北豆根果实主要成分分析

杨国慧，纪春茹，韩德果，林春和

（1.农业部东北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室/东北农业大学园艺学院，哈尔滨 150030；2.黑龙江省格润药业有限公司，黑龙江 伊春 153100）

北豆根学名蝙蝠葛（Menispermum dauricum DC.），为防己科（Menispermaceae）缠绕落叶木质藤本植物。主产于黑龙江、吉林、辽宁等地，以干燥根茎入药，属地道北药。北豆根味苦，性寒，具有清热解毒，祛风止痛，消肿之功效，主治咽喉肿毒、口腔炎、肺炎、气管炎、肠炎、痢疾、蛇虫咬伤等。北豆根含有多种生物碱，总生物碱含量为1.7%～2.5%，主要为蝙蝠葛碱（Dauricine）、蝙蝠葛苏林碱（Dsurisoline）、蝙蝠葛诺林碱（Daurinoline）等。这些生物碱不仅具有抑菌消炎作用，而且还具有改善心脑血管循环、提高免疫力、抗肿瘤、抗心率失常、抗血栓等功用[1]。

目前，对北豆根研究主要集中在生物碱成分分析、提取工艺、药品加工工艺、药理作用等方面[2-3]，也有对其生物学特性和人工栽培技术研究[4-5]，但是对北豆根果实成分研究却未见报道。

本研究通过测定北豆根果实主要成分含量，包括可溶性固形物、糖、酸、蛋白质、维生素C、花色苷及生物碱含量，比较果实中与一年生根茎中生物碱含量，为北豆根果实利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

北豆根果实为采自黑龙江省伊春市南岔区的野生果；根茎为采用种子和根状茎进行人工种植获得的1年生根茎，种植地点为东北农业大学香坊实验实习基地。

1.2 方法

1.2.1 果实中主要化学成分的测定

果实可溶性固形物测定采用上海索光WAY-2S数字阿贝斯折射仪[6]，可溶性总糖测定采用蒽酮比色法[6]，还原性糖测定采用3，5-二硝基水杨酸（DNS）比色法[6]，可滴定酸测定采用酸碱滴定法[6]，维生素C测定采用二甲苯-2，6-二氯靛酚比色法[6]，可溶性蛋白质含量测定采用考马斯亮蓝比色法[6]，花色苷含量测定采用盐酸甲醇比色法[7]，试验采用上海天普UV-1800紫外分光光度计进行测定。

1.2.2 果实及根茎中生物碱的测定

采用高效液相色谱法，所用仪器为日本岛津高效液相色谱仪LC-10AVP，蝙蝠葛碱标准品由中国药品生物制品检定所生产，纯度以96.6%计。

蝙蝠葛碱提取液的制备[2]：将北豆根根茎晾干研碎，取研碎的粉末1 g。取野生北豆根果5 g，对果实做三种不同处理：①将果实研碎；②将果实四周用手术刀切成不同的伤口；③作为对照（CK）不进行任何处理。向上述处理过的果实及根茎中加入20%氨溶液1 mL及氯仿30 mL浸泡过夜，然后进行旋转蒸发，残渣加甲醇溶解，定容，0.45 μm微孔滤膜过滤，取滤液作为供试品待测液。

色谱条件如下：色谱柱，phenomenex C18（4.6 mm×150 mm，5μm）；柱温，30℃；流动相，乙腈-0.2%磷酸（20∶80）；流速，1 mL·min-1；检测波长，284 nm；进样量，20μL[2]。

1.3 数据处理与分析

采用高效液相色谱仪器中的Breeze软件、Excel 2003和SPSS18.0分析软件处理数据。

2 结果与分析

2.1 果实中主要化学成分的测定

分析结果表明，北豆根果实中可溶性固形物含量为8.5%、可溶性总糖含量为7.54%、还原性糖含量为0.111%、可滴定酸含量为1.179%、可溶性蛋白质含量为1.94 mg·g-1、维生素C含量为254.8 mg·100 g-1、花色苷含量为41.5 mg·100 g-1。

