瘦肉精快速检测卡的质量验证与评价

2013-09-12吉鸿武李海山张宁宁

中国猪业 2013年3期

关键词：瘦肉精盐酸阳性率

吉鸿武郑川李海山谢磊张宁宁梅凡

（北京市动物卫生监督所，北京市 100044）

瘦肉精快速检测卡的质量验证与评价

吉鸿武郑川李海山谢磊张宁宁梅凡

（北京市动物卫生监督所，北京市 100044）

为筛选出品质优良的 “瘦肉精”快速检测卡，保证检测结果的准确性，本文通过测定 “检测阈值、假阴性率、假阳性率”3个验证参数，对6个厂家的18批次产品的质量进行验证。结果表明，共15批次的产品符合国家相关部门要求；建议监管单位在采购 “瘦肉精”检测卡时，一定要进行产品质量验证试验；在条件受限时可优先对 “检测阈值”和 “假阴性率”进行验证。

瘦肉精；快速检测卡；质量验证；参数

因此，在 “瘦肉精”检测卡购置前进行质量验证是确保检测结果准确有效的重要手段。为筛选出品质优良的产品，提高检测结果的准确性，保障畜产品安全，本试验联系工作实际，对6个厂家18批次产品的质量进行验证，分析验证结果并提出建议，供同行参考。

1 材料

空白猪尿样品：从北京市某屠宰场采集猪尿液30份，用液-质联方法未检测出盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇。

盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的标准品。

盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇标准储备液（1 mg/mL）：称取盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇标准品约10.0 mg，分别置于l0 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。贮存于-18℃冰箱中，有效期为1年。

盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇标准中间工作液（10 g/mL）。用微量移液器移取标准储备液100 L，置于10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。贮存于-18℃冰箱中，有效期为1个月。

微量移液器：单道0～1000 L。

“瘦肉精”检测卡。样品的检测限为：盐酸克伦特罗2或3mg/L、莱克多巴胺3或5mg/L、沙丁胺醇5mg/L。

阴性猪尿样品：取空白猪尿样品1份5 mL，置于50 mL塑料瓶中。再分别移取适量盐酸克伦特罗的标准中间工作液加入空白猪尿中，配制浓度为0和盐酸克伦特罗检测卡检测限的1/2，混匀备用，现配现用。用同样的方法分别制备莱克多巴胺、沙丁胺醇的阴性猪尿样品。

随着我国经济的发展，社会的进步，涌现出越来越多的新型能源，而且为了满足绿色环保发展需求，社会对于煤炭需求量逐年降低，煤炭价格也长期处于低位徘徊，使得煤炭供给能力一直处于过剩状态，最终导致供应关系出现失衡。此外，随着行业的进一步发展，供给侧问题也逐渐浮出水面，煤炭企业经济效益每况愈下。所以，为了使煤炭行业实现可持续发展战略，需要实施供给侧结构性改革，为煤炭行业注入新活力，帮助煤炭企业提高经济收益。

阳性添加样品：取空白猪尿样品1份5mL，置于50 mL塑料瓶中。再移取适量盐酸克伦特罗标准中间工作液加入空白猪尿中，配制浓度为盐酸克伦特罗检测卡检测限的1和2倍，混匀备用，现配现用。用同样的方法制备莱克多巴胺、沙丁胺醇阳性猪尿样品。

2 方法

2.1 验证参数及判定标准

检测阈值：即试剂条能检测出来的最低浓度值。当检测阈值等于检测卡的检测限时，该检测卡为合格；当其小于或大于检测限时，会导致假阳性率或假阴性率的产生。

假阴性率和假阳性率：国内外对于快速检测技术的基本原则是 “绝不能有假阴性，但允许有一定的假阳性”。按照农业部兽药残专家委员会评审快速检测卡备案的有关要求，快速检测卡的假阳性率应小于10%。

2.2 检测卡的使用步骤及结果判读

按照产品说明书对样品进行前处理，用滴管滴加 2～3滴（约 70 L）检测液样品到剂卡孔内。加后计时，反应2～5分钟后判读结果，检测结果稳定，保存30分钟后结果不会发生变化。结果判定：C线显色，T线不显色，判为阳性；C线显色，T线显色，判为阴性。

表1 各公司 “瘦肉精”检测卡质量验证结果

2.3 检测限测定

用盐酸克伦特罗检测卡分别对阴性猪尿样品、阳性猪尿样品进行检测，每个样品两个重复，记录下来呈现阳性的最低浓度值。如果高浓度阳性猪尿样品也不呈现阳性，则配制浓度更高的阳性猪尿样品进行检测，直至出现阳性结果为止。

2.4 假阳性率的测定

取空白的猪尿样品30份，每份量为10mL，按照阴性猪尿样品的制备方法，制备60份阴性猪尿样品。用检测卡检测，每个样品做两个重复，统计假阳性数，按照下面的公式计算假阳性率。

假阳性率=假阳性数/样品总数×100%

2.5 假阴性率的测定。取空白的猪尿样品30份，每份量为10 mL，按照阳性猪尿样品的制备方法，制备60份阳性猪尿样品，用检测卡进行检测，每个样品做两个重复，统计假阴性数，按照下面的公式计算假阴性率。

假阴性率=假阴性数/样品总数×100%

3 结果与分析

本研究使用6个厂家18批次的“瘦肉精”检测卡对120份样品进行了检测限、假阳性率、假阴性率的验证，结果见表1。

3.1 质量验证的必要性

从验证结果来看，每个公司的检测卡产品均存在检测阈值偏高、假阳性或假阴性的问题，产品质量良莠不齐，个别公司的产品质量不符合国家要求。所以，畜产品加工企业或者监管部门在采购 “瘦肉精”检测卡时，一定要进行产品质量验证试验，以避免结果误判和资金浪费。

3.2 检测阈值的测定

从表1可以看出，大部分产品的检测阈值与检测限一致；但1号与6号产品的检测阈值超出检测限2倍左右，产品判定为不合格。因此，我们在选择产品时，应当首先剔除这2个不合格产品。当检测阈值高于或低于检测限时，会出现一定的假阴性率或假阳性率，导致问题畜产品流入市场或增加确认经费的投入，因此检测阈值是快速检测卡质量验证的首要指标。

3.3 假阴性率的测定

由于通过检测阈值去掉了2个产品，因此本试验并未发现假阴性产品，假阴性率为0，剩余产品符合国家有关要求。除了产品本身的问题，引起假阴性的原因还包括：个别样本中含有较为特殊物质或亚型成分，检测卡受潮、活性下降或失活，在超过规定时间后读取结果等。因此，在产品确定后，应当规范检测卡的保管和使用。

3.4 假阳性率的问题

结果显示，共有6批次产品存在假阳性，其中1个产品的假阳性率超过10%，判定为不合格。当检测卡灵敏度过高，尿液中含有和 “瘦肉精”类似代谢物或样品已被污染（例如自来水中残留的漂白粉，属于强氧化剂，会影响抗原抗体反应的进行）时，都将导致出现假阳性。此时须用其他方法确认该检测结果。

3.5 验证参数的选择

检测卡的验证参数共3个，分别是：检测阈值、假阴性率、假阳性率。检测阈值是非常重要的，只有二者相等时，才可进一步进行验证。同时，假阴性率也比较重要，根据国家相关规定，检测卡用于筛选方法时，假阴性率必须为零。而一定的假阳性率是国家允许的。由于产品质量验证试验涉及到液-质联用仪等设备材料，且过程较复杂，对试验条件和资金有一定要求。因此，在试验条件受限的情况下，可优先对“检测阈值”、 “假阴性率”这两个参数进行验证。