水线草的化学成分

姚海萍，梁振纲，杨先会，王宁，汤丽昌，邓世明

(1.海南大学热带生物资源教育部重点实验室，海南 海口 570228;2.海南大学 海洋学院，海南 海口 570228)

水线草(Hedyotis corymbosa Lam.)，又名伞房花耳草，系茜草科耳草属植物，广泛分布于我国东南、西南各地及热带亚洲、非洲和美洲［1］，其形态与同科同属植物白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd)极为相似.在现代医学临床治疗中，人们主要利用的是白花蛇舌草的解热、抗炎及提高免疫功能等方面的功效，并且在临床使用白花蛇舌草时常混入大量的水线草，以使临床用药安全和有效.鉴此，本实验对水线草中的化学成分进行了提取和分离，经纯化得到了较纯的单体，这为进一步研究水线草的药用功效奠定了基础.本实验共分离得到7 个化合物，笔者根据其理化性质和波谱学中的方法对其进行了结构鉴定，其化合物的化学结构式见图1.

图1 化合物Ⅰ～Ⅶ的结构式

1 实验部分

1.1 仪器与试剂1H-NMR 和13C-NMR 由Bruker AM-400 型(TMS 为内标)核磁共振谱仪测定;熔点由数字显示显微熔点测定仪测定(X-4，北京泰克仪器有限公司，温度未校正);Sephadex LH-20 是Pharmacia 公司产品;柱层析硅胶(200～300 目)和薄层色谱硅胶板为青岛海洋化工厂产品，所有试剂均为分析纯.

1.2 样品 水线草采自海南大学校园内，根据《海南常用中草药》鉴定为水线草(Hedyotis corymbosa Lam.)全草，标本收藏于海南大学海洋学院.

1.3 提取与分离 取水线草干燥全草4.3 kg，粉粹，用φ=60%的乙醇浸渍(15L)，提取4 次，经薄层层析检测，基本提取完全.提取液经减压浓缩(低于55 ℃)和回收乙醇后得浸膏，将浸膏用适量水溶解后，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，再经分别减压回收溶剂后，得石油醚部分的浸膏(约136.5 g)和乙酸乙酯部分的浸膏(约108 g)，本实验主要针对乙酸乙酯部分的浸膏进行分离纯化.

取乙酸乙酯部分的浸膏(100 g)，经硅胶干柱层析，再以V氯仿∶V丙酮=10∶2 的混合液洗脱，得到5 个组分:A—E.取A 段，经反复硅胶柱层析和Sepadex LH-20 (V氯仿∶V甲醇=1∶1)得化合物Ⅲ、Ⅳ、Ⅶ;B 段经反复硅胶柱层析和Sepadex LH-20 (V氯仿∶V甲醇=1∶1)，得化合物Ⅰ;C 段经反复硅胶柱层析和Sepadex LH-20 (V氯仿∶V甲醇=1∶1)，得化合物Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ.

2 结构鉴定

化合物Ⅰ，白色六方形晶体，mp∶135～137 ℃，硫酸-乙醇显黄色，易溶于氯仿.13C-NMR (CDCl3，100.6 MHz)δ:161.7 (C-2)，106.6 (C-3)，176.7 (C-4)，154.1 (C-5)，139.9 (C-6)，157.2 (C-7)，95.9 (C-8)，152.2 (C-9)，112.5 (C-10)，123.4 (C-1＇)，127.2 (C-2＇，6＇)，l14.0 (C-3＇，5＇)，160.7 (C-4＇)，55.1，55.9，61.1，61.8 (4×—OCH);1H-NMR (CDCl3，400.13 MHz)δ:3.99，3.98，3.92，3.88 (s，4×3H，4×—OCH3)，6.57 (s，H-3)，6.80 (s，H-8)，7.81 (d，J=8.8 Hz，H-2＇，6＇)，6.99 (d，J=8.8 Hz，H-3＇，5＇).其理化性质、波谱数据与相关文献［2-4］报道的基本一致，故鉴定该化合物为5，6，7，4＇-四甲氧基黄酮.