2.2 果实不同处理方法对生物碱含量测定的影响

以峰面积为纵坐标，蝙蝠葛碱含量为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程为：Y=6.71e+008X-1.73e+005，R=0.998893，R2=0.997788，其线性范围在0.002～0.01 mg。

由表1可知，处理2果实切伤浸泡测定的结果极显著高于处理1果实研碎浸泡和处理3对照，处理1果实研碎浸泡和对照差异不显著。原因可能是处理1将研磨碎的果实转移到三角瓶进行浸泡，从研钵转移到三角瓶的过程中有部分损失；向三角瓶中加入氨水和氯仿时，立即会有不溶物形成沾到瓶壁上，在浸泡过夜的过程与浸泡液未有接触也会造成一定的损失。对照并未对果实进行任何处理，溶剂未进入果实中，所以提取效果不好。而处理2在提取过程中未经过转移，提取溶剂与果实充分接触，因而测定效果较好。

2.3 果实与根茎中蝙蝠葛碱含量的比较

以根状茎和种子繁殖获得的根茎中蝙蝠葛碱含量差异不显著，但两者皆极显著高于果实中蝙蝠葛碱含量（见表1、图1）。

表1 北豆根果实及根茎中蝙蝠葛碱含量Table1 Dauricine content in fruit and rhizome of Menispermum dauricum DC.

表1 北豆根果实及根茎中蝙蝠葛碱含量Table1 Dauricine content in fruit and rhizome of Menispermum dauricum DC.

注：不同大小写字母分别表示0.05和0.01水平差异显著。Note:Different capital and small letters indicate significant differenceat 0.05 and 0.01 levels,respectively.

图1 蝙蝠葛碱的峰图Fig.1 Peak map of dauricine

3 讨论与结论

北豆根果实为核果，近球形或卵圆形，熟时黑色、汁少、味酸而苦。糖的含量、种类及糖酸比对果实味道影响很大。果实中含有的可溶性糖主要有蔗糖、葡萄糖和果糖，果糖最甜，葡萄糖风味最好。试验结果表明，北豆根果实中可溶性总糖含量为7.54%，还原性糖含量仅为0.111%，因此成熟果实中积累的主要为非还原糖。

维生素C含量是评价果实营养价值的常规指标，花色苷含量不仅和果实着色有关，也是目前评价果实营养价值的一个重要指标。试验表明，北豆根果实中维生素C量为254.9 mg·100 g-1，接近高维生素C含量树种，如刺玫果、猕猴桃和黑穗醋栗等，可将北豆根果实作为维生素C源加以利用。实际中观测北豆根果实染色能力很强，但测定结果表明，北豆根果实花色苷含量与越橘、蓝靛果、树莓相比较低[8]。

试验测定表明，北豆根果实中蝙蝠葛碱含量低于根茎中含量，为2.309 mg·g-1FW。果实中除蝙蝠葛碱外，还含有其他种类生物碱（见图1B），在蝙蝠葛碱峰旁边还有一个高峰，推测是另一种生物碱，而且含量也很高。因此可以考虑对果实中生物碱作深入分析。

[1]李铭,单保恩.北豆根的研究现状[J].国外医学中医中药分册,2005,27(5):267.

[2]于维萍,傅春升,陶琳璐,等.HPLC法对不同产地北豆根中蝙蝠葛碱的测定[J].齐鲁药业,2005,24(3):143-144.

[3]郑艳春,秦婷,崔雅慧.北豆根化学成分及其药理作用的研究进展[J].中国医药导报,2011(3):61-62.

[4]张志环,刘立波,许忠海,等.北豆根的生物学特性[J].东北林业大学学报,2006,34(2):48-50.

[5]刘兴权,周淑荣,吴连举,等.北豆根的无性繁殖[J].特种经济动植物,2008(4):37.

[6]高继国,郭春绒.普通生物化学教程实验指导[M].北京:化学工业出版社,2009.

[7]张晓松,孙艳梅,胡振生,等.都柿果酒在酿制过程中总酚和花色苷含量和抗氧化活性[J].东北农业大学学报,2010,41(3):120-124.

[8]杜鹏飞,杨国慧.树莓果实维生素C含量测定方法的研究[J].东北农业大学学报,2009,40(2):31-33.