三环·丙环唑525g/L悬乳剂气相色谱分析方法研究

程运斌 刘育清

（1.湖北省农药及农产品安全质量监督检验站 武汉 430064； 2.湖北省农药检定管理所 武汉 430070）

1 前言

三环唑的化学名称:5-甲基一1，2，4一三唑并（3，4-b）苯并噻唑。是一种具有较强内吸性的保护性三唑类杀菌剂。杀菌作用机理主要是抑制附着孢黑色素的形成，从而抑制孢子萌发和附着孢形成，阻止病菌侵人和病菌孢子的产生。三环唑具有较强的内吸性，能迅速被水稻根茎叶吸收，并输送到稻株各部，一般在喷洒后2小时稻株内吸收药量可达饱和。对锈病和白粉病具有预防、铲除、治疗、熏蒸等作用。丙环唑的化学名称:1-[2-（2，4-二氯苯基）-4-丙基-1，3-二氧戊环-2-甲基]-1氢-1，2，4三唑，是一种具有保护和治疗作用的三唑类杀菌剂，内吸性强，具有双向传导性能，可被根、茎、叶部吸收，并能很快地在植物株体内向上传导，施药2小时即可将入侵的病原体杀死，1d～2d控制病 情扩展，阻止病害的流行发生，渗透力及附着力极强，特别适合在雨季使用；防治子囊菌，担子菌和半知菌引起的病害，特别是对小麦全蚀病、白粉病、锈病、根腐病，水稻恶菌病，香蕉叶斑病具有较好的防治效果。目前，三环唑和丙环唑单剂产品均国家标准[1-2]，二者与其它有效成分的混配产品分析方法亦有报道[3-8]，二者混配的分析方法未见报道。该文介绍了利用气相色谱法在同柱同条件下对三环·丙环唑525g/L悬乳剂中三环唑和丙环唑两组分的有效分离、测定方法。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

气相色谱仪：Agilent6890N，带FID检测器，HP化学工作站；

色谱柱：1m×3mm（i.d），内填5%OV-101/ChromosorbWAW-DMCS（150-180m）；

微量进样器：10L；

XH-C型旋涡混匀器,AnkeTDL-40B离心机；

图1 标样色谱图

图2 试样色谱图

三环唑标准品：99.5%（农业部农药检定所）；

丙环唑标准品：98.6%（国家农药质检中心）；

三环·丙环唑525g/L悬乳剂（浙江世佳科技有限公司）；

内标物：邻苯二甲酸正丁酯，应不含有干扰色谱分析的杂质。

溶剂：丙酮（分析纯）；

2.2 色谱条件

温度：柱温 225℃保持 5.5min，20℃/min程序升温至260℃保持6min，进样口230℃，检测器280℃；

流速（mL/min）：载气 25，氢气 30，空气 300；进样量：1L；

保留时间：邻苯二甲酸正丁酯约2.7min；三环唑约4.7min；丙唑约7.3min；

2.3 溶液配制

2.3.1 内标溶液的配制

称取邻苯二甲酸正丁酯2.5g于100mL容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，于XH-C型旋涡混匀器上摇匀静置备用。

2.3.2 标准溶液的配制

分别称取三环唑、丙环唑标准品0.09g、0.03g（精确至0.0002g）于10mL容量瓶中，准确加入内标溶液2.0mL，用丙酮稀释至刻度，于XH-C型旋涡混匀器上充分振摇静置备用。

2.3.3 试样溶液的配制

称取三环·丙环唑525g/L悬乳剂0.22g（精确至0.0002g）于10mL容量瓶中，加入丙酮直至样品被浸泡溶解，准确加入内标溶液2.0mL，再用丙酮稀释至刻度，于XH-C型旋涡混匀器上充分振摇后，于AnkeTDL-40B离心机上离心，静置备用。