化合物Ⅱ，黄色六方形晶体，mp∶193-195℃，硫酸-乙醇显黄色，易溶于氯仿.13C-NMR (CDCl3，100.6 MHz)δ:161.1 (C-2)，106.3 (C-3)，177.0 (C-4)，153.7 (C-5)，137.8 (C-6)，154.2 (C-7)，98.9 (C-8)，151.0 (C-9)，112.2 (C-10)，123.5 (C-1＇)，127.4 (C-2＇，6＇)，114.1 (C-3＇，5＇)，161.9 (C-4＇)，55.2，61.4，61.8 (3×—OCH3);1H-NMR (CDCl3，400.13 MHz)δ:3.89，3.99，4.04 (s，3×3H，3×—OCH3)，10.76 (s，—OH)，6.89 (s，H-3)，6.62 (s，H-8)，7.82 (d，J=8.9 Hz，H-2＇，6＇)，7.00 (d，J=8.9 Hz，H-3＇，5＇).其理化性质、波谱数据与相关文献［2，4］报道的基本一致，故鉴定该化合物为7-羟基-5，6，4＇-三甲氧基黄酮.

化合物Ⅲ，黄色六方形晶体，mp:147～149 ℃，硫酸-乙醇显黄色，易溶于氯仿.13C-NMR (CDCl3，100.6 MHz)δ:161.2 (C-2)，107.3 (C-3)，177.1 (C-4)，154.5 (C-5)，140.4 (C-6)，157.7 (C-7)，96.3 (C-8)，152.6 (C-9)，112.2 (C-10)，124.1 (C-1＇)，108.8 (C-2＇)，114.3 (C-3＇)，151.9 (C-4＇)，111.2 (C-5＇)，119.6 (C-6＇)，56.1，56.2，56.3，61.5，62.2 (5×—OCH3);1H-NMR(CDCl3，400.13 MHz)δ:3.92，3.96，3.98，3.99×2 (s，5×3H，5×—OCH3)，6.62 (s，H-3)，6.80(s，H-8)，7.32 (d，J=2 Hz，H-2＇)，6.97 (d，J=8.4 Hz，H-5＇)，7.51 (dd，J=2 Hz，J=8 Hz，H-6＇).其理化性质、波谱数据与相关文献［5］报道的基本一致，故鉴定该化合物为3＇，4＇，5，6，7-五甲氧基黄酮.

化合物Ⅳ，黄色无定形粉末，mp∶280-284 ℃，硫酸-乙醇显黄色，易溶于二甲亚砜.13C-NMR (DMSO，100.6 MHz)δ:l64.4 (C-2)，l02.9 (C-3)，l82.6 (C-4)，153.3 (C-5)，131.9 (C-6)，157.8(C-7)，94.8 (C-8)，l52.9 (C-9)，104.6 (C-10)，121.8 (C-1＇)，129.0 (C-2＇，6＇)，116.5 (C-3＇，5＇)，161.7 (C-4＇)，60.5 (—OCH3);1H-NMR (DMSO，400.13 MHz)δ:3.75 (s，6-OCH3)，6.59 (s，H-3)，6.78 (s，H-8)，6.92 (d，J=8.8 Hz，H-3＇，5＇)，7.92 (d，J=8.4 Hz，H-2＇，6＇)，10.42 (s，7-OH)，10.44 (s，4＇-OH)，13.1 (s，6-OH).其理化性质、波谱数据与相关文献［6］报道的基本一致，故鉴定该化合物为5，7，4＇-三羟基-6-甲氧基黄酮.

