破茎松萝对金黄色葡萄球菌感染小鼠血清自由基含量的影响

贾新梅

甘肃省武威市中医医院，甘肃武威 733000

松萝是子囊地衣纲茶渍目松萝科松萝属植物，又名树挂，松落，有长松萝和破茎松萝之分，是一种藻类和菌类共生植物，在我国分布广泛，有着悠久的药用历史。具有祛痰止咳、清热解毒、除湿通络、止血调经、驱虫等作用，用于治疗头痛目赤，咳嗽痰多，疟疾，瘰疬，带下，崩漏，外伤出血，痈肿，毒蛇咬伤等[6]。研究发现松萝富含巴尔巴地衣酸、松萝酸、地弗地衣酸、拉马酸和地衣多糖等活性物质，具有显著的生物学功效，有抗菌、抗毒素的作用[1]。松萝有多种经济用途,在药用抗菌、香料、食品、染料、日用化工、饲料、环境监测等方面都有利用[7]，由于其含有抗菌活性物质松萝酸和抗癌活性物质地衣多糖而引起人们的广泛关注。本实验以小鼠血清丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活力作为观察指标，研究破茎松萝对金黄色葡萄球菌感染小鼠血清自由基含量的影响，为探讨其对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用提供依据。

1 实验材料

1.1 药品

破茎松萝（河西三洲医药公司）。

1.2 试剂

SOD测试试剂（南京建成生物工程研究所）。

MDA测试试剂（南京建成生物工程研究所）。

1.3 菌株

金黄色葡萄球菌1.5×109/mL（武威市中医院实验室提供）。

1.4 仪器

VIS-7220型分光光度计（北京第二光学仪器厂）。

1.5 动物

昆明种普通级小鼠140只，体重18～22 g，雌雄各半，购自兰州医学院实验动物中心

2 实验方法

2.1 预实验[2-3]

将金黄色葡萄球菌菌液（浓度为1.5×109/mL）用无菌生理盐水稀释为1.5×109/mL（不稀释）、1.5×108/mL、1.5×107/mL、1.5×106/mL、1.5×105/mL五个浓度。经过预实验，计算得引起小鼠65%死亡菌液浓度为8.25×107/mL。

2.2 分组与造模

选用小鼠140只，雌雄各半，随机分为5组：空白对照组、模型组、破茎松萝高剂量组、破茎松萝低剂量组、鱼腥草对照组，每组28只。空白对照组、模型组分别灌胃生理盐水14 d，0.4 mL/只/d；破茎松萝高剂量组灌胃6.5%煎剂、破茎松萝低剂量组灌胃3.9%煎剂各14 d，0.4 mL/只/d；鱼腥草对照组灌胃13%鱼腥草煎剂14 d，0.4 mL/只/d。除空白对照组外，其余4组均于第6天小鼠腹腔注射用无菌生理盐水稀释为8.25×107/mL的金黄色葡萄球菌菌液0.5 mL/只。

2.3 MDA和SOD的测定

每组取小鼠8只，测其MDA含量及SOD活力。第15天小鼠眼眶取血，将各小鼠的血清取0.1 mL加入MDA测定试剂，按操作要求在分光光度计532 nm处测定吸光度，计算MDA含量；取各小鼠的血清取0.01 mL加入SOD测定试剂，按操作要求在分光光度计550 nm处测定吸光度，计算SOD活力。

表1 各组血清SOD活力和MDA含量变化（n=8）

3 结果

各组血清SOD活力及MDA含量的变化：模型组SOD活力降低和MDA含量升高，较空白对照组显著（均P＜0.05）;高剂量组SOD活力升高和MDA含量降低，较模型组显著（均P＜0.01）；低剂量组SOD活力升高和MDA含量降低，较模型组显著（均P＜0.05）；鱼腥草组SOD活力升高和MDA含量降低，较模型组显著（均P＜0.05）（具体数据见表下表）。实验结果显示，破茎松萝对金黄色葡萄球菌感染小鼠有明显的保护作用。

4 讨论

①正常体内产生一定量的自由基，自由基氧化生物膜的不饱和脂肪酸产生脂质过氧化物，使细胞的质膜（细胞膜、线粒体膜、内质网及溶酶体膜）破坏和功能障碍[4]。在生理状态下，自由基可被体内的自由基清除系统如SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化氢酶等迅速清除。在感染等病理情况下，可启动自由基连锁反应，自由基产生增多，清除酶的活力能力降低，产生于清除自由基的动态平衡严重破坏。

②本实验结果表明，金黄色葡萄球菌感染小鼠血清中SOD活力的降低和MDA含量的增高较空白对照组显著，说明金黄色葡萄球菌感染过程中清除自由基的防御功能减弱，脂质过氧化物损伤加重。破茎松萝能显著提高金黄色葡萄球菌感染小鼠血清SOD活力和降低MDA含量，调节自由基产生与自由基清除酶之间的平衡。可见，破茎松萝能提高自由基清除酶的活力，降低脂质过氧化物引起的损伤，从而对机体起到保护作用。

③松萝酸抗菌谱主要为革兰氏阳性细菌及结核杆菌。在试管中松萝酸对肺炎球菌、溶血性链球菌、白喉杆菌、结核杆菌都有很强的抑菌作用，抑菌浓度为1～5 μg/mL，至50 μg/mL可完全抑制细菌的生长。对金黄色葡萄球菌之抑制较上述细菌稍弱，但强于对革兰氏阴性细菌之作用。但也有报告对革兰氏阴性的百日咳杆菌、枯草杆菌、肺炎杆菌乃至大肠杆菌、变形杆菌有效者，对痢疾杆菌、伤寒杆菌则无效。在体外试验中，松萝酸对人型结核杆菌有显著的抑制作用[5]。

[1] 林源.松萝的研究现状[J].中国药业，2011，20（19）：27-29.

[2] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，1993:259-279.

[3] 徐叔云，卞如濂，陈修，等.药理实验方法[M].2版.北京：人民卫生出版社，1994：1340-1350.

[4] 李建生，孔桂莲.毒素清对大肠杆菌肺炎老龄小鼠组织自由基和前列腺素代谢变化的影响[J].中国中西医结合急救杂志，2001,8（3）：146-149.

[5] 李眀.松萝药理研究[J].中草药，2012,5（2）：236-238.

[6] 莫结丽，陈浩桉，陆惠文，等.HPLC测定自然口服液中甘草酸的含量[J].中药材，2001,24（1）：53.

[7] 李荣钦，苏印泉.松萝研究利用现状及前景[J].西藏科技，2007，8（173）：21-26.