HPLC法测定吡拉西坦的含量

贾淑梅，关翠林

（山西大同大学化学与化工学院，山西 大同 037009）

HPLC法测定吡拉西坦的含量

贾淑梅，关翠林

（山西大同大学化学与化工学院，山西 大同 037009）

采用kromasil C18柱，流动相为甲醇-水（体积比为10∶90），检测波长为210 nm，流速为0.8mL/min，柱温为40℃，建立了高效液相色谱法测定吡拉西坦氯化钠注射液中吡拉西坦含量的方法。结果表明：吡拉西坦在25～250μg/mL质量浓度范围内线性关系良好，线性相关系数r为0.999 2，RSD为1.04％（n=6），吡拉西坦的平均回收率为100.2％。利用此法测定吡拉西坦氯化钠注射液中吡拉西坦的含量，具有方法简便、快捷、准确可靠的优点。

高效液相色谱法；吡拉西坦；药物含量

吡拉西坦氯化钠注射液主要成份为吡拉西坦，能增强神经兴奋的传导，对因缺氧所致的逆行性健忘有改进作用。适用于急、慢性脑血管、各种中毒性脑病等多种原因所致的记忆减退及轻、中度脑功能障碍。可以增强记忆，提高学习能力[1-3]。

目前对吡拉西坦测定的方法有紫外分光光度法[4-5]、气相色谱法[6]、荧光光谱法、高效液相色谱法[7-9]等。紫外分光光度法简便可靠，但灵敏度较低，检测速度也较慢，不能很好地满足当今快速微量测定的现实要求；气相色谱法分离效果好，灵敏度高，分析速度快，操作方便，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱分析，使它的发展受到了束缚；荧光法灵敏度高、检出限低、但能产生强荧光的化合物相对较少。本文采用kromasil C18柱为色谱柱，以甲醇-水（10∶90）为流动相，检测波长为210 nm的条件下，建立了反相高效液相色谱法测定吡拉西坦氯化钠注射液中吡拉西坦含量的方法。该方法不仅干扰因素少，而且简便快捷，结果准确可靠、重现性好，可作为吡拉西坦氯化钠注射液制剂质量鉴定的指标之一。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

日本岛津（SHINADZU）LC-10A高效液相色谱仪；SPD-M10A二极管阵列检测器，CLASS-VP色谱工作站；HANGPING FA2004电子天平（上海天平仪器厂）；25μL微量进样器（日本岛津公司）

甲醇（色谱纯）；吡拉西坦对照品（中国药品生物制品检定所）；吡拉西坦氯化钠注射液（东北制药总产，产品批号：200905002）；配制用水均为Milli-Q纯水器处理的二次蒸馏水。

1.2 色谱条件

色谱柱：kromasilC18柱（5μm，150nm×4.6nm），流动相为甲醇-水（10∶90），流速为0.8mL/min，检测波长210 nm，进样量20μL，柱温40℃。

1.3 溶液配制

1.3.1 对照品溶液的配制

称取吡拉西坦对照品0.250 0 g于500mL的容量瓶中，用流动相稀释至刻度线，摇匀，配制成质量浓度为500μg/mL的吡拉西坦对照品溶液，测定时取上述对照品溶液配制成适宜质量浓度的标准工作溶液。

1.3.2 样品溶液的稀释

量取0.50mL吡拉西坦氯化钠注射液于100mL的容量瓶中用流动相稀释至刻度线，摇匀待用。

1.4 实验方法

取20μL进样液注入高效液相色谱仪中进行分析，记录色谱图，对其积分获得峰面积，绘制吡拉西坦的标准曲线，采用外标法定量。

2 结果与讨论

2.1 色谱图对照

量取吡拉西坦对照品适量，用流动相溶解并稀释成质量浓度为160μg/mL的吡拉西坦对照品溶液。取1.3.2项下的样品溶液。在1.2项的色谱条件下分别进样测定，得对照品及样品的色谱图，对比可知，氯化钠对测定无干扰。

2.2 流动相的选择

依据吡拉西坦既易溶于水又易溶于甲醇的性质，以甲醇和水作为流动相。在流速为0.8mL/min时，分别以甲醇与水的体积比为10∶90，20∶80为流动相测定。结果显示当甲醇与水的体积比为10∶90时，吡拉西坦的保留时间约为3.5min，且峰形尖锐（图2）；当甲醇与水体积比为20∶80时的保留时间大约为2min，而溶剂峰在1.5min左右，为防止溶剂对吡啦西坦造成干扰，所以选择甲醇与水的体积比为10∶90。

