Der Pathol，2003，6(1):69-77.

［2］杨绍敏，由江峰，张小为，等.P57KIP2表达结合流式细胞术分析对葡萄胎的辅助诊断价值［J］.中华病理学杂志，2009，38(9):580-584.

［3］陈云新，沈丹华，顾依群，等.P57和P53蛋白在水肿性流产及葡萄胎鉴别诊断中的作用［J］.中华病理学杂志，2011，40(10)，694-697.

［4］蒋莉萍，袁金兰，肖凤，等.P57和P53在完全性和部分性葡萄胎中的表达及意义［J］.中国实验诊断学，2011，15(10):1755-1757.

［5］Garxia C A，Ahmadian A.Mutation detection by pyrosequencmg:Sequencing of exona 5-8 of the tumor suppressor gene［J］.Gene(Amsterdam)，2000，253(2):249.

［6］康安静，孙润芹，黄莺，等.妊娠滋养细胞疾病P16和P53蛋白表达及意义［J］.西安医科大学学报，2002，23(3)，233-235.