2.4 测定方法

在上述色谱条件下，待仪器稳定后，连续进数针标准溶液，待相邻两针的相对响应值变化<1.5%时，按照标样、试样、试样、标样的顺序进行测定，色谱图见图1、图2。

三环·丙环唑 20%可湿性粉剂有效成分的质量分数%按下式计算：

式中：A1——标样中三环唑（丙环唑）与内标物峰面积比的平均值；

A2——试样中三环唑（丙环唑）与内标物峰面积比的平均值；

m1——标准品三环唑（丙环唑）的质量（g）；

m2——试样三环唑（丙环唑）的质量（g）；

P——标准品三环唑（丙环唑）的质量分数（%）

3 结果与分析

3.1 分析条件的选择

为使试样中的两组分在同柱同条件下得到有效分离并能准确定量测定，分别选用了几种内标物进行试验。结果表明，在一定的柱箱温度和载气流量条件下，邻苯二甲酸正戊酯与三环唑不能完全分离，在二者之间或之前没有合适的内标物可选。所以选用更为合适的邻苯二甲酸正丁酯作为内标物。

分别试用1m的SE-30、2m的OV-17和不同长度（0.5、1m）的OV-101填充柱对试样进行分离测定，在分离程度基本相同的情况下，三环唑在OV-17上峰型拖尾现象明显，而丙环唑出峰时间偏长；三环唑在0.5m的OV-101和1m的SE-30柱上出峰太快，且峰型对称性不好。若降低初始温度而提高升温速率，则基线飘移，峰型不好，定量不准确。通过试验，用一阶程序升温，试样在1m的OV-101柱上能好地分离，峰型对称性好，且10分钟便可完成一次测定。

3.2 分析方法的线性相关性测定

称取标准品三环唑0.8051g、丙环唑0.2525g（精确至0.0002g）于同一25容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，配制成标准储备溶液。用移液管分别准确移取标准储备溶液 0.5、1.0、2.0、3.0、5.0mL于5个10mL容量瓶中,分别加入内标溶液2.0mL用丙酮稀释至刻度，配成5组不同浓度的溶液。按前述规定的色谱条件测定，以标准品与内标的质量比为横坐标，以其峰面积比为纵坐标作图3、图4。其线性方程分别为Y三环唑=1.0042X-0.0353，Y丙环唑=2.9186X-0.0069；相关系数分别为 r三环唑=0.9997，r丙环唑=0.9996（表1）。

表1 分析方法的线性相关性试验数

图3 三环唑的标准曲线图

图4 丙环唑的标准曲线图

3.3 分析方法精密度测定

对同一试样分别称取5份，在上述色谱条件下，进行平行测定。检测结果经统计，该方法的标准偏差、变异系数三环唑为0.639和0.16%，为丙环唑0.328和0.26%（表2）。

表2 分析方法的精密度试验数据

3.4 分析方法的准确度测定

称取已知含量的试样5份，加入一定量的标准品，进行回收率测定，得出三环唑的回收率为98.95%～102.21%，丙环唑的回收率为 98.66%～101.89%（表3）。

表3 分析方法的准确度试验数据

3.5 结论

试验结果表明，该方法测定三环·丙环唑525g/L悬乳剂两种有效成分的质量分数，分离效果好，准确度、精密度高，线性关系好，符合定量分析要求。对不同配方规格的复配制剂，只需调整标准品和试样的称取量，此方法同样适用，而且操作简便易行，分析时间短、成本低廉，适用于企业生产的质量控制及质检机构农药产品质量检测。

[1]沈阳化工研究院有限公司.GB20701-2006.三环唑可湿性粉剂[S].北京：中国标准出版社，2007.

[2]沈阳化工研究院有限公司.GB23549-2009.丙环唑乳油[S].北京：中国标准出版社，2010.

[3]周卫群，胡昌弟，吴志华，等.20%三环唑·异稻瘟净的气相色谱法分析[J].农药,1996（02）：27-28.

[4]程运斌，刘育清.异稻·三环唑20%可湿性粉剂的气相色谱分析[J]农药科学与管理，2008，29（9）：18-20.

[5]程运斌，刘育清.30%苯醚甲·丙环唑乳油的气相色谱分析[J]农药，2007,46（9）：612-613.

[6]程运斌，刘育清.唑酮·三环唑20%可湿性粉剂气相色谱分析方法研究[J]甘肃农业大学学报，2011，46（6）：73-76.

[7]黄映君，多菌灵与三环唑的HPLC分析[J]农药，2005（01）：23-24.

[8]周宁，三环唑-异稻瘟净复合乳性悬浮剂气相色谱分析[J]农药，1990,29（5）：20-22.