化合物Ⅴ，黄色无定形粉末，mp∶256-260 ℃，硫酸-乙醇显橙黄色，易溶于二甲亚砜.13C-NMR(DMSO，100.6 MHz)δ:164.1(C-2)，102.8 (C-3)，182.3 (C-4)，152.2 (C-5)，132.0 (C-6)，158.7 (C-7)，91.6 (C-8)，152.7 (C-9)，105.2 (C-10)，l21.2 (C-1＇)，128.6 (C-2＇，6＇)，116.0 (C-3＇，5＇)，161.4 (C-4＇)，56.5，60.1 (2×—OCH3);1H-NMR (DMSO，400.13 MHz)δ:3.93，3.74 (s，2×3H，2×—OCH3)，6.85 (s，H-3)，6.93 (s，H-8)，6.95 (d，J=9.60 Hz，H-3＇，5＇)，7.97 (d，J=8.80 Hz，H-2＇，6＇)，10.40 (s，4＇-OH)，12.93 (s，5-OH).其理化性质、波谱数据与相关文献［7］报道的基本一致，故鉴定该化合物为5，4＇-二羟基-6，7-二甲氧基黄酮.

化合物Ⅵ，白色针状晶体，mp∶139-144 ℃，硫酸-乙醇显紫色，易溶于氯仿.13C-NMR(CDCl3，100.6 MHz)δ:38.93 (C-1)，27.62 (C-2)，79.38 (C-3)，38.93 (C-4)，55.52 (C-5)，18.69(C-6)，33.28 (C-7)，40.35 (C-8)，48.06 (C-9)，37.24 (C-10)，23.70 (C-11)，124.75 (C-12)，139.91 (C-13)，42.42 (C-14)，29.07 (C-15)，26.96 (C-16)，34.08 (C-17)，59.41 (C-18)，40.00 (C-19)，39.94 (C-20)，31.59 (C-21)，41.86 (C-22)，28.45 (C-23)，15.99 (C-24)，15.93 (C-25)，17.19 (C-26)，23.60 (C-27)，28.44 (C-28)，17.78 (C-29)，21.71 (C-30);1H-NMR (CDCl3，400.13 MHz)δ:5.17 (1H，m，H-12)，3.22 (1H，dd，J=5.2 Hz，J=5.6 Hz，H-3)，1.49，1.26，1.09，1.04，1.01，0.97，0.80，0.77 (24H，s，8×—CH3).其理化性质、波谱数据与相关文献［8］报道的基本一致，故鉴定该化合物为α-香树精.

化合物Ⅶ，白色针状晶体，mp∶135～138 ℃，硫酸-乙醇显紫色.该化合物TLC 的Rf值及显色行为与β-谷甾醇标准品一致，与β-谷甾醇标准品混合后熔点不下降，故该化合物确定为β-谷甾醇.

［1］丛 蓉，旷丽莎，冯 静，等.水线草初提物药理作用的初步研究［J］.华东师范大学学报:自然科学版，2007，2:137-140.

［2］HORIE T，OHTSURU Y，SHIBATA K，et al.13C-NMR spectral assignment of the A-ring of polyoxygenated flavones［J］.Phytochemisto，1998，47(5):865-874.

［3］ZOU G A，SU Z H，ZHANG H W，et al.Flavonoids from the stems of Croton caudatus Geisel.var.tomentosus Hook［J］.Molecules，2010，15:1097-1102.

［4］邓世明，杨先会，王宁，等.外来入侵植物假臭草的黄酮类成分研究［J］.西北植物学报，2009，29 (12):2548-2550.

［5］MACHIDA K，OSAWA K.On the flavonoid constituents from the peels of Citrus hassaku Hort.ex TANAKA［J］.Pharmaceutical Society of Japan，1989，37 (4):1092-1094.

［6］COLEMAN P C，POTGIETER D，POTGIETER D J J，et al.Flavonoids of Geigeria［J］.Phytochemistry，1984，23 (5):1202-1203.

［7］RAUTER Amélia P，BRANCO Isabel，TQSTÃO Zélia，et al.Flavonoids from Artemisia campestris subsp.Maritima［J］.Phytochemistry，1989，28 (8):2173-2175.

［8］丁兰，徐福春，王 瀚，等.异叶败酱化学成分的研究及体外细胞毒性检测［J］.西北师范大学学报:自然科学版，2007，43(3):62-65.