2.3 测定波长的选择

观察在线光谱图，吡啦西坦在195 nm左右有最大吸收。但是在此波长下，氯化钠也有吸收，对分析结果准确度有影响，所以该实验选择210 nm为测定波长。

2.4 标准工作曲线和检出限

分别量取2.3.1项下的吡拉西坦对照品溶液0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 mL于6支10 mL的比色管中，用流动相稀释至10mL刻度，摇匀，即配制成质量浓度分别为25，50，100，150，200，250μg/mL的吡拉西坦对照品溶液。分别在2.2项的色谱条件下测定，以峰面积A对吡拉西坦的质量质量浓度ρ进行线性回归，线性回归方程为A=2238 6ρ＋34 907，相关系数r=0.999 2，吡拉西坦在质量浓度25～250μg/mL范围内线性关系良好。

用流动相配制不同质量浓度的吡拉西坦对照品溶液，在2.2项的方法下测定，记录色谱图。以3倍信噪比得该方法的检出限为1.4μg/mL。

2.5 稳定性和精密度试验

量取吡拉西坦氯化钠注射液0.50mL于100mL得容量瓶中，用流动相稀释至刻度线，摇匀，分别放置0，2，4，6，8，10 h，再于2.2项的色谱条件下测定，测定结果的相对标准偏差为1.11％，表明样品溶液的稳定性较好。

取2.3.2项下的样品溶液，在2.2项的色谱条件下，重复进样6次，测定结果平均相对标准偏差为1.04％，表明本方法的精密度良好。

2.6 加标回收和样品测定

量取2.3.2项下的样品溶液4.00 mL分别于4支10 mL比色管中，然后标号为1～4号，分别往2，3，4号中加入1.50，2.50，3.50 mL 2.3.1项下的样品溶液，用流动相稀释至10 mL刻度，在2.2项的色谱条件下测定。计算回收率，结果列于表1。

取2.3.2项下的样品溶液，在2.2项的色谱条件下，重复进样3次，以标准曲线法定量，测得结果列于表2。

表1 吡拉西坦加标回收率试验

表2 样品含量测定结果

3 结束语

高效液相色谱法已经广泛应用于医药与化工方面，它具有灵敏度高、选择性好、分析时间短、重现性好、样品用量少和易于实现自动化等优点，适合于比拉西坦含量测定和质量控制。

[1]陆润基，郭平章.HPLC法测定健脑合剂中吡拉西坦的含量[J].广东药学，1999（03）：89-90.

[2]汝秋明，姜茁松，李春实.高效液相色谱法测定吡拉西坦注射液的含量[J].中国药师，2002（03）：58-59.

[3]于文洁，严云，莫宗琪.高效液相色谱法测定吡拉西坦氯化钠注射液中的有关物质[J].实用医药杂志，2005（07）：115-116.

[4]温坚，夏敬民.紫外分光光度法测定吡拉西坦氯化钠注射液中吡拉西坦的含量[J].中成药，2001（08）：39-40.

[5]陈雅，吴寒寅.分光光度法测定吡拉西坦的含量[J].沈阳药科大学学报，1997（03）：64-65.

[6]吴小韩，李崇英，何建明.气相色谱法测定吡拉西坦注射液中吡拉西坦的含量[J].中国医药工业杂质，1998（09）：10-12.

[7]盛太奎.高效液相法测定吡拉西坦葡萄糖注射液的含量[J].安徽医药，2005（02）：121-122.

[8]蔡鹏，季红英.高效液相色谱法测定吡拉西坦片中吡拉西坦的含量[J].华西药学杂志，2006，21（01）：100.

[9]FischerW，Kitt H R，Regenthal E，et al.determination of piracetam in piracetam and sodium chloride injection by RP-HPLC[J].J Neural Transmission，2004，111（9）：90.

〔责任编辑 杨德兵〕

Determ ining the Content of Piracetam in Piracetam and Sodium Chloride Injection by HPLC

JIA Shu-mei，GUAN Cui-lin
（College of Chemistry and Chemical Engineering，ShanxiDatong Univercity，Datong Shanxi，037009）

A method for determining the content of piracetam in piracetam and sodium chloride injection by high performance liquid chromatography was setup.Kromasil C18 column was used.Themobile phase wasmethanol-water

（10：90），and its flow rate was 0.8m l／min.The detection wavelength was 210nm.The temperature of column was 40℃.To establish a HPLCmethod for the determination of piracetam in piracetam and sodium chloride injection.The results show that the linear range of piracetam is 25～250μg／mL，the linear regression equation is A=22386 c＋34907（r=0.99920）.The RSD is 1.04％（n=6）and the average recovery is 100.2％.Themethod was found to be simple，rapid，sensitive and reproducible and is suitable to test the assay of piracetam in piracetam and sodium chloride injection.

HPLC；piracetam；determination

R927.2

A

2012-10-20

山西大同大学科学研究基金项目[2008K6]

贾淑梅（1964-），女，山西应县人，高级实验师，研究方向：无机化学。

1674-0874（2013）01-0050-05