格列苯脲对失血性休克大鼠肺损伤的保护作用及机制

杨凤玉 贾素贤

内蒙古自治区赤峰上京内分泌专科医院，内蒙古赤峰 024000

创伤等引发的失血性休克为临床常见的危重症，可导致多个器官功能障碍乃至病理损伤。肺脏由于其结构、功能特点，极易在失血性休克后发生急性肺损伤，严重时可造成急性呼吸功能障碍。失血性休克时，动脉平滑肌上的KATP 通道被激活[1]，对增加组织血流、维持器官正常功能具有重要意义[2-4]，而休克状态长时间持续时，KATP 通道的上述保护机制却可导致全身低血压和血管对升压药的低反应性，继而引发多器官功能障碍综合征。赵克森[5]利用失血性休克动物模型研究发现，KATP 阻断剂可减轻细胞膜超极化，并恢复血管反应性。基于此，本实验研究了KATP通道阻断剂格列苯脲在休克复苏期对肺损伤的保护作用，以期为休克早期肺功能保护、提高休克后存活率开辟新思路。

1 材料与方法

1.1 实验对象分组及处理方法

健康雄性 Wistar 大鼠 24 只，体重（300±30）g，由天津医科大学实验动物中心提供，将其随机分为对照组（C 组）、休克组（S 组）和格列苯脲组（G 组）。对照组仅行麻醉、插管；格列苯脲组于休克90 min 后，按照10 mL/kg 匀速由右股静脉注入1 mg/mL格列苯脲溶液 （美国Sigma公司产品）；休克组按上述方法仅给予生理盐水（10 mL/kg）。

1.2 创伤失血性休克动物模型建立

大鼠经10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，双侧股动脉及右侧股静脉插入PE-50 管，利用左股动脉抽放血进行休克造模，右侧股动脉进行平均动脉压 （mean artery pressure，MAP）监测，控制 MAP 在（45±5）mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa），持续时间90 min。右股静脉用于休克后复苏，回输抽出的血液及等量生理盐水，分别于复苏后4h处死大鼠，采集肺标本。

1.3 检测指标

采用大鼠髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）试剂盒 （南京建成生物工程研究所）检测肺组织匀浆液MPO值。真空加热干燥法测定肺湿/干重（W/D）比值。采用酶联免疫试剂盒（南京建成生物工程研究所）检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）水平（按照试剂盒操作）。

1.4 统计方法

采用SPSS 16.0统计软件进行统计学分析，计量资料数据以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t 检验。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 格列苯脲对失血性休克复苏期MAP的影响

创伤失血期（0～90 min）休克、格列苯脲组大鼠MAP 控制在（45±5）mm Hg。复苏初期（150 min）格列苯脲组与休克组相比 MAP 显著升高（P ＜ 0.05）；复苏后期（210～330 min）休克组同对照组比较MAP 下降，而格列苯脲与对照组之间无差异无统计学意义。见表1。

表1 各处理组不同时间点平均动脉压比较（±s）

表1 各处理组不同时间点平均动脉压比较（±s）

注：与C 组比较，*P＜0.05；与S 组比较，#P＜0.05

监测时点 平均动脉压（mm Hg）C 组 S 组 G 组失血期0 min 45min 90 min复苏期150 min 210 min 270 min 330 min 115.6±6.8 116.7±10.3 118.9±9.8 113.4±10.3 43.5±3.6 41.8±5.1 117.2±9.3 41.9±3.7 42.3±2.9 117.5±8.9 113.3±11.1 114.1±7.0 116.5±8.1 105.1±8.8 101.9±9.2*99.8±10.1*88.2±3.0*122.2±6.7#121.6±7.3#122.5±5.3#117.5±5.6#

2.2 格列苯脲对失血性休克复苏后TNF-α、IL-6 水平的影响

创伤失血性休克复苏4 h 后，休克组和格列苯脲组肺泡灌洗液TNF-α 浓度分别为83.12、38.92 ng/L，IL-6 浓度分别为840.10、37.92 ng/L， 均显著高于对照组 （TNF-α：16.50 ng/L，IL-6：123.06 ng/L）（P ＜ 0.01），但格列苯脲组上述指标与休克组相比已显著降低（P＜0.01）。见图1、2。

2.3 格列苯脲对肺组织匀浆MPO 值、组织W/D 值的影响

在创伤失血性休克复苏4 h 后，休克组和格列苯脲组肺组织MPO 活性分别为26.59 U/g 和13.21 U/g， 肺W/D比值则分别为7.66 和5.06，均较对照组显著升高（MPO：2.35U/g，W/D：3.87）（P ＜ 0.05），但格列苯脲组 MPO 活性及肺W/D 比值与休克组相比已显著降低（P＜0.05）。见图3、4。

3 讨论

格列苯脲是一种KATP 通道阻断剂，研究证实，格列苯脲具有显著改善失血性休克动物模型血流动力学和部分脏器功能的作用[6-7]。本研究通过创伤失血使大鼠处于休克状态，并维持休克状态90 min，然后对休克早期大鼠用格列苯脲、输血及生理盐水或仅输血及生理盐水进行复苏，成功建立大鼠失血性休克与复苏模型。目前，失血性休克的治疗原则中，除尽快采取止血治疗措施外，还需给予升压药物，使收缩压维持在80～90 mm Hg，以保证重要脏器的基本灌注需要。本研究结果发现，采用格列苯脲、输血及生理盐水可有效改善复苏后期MAP 水平，这与Salzman等[8]的研究结果是相似的。

研究表明，由中性粒细胞、内皮细胞等炎症细胞激活并释放大量炎症细胞因子（如 TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、TXA2等）以及氧自由基损伤等是休克时引起急性肺损伤的重要原因[9]。一般认为，TNF-α在机体炎症反应中细胞因子级联释放起核心作用；而IL-6 则在休克后期炎症反应的发生、发展中也发挥重要作用。临床常用的多巴胺等血管活性升压药物可能加重器官灌注不足和缺氧的风险，故其目前在失血性休克治疗时的应用受到诸多限制和争议。而本实验发现应用格列苯脲可明显降低大鼠创伤失血性休克复苏期肺组织炎症因子及氧自由基水平，减轻急性肺损伤[9-10]。

综上所述，失血性休克复苏期应用格列苯脲不仅可有效改善复苏后期MAP，还能够通过减轻失血性休克复苏期肺组织炎症反应和氧自由基损伤，起到保护作用。该保护作用的机制可能是：格列苯脲可阻断KATP 通道，进而改善了失血性休克后全身低血压和血管对升压药的低反应性状态。

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